例如在研究肿瘤细胞的增殖信号通路时,科研人员可以以某个关键的信号蛋白为诱饵,利用 Co-IP 免疫沉淀找出与之相互作用的其他蛋白,揭示肿瘤细胞异常增殖的分子机制。在神经科学领域,Co-IP 免疫沉淀可用于研究神经元中蛋白质的相互作用,了解神经递质释放、突触可塑性等过程的分子基础。虽然 Co-IP 免疫沉淀技术有着诸多优势,如能够在接近生理...
查看详细 >>孵育结束后,加入 Protein A/G 珠子,再次孵育,使抗原 - 抗体复合物与珠子紧密结合。随后通过离心或磁力分离,将结合有复合物的珠子收集起来,接着用洗涤液多次洗涤,去除未结合的杂质,确保沉淀的纯度。,利用洗脱液将目标蛋白从珠子上洗脱下来,得到纯化的目标蛋白,用于后续的分析检测,如蛋白质印迹(Western Blot)、质谱分析(M...
查看详细 >>之后加入固相载体,使其与抗体结合,形成稳固的免疫复合物。通过离心,将免疫复合物沉淀到离心管底部,去除上清液,此时沉淀中就富集了目标抗原及与之相互作用的分子。为了提高纯度,还需对沉淀进行多次洗涤,去除非特异性结合的杂质。,使用洗脱缓冲液将目标抗原从免疫复合物中洗脱下来,得到可供后续分析的样品。免疫沉淀技术在多个领域有着广泛的应用。在蛋白质-...
查看详细 >>将吸取的培养液转移至无菌离心管,放入离心机,以 1000 - 1500 转 / 分钟的速度离心 5 - 10 分钟,使细胞沉淀。之后,缓慢吸取上清液,转移至新的无菌离心管,上清液即为检测样本。贴壁细胞取样时,同样做好消毒工作。先用无菌 PBS 缓冲液冲洗细胞 2 - 3 次,每次冲洗时,轻轻晃动培养瓶,让缓冲液充分接触细胞表面,带走杂质。...
查看详细 >>尽管免疫沉淀技术具有高特异性和广泛的应用前景,但其也存在一些局限性。例如,抗体的交叉反应性可能导致假阳性结果,而低丰度蛋白的检测可能受到样品复杂性和实验灵敏度的限制。此外,免疫沉淀实验通常需要较长的操作时间和较高的实验成本。近年来,随着技术的不断发展,免疫沉淀的衍生技术(如染色质免疫沉淀ChIP、RNA免疫沉淀RIP)也在表观遗传学和RN...
查看详细 >>在微生物的世界里,支原体虽体型微小,却有着不容小觑的影响力。支原体是一类缺乏细胞壁的原核生物,独特的结构赋予它多样的形态,在显微镜下,球状、杆状、丝状等形态都能见到。支原体分布于自然界,土壤、水源以及人和动物体内都是它的栖息地。就人体而言,呼吸道与泌尿生殖道常是支原体的 “驻扎地”。肺炎支原体便是引发支原体肺炎的 “罪魁祸首”。它主要借助...
查看详细 >>发现之旅:解锁支原体的神秘面纱19 世纪,科学家从患病牲畜体内分离出支原体,开启对这一微生物的探索之旅。支原体无细胞壁,形态因此极为多变,能够在不同环境中灵活适应。此外,支原体代谢系统简单,对生长环境要求苛刻,需要特殊的营养成分维持生命活动。这些独特的生物学特性,不仅使支原体在微生物界独树一帜,也为科研人员带来了诸多挑战。健康威胁:支原体...
查看详细 >>首先是样品制备,对于细胞样品,需要选择合适的细胞培养条件,确保细胞处于正常生理状态。收集细胞后,使用特定的裂解液进行裂解,裂解液的成分需精心调配,既要保证细胞充分破碎,释放出细胞内的蛋白质,又要避免破坏蛋白质的结构与活性。裂解过程通常在低温环境下进行,以减少蛋白酶对蛋白质的降解。细胞裂解完成后,将裂解液与特异性抗体混合,在适宜的温度和时间...
查看详细 >>我们向裂解液中加入针对某个已知蛋白(诱饵蛋白)的特异性抗体,抗体与诱饵蛋白结合形成抗原 - 抗体复合物。如同 IP 免疫沉淀一样,借助 Protein A/G 磁珠或琼脂糖珠等固相载体,将抗原 - 抗体复合物从复杂的裂解液中分离出来。此时,与诱饵蛋白相互作用的其他蛋白质(猎物蛋白)也会随着诱饵蛋白一起被沉淀下来,从而实现对蛋白质复合物的富...
查看详细 >>防治支原体:多管齐下守护健康预防支原体,关键在于养成良好的个人卫生习惯。勤洗手,用肥皂或洗手液,按照 “七步洗手法” 揉搓双手至少 20 秒,能有效去除手上的支原体。在人员密集场所,佩戴口罩,既能阻挡自己喷出的飞沫,也能防止吸入他人携带的病原体。同时,保持室内空气流通,定期开窗通风,降低空气中支原体的浓度。一旦支原体,及时就医是首要选择。...
查看详细 >>在生命科学研究的微观世界里,探索生物分子之间的相互作用关系犹如在错综复杂的迷宫中寻找线索。免疫沉淀技术,作为一种强大的研究手段,如同为科研人员点亮了一盏明灯,帮助他们深入剖析生物分子的奥秘。免疫沉淀的原理基于抗原与抗体之间高度特异性的结合反应。抗体是免疫系统产生的一种特殊蛋白质,它能够精细识别并紧密结合特定的抗原分子。在实验操作中,首先将...
查看详细 >>免疫沉淀技术,历经数十年发展,已成为生命科学研究中不可或缺的重要工具。它起源于对免疫系统基本机制的研究,初用于分离和鉴定抗体及抗原,随着科研需求的增长与技术的进步,其应用范畴不断拓展。免疫沉淀技术的精妙之处在于利用抗原与抗体间高度特异性的结合。在复杂的生物样品环境中,特定抗体如同精确的分子 “导航仪”,能从成千上万种分子中找到并结合目标抗...
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