云南褐藻寡糖检测方法

    寡糖片段的比对选择：对来源于植物细胞壁的寡糖-果胶寡糖、植物致病病菌细胞壁或虾蟹壳的寡糖-壳寡糖和海洋藻类的寡糖-褐藻寡糖进行促进植物生长和诱导植物抗逆活性的筛选，获得具有开发与应用前景的寡糖片段。促生长活性与机理研究：将筛选出的褐藻寡糖应用于植物植株、愈伤组织和悬浮细胞的生长调节，探讨了褐藻寡糖促生长的作用机制，为在植物促生长领域的开发应用提供理论基础。抗逆性能测试与机理表征：将不同浓度的褐藻寡糖片段进行植物抗逆性研究。探讨褐藻寡糖在低温、干旱、病害时对植物的诱导抗逆作用，探讨褐藻寡糖在诱导植物抗逆性产生过程中的作用机理，为褐藻寡糖在植物抗逆领域的开发应用奠定基础。寡糖与植物细胞的结合部位及影响因素：利用激光共聚焦显微技术研究褐藻寡糖与植物细胞的结合过程，并通过多种物质对标记寡糖的竞争性抑制，证明寡糖与植物细胞的结合与作用部位，初步探讨褐藻寡糖与植物细胞的结合与信号传导过程。 褐藻寡糖对植物的抗逆机制是通过诱导作用实现的。云南褐藻寡糖检测方法

褐藻寡糖对SOD活性的影响SOD是植物体内重要抗逆酶类之一,能够催化O-2·歧化反应,生成H2O2和O2,H2O2在POD、CAT和谷胱甘肽过氧化物酶催化下转化为水而去除,各种环境胁迫均能不同程度提高其活力,以增强植物去除O-2·能力。随着低温胁迫时间延长,水处理组细胞损伤加剧,SOD活力不断上升,去除O-2·能力逐渐增强。喷施ADO后进行低温胁迫,0.05%,0.20%,0.30%ADO组SOD活力短时间内迅速上升,说明ADO对烟C的SOD活力产生了诱导作用,随着时间变化O-2·产生和去除达到动态平衡,其SOD活力缓慢回落,以0.20%浓度ADO诱导效果比较好,SOD活力6h后诱导增强至空白对照的6倍,这对于提高烟C去除O-2·能力具有重要作用。0.10%浓度ADO在6～24h之内没有明显改变SOD活力大小,维持在比较恒定水平,但48hSOD活力迅速上升,表明细胞内O-2·含量增加,细胞受到了损伤破坏。高浓度1.00%ADO会破坏烟C叶片细胞结构,造成保内物质渗漏,加剧低温下叶片损伤,超出了植株自身修复能力,产生了毒副作用,SOD活力逐渐降低。云南褐藻寡糖检测方法褐藻寡糖是一种由褐藻多糖（褐藻胶）经过裂合酶降解而获得的小分子量片段。

褐藻胶为海洋褐藻细胞壁中的组成物质，约占 藻细胞干重的17%～45％。褐藻寡糖是由褐藻中的褐藻 胶通过氧化降解、酸水解或者裂合酶降解而得到的 小分子量片段。海洋寡糖可以参与植物的生长发育，通过促进种子的萌发和根系的发育，促进植物吸收和利用营养物质，提高多种酶的活性，促进植物的光合作用等，从而促进植物的生长发育，提高植物的产量及品质。Natsume等于1994年报道褐藻胶酶解之后获得的降解产物对于多种植物都可以起到延长其生命周期的作用；Quoc等进一步研究发现，褐藻胶的酶解产物中分离得到的三糖对大麦根 生长活性有明显的促进作用。刘瑞志用0.05％～ 0.30％的褐藻寡糖处理经过干旱处理的番茄，发现0.2％褐藻寡糖处理的试验组诱导抗旱效果比较好， 可以提高番茄体内 ＣＡＴ、ＳＯＤ、ＰＡＬ 和 ＰＯＤ 活力以及降低 ＭＤＡ 含量。这说明褐藻寡糖可以作为一种诱导因子提高番茄植株的抗旱能力，保护番茄植 株不受干旱伤害，是一种效果良好的抗旱诱抗剂。 Hu等用0.075％ 的褐藻寡糖溶液处理玉米种 子，结果发现在种子萌发的第７天，试验组的根长和 苗高分别比其对照组提高了18％和46％。

褐藻寡糖对CAT活性的影响植物遭受低温伤害时,过氧化氢酶系统首先受到破坏损伤,造成体内过氧化氢去除链条断裂、积累增加,由于过氧化氢积累可以严重损害植物细胞膜和其它代谢酶类,因此CAT活力能够反映植物去除过氧化氢能力强弱和植物遭受损程度大小。图6为烟C叶片CAT活力变化。由图可知,水处理组在低温胁迫后,短时间内CAT活力迅速下降,随着时间延长,植物体内抗逆反应启动,会增加CAT生成以去除积累的过氧化氢,因此CAT含量又缓慢升高。喷施寡糖后进行低温胁迫,0.05%,0.20%,0.30%ADO组中烟CCAT活力变化规律相似:短时间内均能够诱导烟CCAT活力迅速升高,12h达到高峰,且峰值都高于空白对照,随着时间延长,CAT活力又缓慢下降,以0.20%褐藻寡糖的诱导效果好;0.10%褐藻寡糖处理组在6～24h之内CAT含量与对照相比变化较小,但48h烟C叶片CAT活力迅速下降,说明CAT受到破坏而活力降低。高浓度1.00%褐藻寡糖组经过相同时间低温胁迫,其CAT活力均低于水处理组,说明1.00%褐藻寡糖对烟C产生了毒副作用,加剧了烟C叶片损伤。海洋寡糖来源于海洋的寡糖，以几丁寡糖、褐藻寡糖、卡拉胶和琼胶寡糖等，它们来源丰富，结构独特。

AOS能够增强植株对病毒病和致病疫霉的抗性。进一步研究表明,AOS诱导的植物抗病毒病的机制可能是AOS促进植物体内SA含量增加,激发SA信号通路,一方面促使植物体内活性氧的产生,增强植物抵抗病毒的侵染;另一方面SA信号通路直接激发下游防御基因的表达,进而增强植物抗病。AOS诱导植物抗致病疫霉的机制可能是AOS一方面通过提高ROS的产生及抗病相关基因的表达,减轻致病疫霉造成的胁迫,增强植株抗性;另一方面,AOS通过调控气孔的关闭和胼胝质的沉积,抵抗致病疫霉的入侵。褐藻寡糖能够作为信号调节分子作用于植物，促进植物的生长，此研究为海洋活性寡糖的开发开辟了新的途径。云南褐藻寡糖检测方法

褐藻胶寡糖（AOS）使毒死蜱对小麦幼苗的伤害有明显缓解作用，增强植物对毒死蜱胁迫的抗性。云南褐藻寡糖检测方法

    褐藻寡糖对黄瓜幼苗生长指标的影响黄瓜幼苗经不同分子量的褐藻寡糖处理，处理14ｄ后，在外观形态方面，ADO2和ADO3处理过的黄瓜幼苗与对照组相比有明显差别，ADO2和ADO3处理过的幼苗长势明显好于对照组，经不同分子量的ADO处理的黄瓜幼苗的生长状况均好于对照组，各种生长指标包括株高、茎粗、株幅及鲜重都明显高于对照。ADO1，ADO2，ADO3，ADO4处理植株的株高分别提高了％，％，％和8％，茎粗分别提高了５．８％，２３．９％，２２．７％和７．０％，株幅分别提高了２１．９％，２７．０％，３５．４％和２４．３％，鲜重分别提高了５０．８％，５３．５％，７４．３％和５４．１％。其中ＡＤＯ２和ＡＤＯ３处理组黄瓜幼苗的各项生长指标都高于ＡＤＯ１和ＡＤＯ４处理组。因此，选择ＡＤＯ２和ＡＤＯ３进行后续试验。褐藻寡糖对黄瓜叶片叶绿素含量的影响由图３所示，经过ＡＤＯ处理的黄瓜叶片中的叶绿素ａ和叶绿素总含量均比蒸馏水处理的对照有明显性提高，ＡＤＯ处理组组间比较发现，ＡＤＯ３对叶绿素含量的提高比ＡＤＯ２更为明显。２种褐藻寡糖对叶绿素ａ的含量的影响较大，叶绿素ｂ的含量变化相对较小，而光合作用与叶绿素ａ的含量关系相对密切。 云南褐藻寡糖检测方法

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