内蒙古褐藻寡糖检测方法

利用高效安全无污染的生物制剂褐藻寡糖外源喷施黄瓜幼苗,将黄瓜幼苗分为喷施组和未喷施组;再配制不同浓度（0.05%、0.1%、0.2%、0.3%、0.5%、）的褐藻寡糖溶液喷施黄瓜幼苗。对黄瓜幼苗的生长指标,抗氧化酶活性及抗氧化酶相关基因、WRKY基因家族对褐藻寡糖应答情况进行测定。旨在探究不同浓度褐藻寡糖对黄瓜的生长、产量及品质的影响,对褐藻寡糖对作物促进作用的机理进行了初步研究,探索WRKY转录因子和褐藻寡糖在黄瓜生长中的重要功能及作用机制。结果如下:褐藻寡糖促进黄瓜幼苗生长发育,主要表现为生物量（株高、茎粗）随着浓度的升高呈增长趋势,叶片数增多。与未喷施组相比,喷施组生物量均有所改善。对果期产量也有所提高。褐藻寡糖喷施后,果期的品质均有所提高。其中维生素C含量0.1%浓度处理升高明显,是未喷施组的1.34倍。可溶性蛋白含量0.5%浓度处理效果好是未喷施组的1.59倍。可溶性糖含量浓度为0.2%、0.3%效果好,两组均是未喷施组的1.39倍。根据糖酸比分析,几组处理0.2%、0.3%效果好。褐藻寡糖参与植物代谢过程，并作为营养和代谢物信号分子，唤醒特定的酶调节通路，调节相关基因的表达。内蒙古褐藻寡糖检测方法

褐藻胶为海洋褐藻细胞壁中的组成物质，约占 藻细胞干重的17%～45％。褐藻寡糖是由褐藻中的褐藻 胶通过氧化降解、酸水解或者裂合酶降解而得到的 小分子量片段。海洋寡糖可以参与植物的生长发育，通过促进种子的萌发和根系的发育，促进植物吸收和利用营养物质，提高多种酶的活性，促进植物的光合作用等，从而促进植物的生长发育，提高植物的产量及品质。Natsume等于1994年报道褐藻胶酶解之后获得的降解产物对于多种植物都可以起到延长其生命周期的作用；Quoc等进一步研究发现，褐藻胶的酶解产物中分离得到的三糖对大麦根 生长活性有明显的促进作用。刘瑞志用0.05％～ 0.30％的褐藻寡糖处理经过干旱处理的番茄，发现0.2％褐藻寡糖处理的试验组诱导抗旱效果比较好， 可以提高番茄体内 ＣＡＴ、ＳＯＤ、ＰＡＬ 和 ＰＯＤ 活力以及降低 ＭＤＡ 含量。这说明褐藻寡糖可以作为一种诱导因子提高番茄植株的抗旱能力，保护番茄植 株不受干旱伤害，是一种效果良好的抗旱诱抗剂。 Hu等用0.075％ 的褐藻寡糖溶液处理玉米种 子，结果发现在种子萌发的第７天，试验组的根长和 苗高分别比其对照组提高了18％和46％。新疆褐藻寡糖补充量褐藻寡糖分子量低，水溶性强，稳定性高，具有很多生物活性，如抗瘤、抑菌、抗逆性等。

褐藻寡糖对翅碱蓬种子萌发率的影响：随着褐藻寡糖浓度的升高，翅碱蓬种子的发芽率呈先升高后降低的趋势，且在褐藻寡糖作用下翅碱蓬种子发芽率明显高于清水对照组，其中0.02mg/mL浓度下的褐藻寡糖四日发芽率高，达到73.33%，远高于清水对照组的60.00%；随着培养时间增加，翅碱蓬萌发率均增高。第七日时褐藻寡糖作用下翅碱蓬种子发芽率均不低于清水组，其中0.02mg/mL浓度下的褐藻寡糖发芽率高，达到78.33%，远高于清水对照组的66.67%(图1)。褐藻寡糖对翅碱蓬种子萌发幼芽的影响：可溶性糖是盐生植物的重要渗透调节剂(李悦等,2011)，翅碱蓬幼芽内可溶性糖含量增加，在高盐度环境下有助于细胞维持渗透势。同时幼芽中的可溶性糖含量上升可以为翅碱蓬幼苗的生长提供更好的营养支撑，更有利于翅碱蓬幼苗的后续生长。本研究发现褐藻寡糖对翅碱蓬幼芽中的可溶性糖含量有明显的影响(图2)。在褐藻寡糖的作用下，翅碱蓬幼芽中的可溶性糖含量明显增加，并与前期测得的发芽率相对应。褐藻寡糖浓度为0.02mg/mL时，幼芽中可溶性糖含量高，相应的翅碱蓬种子萌发势和萌发率也高。

选择三种来源（褐藻胶、果胶、壳聚糖）的不同分子量大小的九种寡糖片段进行研究。利用植物的促生长和抗逆指标进行筛选，获得了一种既具 有明显的促生长作用，又具有抗逆作用的寡糖片段，为褐藻寡糖 HZ3，经过质谱分析，其组分是以二、三糖为主的含有少量四糖和五糖的寡糖混合物。本研究第二部分是利用植物的植株、愈伤组织和悬浮细胞为材料，建立起寡糖促生长的综合性的验证方法。对植株分别选择了双子叶植物豌豆和单子叶植物玉米，利用寡糖浸种，分别考察在种子萌发与幼苗生长初期其体内蛋白酶、淀粉酶和激S含量的变化，结合种子与植株的生长指标，探讨寡糖的促生长作用机理。褐藻寡糖用过的容器应妥善保管，不可做他用，也不可随意丢弃。

褐藻寡糖已被 证实对草本植物具有明显的提质、抗逆效果，如水稻、小麦等(张运红等, 2016b; 张运红等, 2017; 荆华和王 康健, 2018, 北方水稻, 48(3): 22-24.)。褐藻寡糖的抗逆机理推测为：褐藻寡糖通过蛋白质磷酸化与去磷酸化， 使细胞核内相关抗逆基因激发，提高抗逆酶系活力，进而促进木质素合成、植保素合成和胁迫激S产生， 调节渗透调节物质的产生(游离脯氨酸, 可溶性糖等)。通过渗透调节物质降低活性氧及质膜过氧化，并维 持细胞渗透压稳定，进而提高翅碱蓬的抗盐胁迫能力。较低浓度的褐藻寡糖能促进高粱种子萌发及幼苗生长，提高高粱叶片叶绿素的合成速率。新疆褐藻寡糖企业

寡糖作为信号分子与作物细胞结合并相互作用，引起作物的相关信号转导。内蒙古褐藻寡糖检测方法

低温逆境时，寡糖处理能迅速增强其抗逆酶类，对引起细胞损伤的物质进行去除，提高植物的抗逆能力。干旱逆境，通过寡糖作用，能够使其体内的抗旱指标明显增强，如ABA的含量升高明显，对干旱下植株的生长状态进行调控，降低干旱胁迫对植株的损伤，达到诱导抗旱的目的。抗病性能的提高，通过检测烟C花叶病毒和病对植株的致病作用。对烟C花叶病毒，通过将寡糖作用于病毒与植株的侵染过程、体内复制阶段进行诱导抗病毒研究，发现褐藻寡糖可以明显提高植株的抗病毒能力，同时还能直接作用于病毒，在体外对其进行钝化，降低传染几率，达到抗病毒的效果。体外和体内两条途径对病菌进行抗病能力的检测，发现褐藻寡糖不能抑制病菌的生长，而是通过提高植株的体内抗逆酶类，达到抗病的效果，其对烟C病的比较好防效为4d，比三唑酮的比较好防效减少了2d，缩短了病的治好时间，降低了烟C的损伤。对植物果实的抗病保鲜的研究，发现褐藻寡糖能够改变草莓的呼吸过程，减少水分散失，降低外界对其造成的损伤。因此褐藻寡糖对植物的抗逆机制是通过诱导作用实现的。诱导植物体内产生各种抗性物质来缓解逆境因素对植物造成的损伤，从而达到抗逆的目的。内蒙古褐藻寡糖检测方法

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