云南褐藻寡糖 精耕

    AOS对PVX、TMV有较好的防治效果分别在喷施AOS前24h和喷施AOS后24h接种带有GFP标签的PVX。发病后,在紫外灯下观察绿色荧光并检测病毒积累量。结果显示先喷施AOS后接种PVX,5d后,30.6%系统叶片出现荧光,而喷施ddH2O的本氏烟,85.7%上部叶片出现荧光;喷施AOS的本氏烟中病毒的积累量也明显低于对照。先接种PVX后喷施AOS,与喷施ddH2O的本氏烟系统叶片的荧光强度并无明显区别,本氏烟中病毒的积累量也无明显差异。以上结果说明,AOS对病毒有明显的预防效果。用不同浓度的AOS处理本氏烟后接种PVX,检测抗病效果,结果显示在AOS浓度为100μg/mL时,其抗病效果好。之后,采用100μg/mL的AOS喷施本氏烟后,接种烟C花叶病毒（TMV）,发现与对照组相比,AOS处理的叶片上荧光强度也明显减弱,TMV的积累量也明显降低,表明AOS也可以增强植物对TMV的抗性。以上结果说明,AOS增强植物对病毒的抗性具有普遍性。褐藻寡糖参与植物代谢过程，并作为营养和代谢物信号分子，唤醒特定的酶调节通路，调节相关基因的表达。云南褐藻寡糖 精耕

   寡糖片段的比对选择：对来源于植物细胞壁的寡糖-果胶寡糖、植物致病病菌细胞壁或虾蟹壳的寡糖-壳寡糖和海洋藻类的寡糖-褐藻寡糖进行促进植物生长和诱导植物抗逆活性的筛选，获得具有开发与应用前景的寡糖片段。促生长活性与机理研究：将筛选出的褐藻寡糖应用于植物植株、愈伤组织和悬浮细胞的生长调节，探讨了褐藻寡糖促生长的作用机制，为在植物促生长领域的开发应用提供理论基础。抗逆性能测试与机理表征：将不同浓度的褐藻寡糖片段进行植物抗逆性研究。探讨褐藻寡糖在低温、干旱、病害时对植物的诱导抗逆作用，探讨褐藻寡糖在诱导植物抗逆性产生过程中的作用机理，为褐藻寡糖在植物抗逆领域的开发应用奠定基础。寡糖与植物细胞的结合部位及影响因素：利用激光共聚焦显微技术研究褐藻寡糖与植物细胞的结合过程，并通过多种物质对标记寡糖的竞争性抑制，证明寡糖与植物细胞的结合与作用部位，初步探讨褐藻寡糖与植物细胞的结合与信号传导过程。吉林褐藻寡糖缩写褐藻寡糖不仅可促进植物的生长，而且可提高植物对病害的抵抗力。

    褐藻寡糖在植物生长中的使用，可以增强植物对外界环境的适应能力，对提高作物产量及品质也具有非常重要的意义，同时褐藻寡糖本身在环境中自然降解，无残留无污染，可以减少化肥和农药的使用，提高了环保效益。由于褐藻寡糖是由褐藻胶降解得到的小分子量片段，不同的降解方法或不同的降解酶会导致褐藻寡糖的分子量大小不同，分子量大小的不同可能会在促进植物生长方面有不同的效果。而目前有关于褐藻寡糖促进植物生长的研究比较少，且目前未有关于不同分子量褐藻寡糖促进植物生长的报道。黄瓜是我国重要的蔬菜作物，促进生长的环保肥料的研发和应用对黄瓜的生产实践具有重要的意义。本研究通过探究不同分子量的褐藻寡糖在促进黄瓜幼苗的生长方面的作用，旨在发掘褐藻寡糖更多的生物功能。

   褐藻寡糖不仅可促进植物的生长，而且可提高植物对病害的抵抗力(Otterleietal.,1991)。王松(2003)利用沸水煮提的方法从海带中得到褐藻酸钠后，然后再经过酸解和海螺酶降解得到聚合度为8-20的褐藻寡糖。将此褐藻寡糖应用于抗花叶病毒的研究。发现在处理4d后抗性开始提高，第6d时诱导抗病性达到高，并且以浓度为1000μg/ml的褐藻寡糖的诱导效果好。由于植物诱导抗逆领域关于褐藻寡糖的研究较少，因此开发褐藻寡糖在植物诱导抗逆领域中的应用，对于丰富褐藻寡糖的生物功能，开发具有诱导抗逆活性的褐藻寡糖片段，对增强植物对环境的适应能力，提高作物产量和品质具有十分重要的意义。海洋活性寡糖的开发与利用已成为利用海洋资源进行高值化开发的关键技术之一。对海洋的特殊环境适应，使多种海洋生物具有独特的多糖组成，利用多种手段对海洋多糖进行降解，可以获得种类繁多，结构各异的寡糖片段，由于其结构和组成的差异，寡糖片段内携带大量不同的信息，具有不同的功能活性。尤其是寡糖还可以作为诱抗剂能够诱导植物产生抗逆性能，此外寡糖还能够调节植物的生长发育，因此海洋寡糖由于其独特的组成和生物活性，已成为目前植物生长调节与诱导抗逆研究的热点。褐藻寡糖使作物幼苗的生物量升高，影响作物的生理指标如丙二醛（MDA）含量降低，相关抗氧化酶活性升高。

    AOS增强植株对致病疫霉的抗性用100μg/mLAOS分别喷施拟南芥和本氏烟,24h后,接种致病疫霉。结果显示与喷施ddH2O的植株相比,AOS处理的叶片接种部位的水渍及叶片的黄化程度明显降低,检测致病疫霉菌丝的生长量也明显低于对照,表明AOS也可以增强植株对致病疫霉的抗性。AOS诱导植物早期免疫应答反应对喷施AOS和ddH2O的本氏烟叶片进行相关免疫反应的检测。结果显示,在气孔开度方面,与ddH2O处理的对照组相比,AOS处理的本氏烟叶片的气孔开度明显较低,表明AOS通过调节叶片表面气孔的开合抑制病原菌的入侵。分别于2h、4h、8h、24h和48h时,对喷施AOS和ddH2O的本氏烟叶片进行DAB和NBT组织化学染色,发现喷施ddH2O的叶片染色程度较浅,而喷施AOS的叶片染色程度较深,且在24h时染色深。qRT-PCR检测ROS合成基因RbohA、RbohB以及去除基因SOD、APX和CAT表达水平,显示RbohB基因表达量明显上调,CAT基因表达量明显下降,说明AOS可以通过抑制CAT基因和促进RbohB基因的表达,提高过氧化氢的积累。较低浓度的褐藻寡糖能促进高粱种子萌发及幼苗生长，提高高粱叶片叶绿素的合成速率。云南褐藻寡糖给药器

褐藻胶经γ-射线照射后得到相对分子质量小于104Da的褐藻寡糖片段混合物能够明显促进水稻和花生植株的生长。云南褐藻寡糖 精耕

    褐藻寡糖对烟C细胞内游离脯氨酸含量的影响研究发现,几乎所有逆境胁迫都能够造成植物体内游离脯氨酸积累。在植物体内,脯氨酸是作为1种渗透保护剂参与植物抗逆过程,缓解植物因低温伤害造成的渗透胁迫,因此检测植物体内游离内脯氨酸含量,可以在一定程度上判断植物遭受逆境胁迫危害程度。图5是烟C叶片游离脯氨酸含量变化。由图可知,水处理组经低温胁迫后,游离脯氨酸含量短时间内剧烈增加,6h时为空白对照的4倍,随着低温处理时间延长,游离脯氨酸积累加剧,48h后是空白对照的11.8倍。喷施寡糖后进行低温胁迫,0.05%～0.30%褐藻寡糖能够明显降低烟草体内游离脯氨酸积累,0.10%褐藻寡糖在24h以内效果比较好,但48h时游离脯氨酸含量明显升高。1.00%褐藻寡糖短时间内使烟C叶片内游离脯氨酸含量剧烈增加,随着时间延长积累不断加剧,表明较高浓度褐藻寡糖溶液会对烟C细胞产生毒副作用,低温下更加剧了细胞损伤破坏。云南褐藻寡糖 精耕

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