日本大型养殖场非洲猪瘟疫苗

八方同创深耕并致力于猪场非洲猪瘟防控的经历提醒猪场，非洲猪瘟入侵后精细防控的采样方案如下：1、猪舍内部环境，生产人员着防疫服、防疫帽、手套换鞋进入猪舍后，先采样，风机口、开关、料槽、栏杆、猪栏隔离墙内侧近地面、水嘴、窗户、工具手柄等；2、人员：阳性栋和高风险栋舍的人员，每天坚持采样。工作完成后，在洗澡前，饲养人员采集个人样（手、面部、膝部、头发、鞋底、眼镜、手机等），主要监控检测是否存在有病毒被携带传播的风险；3、异常猪只：不吃料或者半吃料、精神呆滞、呕吐、拉稀、便血。采样为：内环境样（脏棉签）+深咽拭子（白棉签）+尾根血（红棉签）；4、高风险猪群：母猪（定位栏、产房）采用“红白灰”三根棉签法：内环境样（脏棉签）+深咽拭子（白棉签）+尾根血（红棉签）；“安全第一、能采尽采”原则，咽拭子采集困难的母猪可以放弃，确保安全操作。保育或育肥猪：棉绳（唾液）+环境样；八方同创提醒：非洲猪瘟病毒不耐高温，65℃加热40分钟可灭活病毒。日本大型养殖场非洲猪瘟疫苗

非洲猪瘟病毒基因组长度在170至193kb之间变化，包含150-167个开放阅读框。已鉴定出超过68种病毒蛋白，但其中一些的功能仍未知。基因组由一个约125kb的保守中心区域和两个包含五个多基因家族（MultigeneFamilies,MGFs）的可变末端组成(Yáñezetal.1995)。在MGF基因内发生长达20kb的复制区域缺失和插入，表明这些区域可能有助于产生抗原变异，从而帮助非洲猪瘟病毒逃避宿主免疫系统。历史上，非洲猪瘟病毒基因分型基于B646L基因（编码p72蛋白）的部分测序(Achenbachetal.2017;Quemboetal.2018)。这种方法通过分型基因组的其他部分得到辅助，例如编码p54、p40或CD2v的部分，或对基因间区进行测序(Gallardo,Fernandez-Pinero,etal.2014)。虽然单独对p72进行基因分型无法完全阐明每个地区分离株的变异性，但它仍是对不同田间分离株进行流行病学追踪易得且经济的方法(Dinhobletal.2024)。在条件允许的情况下，使用下一代测序技术生成全基因组比较适合用于深入了解基因组流行病学和病毒进化(J.Forth,L.Forth,etal.2019;J.Forth,Calvelage,etal.2023)。韩国家庭农场非洲猪瘟预防非洲猪瘟病毒属于非洲猪瘟病毒科，该病毒只危害家猪和野猪，对人不存在危害。

八方同创深耕并致力于猪场非洲猪瘟防控的经历提醒猪场，近期的研究再次表明，ASFV在4℃、22℃和40℃时稳定，在EMEM中培养24h后，损失不到10个50%血细胞吸附剂量（HAD50）/mL。组织中的ASFV可以在深度冷冻（-70℃）条件下存活多年而没有明显的滴度损失，但在20℃时会逐渐失去活性，但仍可存活至少105周。在4℃时，病毒在培养基中非常稳定，至少在61周内保持活性。在较高温度下，ASFV失活相对较快，在37℃下，ASFV在细胞培养基中可保持活性11~22d，但在50℃时，只有少部分病毒保持活性，而在60℃时，15min后就检测不到活毒粒子。

非洲猪瘟抗体作用的比较好证据是证明了被动转移免疫血清后对非洲猪瘟病毒的部分保护。迄今为止的研究尚未鉴定出保护性抗原，针对免疫显性衣壳和其他结构蛋白的抗体可能具有中和活性，但不足以提供保护。另一方面，红细胞吸附介导的病毒CD2v（EP402R）和/或C型凝集素（EP153R）被证明与保护有关。这可能部分由抗体介导，因为这两种蛋白相对可变并定义了影响交叉保护的血清型。因此，一项较早的研究表明，红细胞吸附抑制抗体可与保护相关，这些蛋白免疫原性较差。

为了理解抗体对保护性免疫的贡献，了解它们的功能性抗病毒活性至关重要。在此背景下，注意到抗体中和非洲猪瘟病毒的效力与大多数其他病毒相比相当有限，并且由于文献中信息矛盾，且抗体功能与保护相关的证据不足，这仍是一个有争议的话题。作为替代的抗体功能，补体依赖性抗体介导的细胞毒性或抗体依赖性细胞介导的细胞毒性已被探索，但尚未被确认或确定为保护相关物。 非洲猪瘟控制后，复产前，八方同创建议对病毒的传入、扩散进行复盘，然后查缺补漏、猪场改造、人员培训。

早发现、早处理是防控非洲猪瘟的重要手段，一线饲养员对临床症状的系统性观察十分重要。

八方同创经验表明，异常猪的早期识别是防控非洲猪瘟的主要措施。日常巡查需形成标准化清单，重点关注是否吃料、减料、死亡、扎堆、体温升高（＞40.5℃）、精神沉郁、食欲废绝、皮肤发红或发绀、呕吐、腹泻（尤其便血、血尿）、***、皮肤溃烂坏死及呼吸困难等非特异性症状。并记录异常猪所在栏位、同群猪状态及环境变化。任何疑似症状都不应视为个别现象，而应立即启动预警，将异常猪视为潜在传染源进行采样、隔离（不接触），并同步报告兽医及管理层。这种系统性观察是“预警”能否成功的先决条件。 猪场实验室的建立彻底改变了非洲猪瘟疫情的防控逻辑，使防控工作从被动处置转向主动监测。乌克兰非洲猪瘟饲料安全标准

非洲猪瘟病毒，急性型死亡快，死亡率高。弱毒株引起的慢性型，死亡慢，死亡率低。日本大型养殖场非洲猪瘟疫苗

    几种非洲猪瘟病毒蛋白具有高度抗原性，包括病毒衣壳的主要结构成分（p72），以及膜蛋白p54、p30和p12。总共超过50种病毒蛋白可在耐过或康复猪中诱导可检测的抗体反应。虽然作为血清学诊断中的抗原很有用，但它们在诱导保护性免疫中的作用尚不清楚，因为非洲猪瘟病毒不诱导完全的中和抗体免疫反应。非洲猪瘟病毒粒子在无血清培养基中pH4-10时保持稳定，但在pH低于4或高于。血液中的粒子在5°C(41°F)下可保持复制性6年，在含25%血清的培养基中pH下可保持数天复制能力。病毒粒子可通过60°C(140°F)加热30分钟或56°C(133°F)加热70分钟灭活。许多有机溶剂通过破坏脂质包膜使病毒失活，但非洲猪瘟病毒对蛋白酶和核酸酶具有抗性。非洲猪瘟病毒田间分离株的回收必须在原代猪单核细胞/巨噬细胞中进行，因为田间毒株在常规细胞培养系统中复制不佳。出于研究目的，几种非洲猪瘟病毒分离株已适应在非洲绿猴肾稳定细胞系（包括VERO、MS和CV-1细胞）或野猪肺细胞中生长。近期，几种单核细胞来源的猪细胞系已被开发用于研究目的。尽管该领域取得了进展，细胞系仍然是疫苗病毒生产的限制因素。 日本大型养殖场非洲猪瘟疫苗

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