蛋白纯化试剂抗体纯化rProtein A/G Beads 4FF纯化流程,样品准备上柱之前要确保样品溶液有合适的离子强度和pH值,可以用平衡/洗杂液对血清样品、腹水或细胞培养液稀释,或者样品用平衡/洗杂液透析。对于100mm培养皿中的贴壁细胞,吸除细胞培养液,使用预冷PBS洗涤一次后加入2ml细胞裂解液裂解细胞。对于悬浮细胞,离心收集细胞后,PBS洗涤一次后参考贴壁细胞的裂解方法进行裂解。植物或动物组织样品可以使用液氮研磨方法裂解。具体的裂解方法请参考不同裂解液的使用说明,裂解液**终总蛋白浓度选择在0.5-1μg/μl范围内较为合适。通常针对目标蛋白的表达量不同,需要对总蛋白浓度进行预实验调整。2.3.去除非特异性结合(可省略)1)取200微升至1毫升蛋白样品,加入约1微克和免疫沉淀时使用的IgG种属相同的3/5常州天地人和生物科技有限公司NormalIgG和20微升充分重悬的rProteinA/GBeads4FF,4℃缓慢摇动30分钟。2)2500rpm(约1000g)离心1分钟,取上清用于后续的免疫沉淀。注:哺乳动物细胞内有多种成分可以和IgG发生结合,可能会在后续免疫印迹中出现非特异性条带。使用normalIgG和rProteinA/GBeads4FF对裂解液预处理可以降低非特异性吸附。标签亲和纯化试剂哪家好?江西定制试剂代理销售价格
蛋白纯化试剂-ECL鲁米诺化学发光试剂盒本产品是基于鲁米诺底物的化学发光试剂盒,能够被辣根过氧化物酶(HRP)催化发光。本试剂盒优化了底物组成,使用了新型高效增强剂,发光强度比传统ECL显色液提高了30-100倍,并有效地降低了背景。试剂盒使用新的氧化剂代替不稳定的双氧水,提高了试剂盒的稳定性,室温可稳定放置1年。工作液被HRP催化后,发出特定波长荧光(400-450nm),可对X光胶片曝光,也可直接使用荧光CCD扫描,主要应用于Western检测以及化学发光免疫检测系统广东蛋白纯化试剂报价更高的抗体结合能力。
蛋白纯化试剂,预装柱介绍,预装柱具有标准接口,可以适配各类中压色谱系统,如ÄKTA等。客户购买后可直接连接注射器或层析系统使用,节省时间,提高工作效率。我公司使用专业装填设备,保证了柱效和重复性,进而保证了实验结果的可靠性。1.产品介绍AbCapA4FF是一种中低压预装柱,有1mL和5mL两种规格的预装柱,分别填装1mL和5mLrProteinABeads4FF,共有5种不同包装规格的产品。预装柱具有标准接口,可以适配商品化的各类中低压色谱系统,如ÄKTA等,方便客户操作。
体外重组蛋白表达技术已经渗透到生物学的各个领域。目前,体外重组蛋白表达系统主要有四类:原核表达系统、哺乳动物细胞表达、酵母表达系统及昆虫细胞表达。表达的一般实验包括载体构建-表达鉴定-蛋白纯化三大步骤。在构建载体阶段,除了一些必要的表达元件,还需要考虑的密码子优化和标签的选择。选择合适的标签不但有利于蛋白的纯化,促进蛋白的可溶性,同时也不能影响蛋白的结构功能和下游应用。上海楚知生物天地人和试剂蛋白纯化标签,帮助科研人员更好的设计实验。带正电荷的强阳离子交换介质。
蛋白纯化试剂Ni Smart Beads纯化流程2/3常州天地人和生物科技有限公司平衡液:20mM磷酸盐,0.5MNaCl,pH7.4洗杂液:20mM磷酸盐,0.5MNaCl,0-5mM咪唑,pH7.4洗脱液:20mM磷酸盐,0.5MNaCl,250mM咪唑,pH7.4注:为了减少宿主细胞蛋白的洗脱,建议在洗杂液中加入低浓度的咪唑。为了消除一些离子作用蛋白的吸附,可以在溶液中加入0.5M-1.0MNaCl。可以采用低pH值洗脱或与咪唑结合,如pH2.5-5.0。2.2样品准备1)将细胞培养液转移至离心杯,7,000rpm(7,500×g),离心15min取上清。如果使用预装柱,样品在使用前比较好用0.22μm或者0.45μm滤膜过滤除菌。2)样品中含有可耐受范围内试剂,不需要透析或浓缩,可以直接上样。2.3样品纯化流程1)将NiSmartBeads装入合适的层析柱,层析用5倍柱体积的平衡液进行平衡,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。2)将样品加到平衡好的NiSmartBeads中,保证目的蛋白与Ni2+充分接触,提高目的蛋白的回收率,收集流出液。3)用10-15倍柱体积的洗杂液进行清洗,去除非特异性吸附的杂蛋白,收集洗杂液。4)使用5-10倍柱体积的洗脱液,收集洗脱液,即目的蛋白组分。带负电荷的强阴离子交换介质。湖北磁珠系列试剂报价
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麦芽糖结合蛋白标签(MBP-tag)蛋白亲和纯化介质:麦芽糖结合蛋白(MBP)标签,分子量约为42000Da,使用MBP标签往往可以促进连接蛋白的正确折叠,增加蛋白的表达水平,并使目标蛋白具有更高的可溶性,天地人和Dextrin Beads 6FF是一种纯化带有麦芽糖结合蛋白(MBP)标签蛋白的亲和介质层析,可以一步纯化MBP融合蛋白,结合的融合蛋白可以用10mM麦芽糖进行温和洗脱,保护了标签蛋白的活性,如果要去除MBP融合部分可用位点特异性蛋白酶切除,以上试剂信息由天地人和销售商上海楚知提供江西定制试剂代理销售价格
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