试剂篇：GST亲和纯化原理GST亲和层析是利用GST融合蛋白与固定的谷胱甘肽(GSH)通过硫键共价亲和，通过GSH交换洗脱的原理来进行纯化。该纯化柱中，凝胶手臂上通过硫键结合一个谷胱甘肽。然后利用谷胱甘肽与谷胱甘肽巯基转移酶（即GST-tag（26KDa））之间酶和底物的特异性作用力，使得带GST标签的融合蛋白能够与凝胶上的手臂谷胱甘肽结合，从而将带标签的蛋白与其他蛋白分离开。谷胱甘肽通常有氧化型GSSG和还原型GSH，当我们使用GSH洗脱时，GSH会与凝胶上的谷胱甘肽竞争结合融合蛋白，从而将目标蛋白洗脱。GST标签蛋白可直接从细菌裂解液中利用含有还原型谷胱甘肽琼脂糖凝胶(Glutathionesepharose)亲和树脂进行纯化。GST标签蛋白可在温和、非变性条件下洗脱，因此保留了蛋白的抗原性和生物活性。GST在变性条件下会失去对谷胱甘肽树脂的结合能力，因此不能在纯化缓冲液中加入强变性剂如：盐酸胍或尿素等。如果蛋白表达在包涵体中，可复性后再纯化。此外要去除GST标签，可用位点特异性蛋白酶切除。分子生物酶的种类。作用。江苏定制试剂生产商
蛋白纯化试剂产品介绍：HA标签是人流感血凝素的第98-106氨基酸序列YPYDVPDYA，对外源靶蛋白的空间结构影响小,容易构建成标签蛋白融合到蛋白N端或者C端，因此常被用于重组蛋白的融合表达。Anti-HAAntibody能够特异性识别HA标签，从而用于融合蛋白的表达和定位检测。抗体来源：小鼠交叉反应：HA标签融合蛋白克隆类型：单克隆抗体亚型：IgG2A来源：293细胞表达的重组抗体纯化方式：rProteinA亲和纯化产品纯度：≥95%，SDS-PAGE检测储存缓冲液：1×PBS(pH7.4)，0.02%叠氮钠，50%甘油储存条件：干冰运输，-20℃可保存一年，避免反复冻融-上海楚知生物江苏磁珠系列试剂销售价格抗体亲和纯化产品分为通用性抗体，单克隆抗体，多克隆抗体。
上海楚知生物试剂分享篇：蛋白纯化要利用不同蛋白间内在的相似性与差异，利用各种蛋白间的相似性来除去非蛋白物质的污染，而利用各蛋白质的差异将目的蛋白从其他蛋白中纯化出来。每种蛋白间的大小、形状、电荷、疏水性、溶解度和生物学活性都会有差异，利用这些差异可将蛋白从混合物如大肠杆菌裂解物中提取出来得到重组蛋白。蛋白的纯化大致分为粗分离阶段和精细纯化阶段二个阶段。一般蛋白纯化采用的方法为树脂法。粗分离阶段主要将目的蛋白和其他细胞成分如DNA、RNA等分开，由于此时样本体积大、成分杂，要求所用的树脂高容量、高流速、颗粒大、粒径分布宽．并可以迅速将蛋白与污染物分开，必要时可加入相应的保护剂（例如蛋白酶抑制剂），防止目的蛋白被降解。精细纯化阶段则需要更高的分辨率，此阶段是要把目的蛋白与那些分子量大小及理化性质接近的蛋白区分开来，要用更小的树脂颗粒以提高分辨率，常用离子交换柱和疏水柱，应用时要综合考虑树脂的选择性和柱效两个因素。选择性指树脂与目的蛋白结合的特异性，柱效则是指各蛋白成分逐个从树脂上集中洗脱的能力，洗脱峰越窄，柱效越好。*有好的选择性，洗脱峰太宽，蛋白照样不能有效分离。
蛋白纯化试剂 IMAC Beads 6FF是以高度交联的6%琼脂糖凝胶为基质，配体结构见图1所示，填料可以用于螯合各种金属离子，如Cu2+, Zn2+, Ni2+，Co2+, 对His标签的结合能力Cu2+＞Zn2+＞Ni2+ ＞Co2+,可根据金属离子对标签蛋白的结合力来选择需要螯合的金属离子。具体性能见表1。IMAC Beads 6FF除了可以耐受苛刻的试剂条件（见表2）外，因其耐压的基质，可以耐受比较高0.3 MPa的压力，更稳定，因此该产品更适合用于工业大规模蛋白的纯化，可以在相对较高的流速下，实现对目的蛋白的纯化。上样体积30-50ml 怎么选择脱盐柱？
蛋白纯化试剂抗体纯化rProteinA/GBeads4FF纯化流程：2.4.1抗体吸附1）取适量的rProteinA/GBeads4FF加入到2ml离心管中，800rpm离心1min，吸弃上清。2)加入0.5ml平衡液，悬浮填料（使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用），800rpm离心1min，吸弃上清。再重复两次。3)向步骤2)平衡的填料中加入抗体溶液，悬浮填料，室温下置于翻转混合仪或者手工轻轻翻转离心管，约30min后，800rpm离心1min，收集上清液，留待检测。4)向3)的填料中加入0.5ml的洗杂液，悬浮填料，进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，800rpm离心1min，吸弃上清。再重复两次。2.4.2抗体交联(备选)如果需要将抗体和目标抗原复合物共同洗脱，请忽略本步骤，直接进行2.4.3。50ul-1ml填料量均可以按照以下步骤操作，无需额外增加交联液体积。1)向清洗过的填料中加入1ml交联液，800rpm离心1min，吸弃上清。2)再向其中加入1ml含20mMDMP（dimetylpimelimidatedihydrochloride）的交联液，此试剂需要现用现配，悬浮填料，在室温下置于翻转混合仪或者手工轻轻翻转离心管，促使缓冲液和填料充分接触，约30min后，800rpm离心1min，吸弃上清。中压预装柱HiPur系列HiSelect Ni 6FF。河南抗体纯化试剂规格
纯化效率高的相关试剂。江苏定制试剂生产商
蛋白纯化试剂.产品介绍，DextrinBeads是一种纯化带有麦芽糖结合蛋白（MBP）标签蛋白的亲和层析介质，具体性能见表1。MBP可促进连接蛋白的正确折叠，增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真**白。DextrinBeads可以一步纯化MBP融合蛋白，结合的融合蛋白可以用10mM麦芽糖进行温和洗脱，保护了标签蛋白的活性。如果要去除MBP融合部分可用位点特异性蛋白酶切除。问题及解决方案问题原因分析：柱子反压过高填料被堵塞按照第3部分进行树脂清洗。裂解液中含有微小的固体颗粒，建议上柱前使用滤膜(0.22或0.45μm)过滤，或者离心去除。目的蛋白没有吸附目的蛋白未表达确保目的蛋白表达样品或缓冲液中存在一些干扰因素如非离子去污剂样品透析或用结合液稀释细胞产生大量的淀粉酶影响结合力培养基中添加葡萄糖，抑制淀粉酶的表达融合蛋白使麦芽糖结合位点阻塞或扭曲，影响了目的蛋白的结合力更换载体柱子结合时间太短将样品与DextrinBeads振荡孵育4度2小时或更长时间洗脱样品较杂目的蛋白降解加一些蛋白酶抑制剂，如PMSF、EDTA等平衡/洗杂不充分增加平衡液体积，确保树脂充分平衡/洗杂，如树脂太脏按照第3部分进行树脂清洗江苏定制试剂生产商
上海楚知生物科技有限公司办公设施齐全，办公环境优越，为员工打造良好的办公环境。致力于创造***的产品与服务，以诚信、敬业、进取为宗旨，以建上海楚知生物产品为目标，努力打造成为同行业中具有影响力的企业。公司不仅*提供专业的从事生物科技领域内技术开发、技术咨询，化学试剂（除危险化学品、监控化学品、**爆竹、民用物品、易制毒化学品），实验室设备（除医疗器械），办公家具，计算机、软件及辅助设备（除计算机信息系统安全**产品），化工原料及产品（除危险化学品、监控化学品、**爆竹、民用爆竹物品、易制毒化学品）销售。 【依法须经批准的项目，经相关部门批准后方可开展经营活动】，同时还建立了完善的售后服务体系，为客户提供良好的产品和服务。上海楚知生物科技有限公司主营业务涵盖知楚摇床，博旅发酵罐，小动物发光成像，ATS高压均质机，坚持“质量保证、良好服务、顾客满意”的质量方针，赢得广大客户的支持和信赖。
