外泌体由于在细胞通讯的过程中可以携带基因,引起了基因zhiliao研究者的广fan关注。外泌体作为基因载体与传统的病毒或非病毒载体相比,其优势在于:(1)从患者体内获取的外泌体,经载入基因后,再注入患者体内几乎不会引起免疫反应,更加安全;(2)外泌体体积很小,可以逃过网状内皮系统的捕捉,有效保护承载的基因;(3)承载基因的外泌体可以通过与目标细胞膜融合的方式,将基因类药物释放到细胞质中。而其他非病毒载体一般被受体细胞內吞后才能将基因类药物输送至细胞中的内涵体。内涵体内pH值约为5~7.2,易将基因类药物酸化、破坏,并且也有部分药物无法从内含体中逃脱出,因而,相比之下,可以进行膜融合的外泌体运载的基因类药物的转染效率更高。外泌体可作为天然的药物运载系统,将zhiliao分子、药物等运送至靶细胞,进而发挥zhiliao作用。吉林动物血液样本外泌体载药价格比较
间充质干细胞(MSC)的外泌体成为有潜力的天然药物递送载体的优势:与其他来源外泌体的产生机制一致,即首先由细胞质膜内陷形成内体,然后内体向内出芽形成多泡体,而多泡体具有两种命运,一种是移动到细胞表面与质膜融合,以胞吐的方式将外泌体释放到细胞外;另一种是与溶酶体结合,将内容物降解。MSC-Exo具有外泌体的共同特征,即富含四跨膜蛋白CD9、CD63、CD81,整合素,主要组织相容性复合物Ⅰ、Ⅱ,热休克蛋白,多泡体合成相关蛋白(ALIX、TSG101),核酸,胆固醇、磷酸甘油酯、鞘磷脂等。此外,MSC-Exo还具有特异性标志物,例如,CD29、CD90、CD73和CD44等。MSC-Exo具有与MSCs相似的生物学功能,而且避免了细胞移植的风险,易于获取、储存和管理;可控性高、免疫原性低、安全性好。湖南组织外泌体载药实验咨询问价口服递送装载紫杉醇(PAC)的外泌体作用于人肺ai荷瘤小鼠,其中流的生长明显受到抑制。
与人工合成囊泡相比,外泌体虽然具有一定的靶向性,但由于其高度的复杂性和成分的多样性,作为载药体的应用仍缺乏普遍靶向性,可能产生脱靶效应,诱发不良反应;而且可溶性低,循环半衰期短,因此针对外泌体表面标志物的改造以获得靶向性一直是研究热点;此外,也有大量研究针对内容物进行改造,近年来主要以外源性的抗中流药物、核酸分子、转录因子和酶类,内源性母乳多糖、低聚糖、多肽等为“货物”,将它们载入外泌体后运送到标靶位置。对母乳外泌体进行载药改造,既保留了外泌体本身的特性,同时充分利用了功能性内外源物质,又可进一步优化外泌体的靶向性与稳定性,有望为zhiliao新生儿相关疾病提供新的思路和方法。
mRNA也可以作为“货物”被外泌体运输。利用多泡体(含外泌体)负载mRNA/蛋白进行中流zhiliao的研究。研究者们利用脂质体2000或病毒载体对HEK-293细胞进行转染,使其分泌的多泡体含有mRNA/蛋白(CD-UPRTEGFP,其中CD:胞嘧啶脱氨酶;UPRT:尿嘧啶磷酸核糖转移酶;EGFP:增强型绿色荧光蛋白)。将此多泡体注射至小鼠的神经鞘瘤处,并辅助注射5氟尿嘧啶(5-FC),神经鞘瘤的增长被明显抑制。这主要是由于CD和UPRT可以将5-FC转化为5氟尿嘧啶脱氧核苷酸(5-FdUMP),而后者又是胸甘酸合成酶的抑制剂,可以抑制脱氧胸甘酸的合成,从而起到抑制DNA的合成以及促进中流细胞凋亡的效果。Saydam等的研究表明多泡体/外泌体不jin可以有效输送mRNA/蛋白质,并且句有与其他抗ai药物联合zhiliao中流的潜力。过氧化氢酶载入外泌体后在炎症大脑中的生物分布情况可以利用C57BL/6雌性小鼠来研究验证。
外泌体的提取方法在外泌体载药系统中应用——梯度密度离心法。外泌体的密度在1.1~1.19kg·L-1之间,因此,可以采用密度梯度离心法来分离外泌体。该方法是将超速离心结合蔗糖密度梯度或蔗糖垫结合,原理是先除去非囊泡物质,再通过梯度密度浓缩提取外泌体,该方法可以得到相对较为纯净的外泌体。传统的梯度密度方法通常需要离心16h,但是2012年,研究者使用了62~90h才分离出某些确切囊泡,因此,该方法可能不足以沉淀所有的外泌体。如果离心时间不充足,污染物质可能和外泌体保持在相同的密度层,特别是这个密度范围又比较宽。母乳外泌体改造后的载药体,不仅拥有外泌体本身的独特优点,还兼具改造后功能。河北动物细胞样本外泌体载药咨询问价
外泌体作为药物载体可稳定存在于血液中,纳米级尺寸增强药物在中流部位的渗透滞留效应(EPR)。吉林动物血液样本外泌体载药价格比较
外泌体的脂质双分子膜可以保护其在血液循环中不被降解,但是这种膜结构以及其内含各种丰富的物质,使得外泌体载药变得困难。外泌体只有保证膜结构的完整性,才能不引起免疫反应,不被MPS吞噬。目前,将药物载入外泌体的方法主要有两种:(1)前转载,在分离外泌体之前,将药物与母代细胞共培养和对母代细胞进行转染,可以让母代细胞分泌含有药物的外泌体; 主要是用转染剂将“货物”转染进入亲代细胞(或者将“货物与亲代细胞孵育”),然后收集培养基,获得载有“货物”的外泌体的过程。该方法的主要问题是合适有效的转染试剂很少,且转染试剂无法完全去除,导致转染效率低,无法排除转染试剂对实验的影响。(2)后转载,分离出外泌体之后,将药物载入外泌体。吉林动物血液样本外泌体载药价格比较