RPMI 1640 Medium (含双抗)采购

我们都知道干细胞是十分脆弱的，培养干细胞大多使用胎牛血清来完成实验。胎牛血清是一种性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛；新牛血清取自出生24小时之内的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。显然，胎牛血清是品质更高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分更少。优良的胎牛血清不仅为细胞提供细胞生产提供不可替代的营养成分，也会让细胞培养实验更轻松。提供细胞生长所需的天然元素或天然的生长因子。提供天然的结合蛋白，能识别氨基酸、脂质、金属离子和元素等，能结合并调节它们的活性。已知清蛋白(albumin）即具有上述功能，并对细胞代谢、生物合成、增殖和存活具有潜在的影响。又如胎牛血清中富含胎球蛋白（Fetuin），具有多个钙离子结合位点，因而能调节和维持血清中的钙离子浓度。由于胎牛血清结冰时体积会增加约10%，因此，血清在冻入低温冰箱前，必须预留一定体积空间。RPMI 1640 Medium (含双抗)采购

胎牛血清的保存方法：热灭活是指56℃，30分钟加热已完全解冻的血清。加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分灭活。除非必须，一般不建议作此热处理，因为热处理会造成血清沉淀物明显增多，而且还会影响血清的质量。补体参与反应有:细胞毒作用，平滑肌细胞收缩，肥大细胞和血小板释放组胺，增强吞噬作用，促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。血清中的沉淀物絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成，这些絮状物不会影响血清本身的质量。可用离心3000rpm，5分钟去除，也可不用处理。显微镜下"小黑点":经过热处理过的血清，沉淀物的形成会明显增多。有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点"，常误认为血清受污染。一般情况下，此小黑点不会影响细胞生长，但如果怀疑血清质量，则应立即停止使用，更换另一批号的血清。RPMI 1640 Medium (含双抗)采购胎牛血清天然含有粘附蛋白等细胞外基质成分，促进细胞的附着、铺展。

胎牛血清工艺流程：从血源采集、加工、过滤、辐照处理、包装、质检，再到物流，遵循行业更高标准，大范围保驾护航，确保产品高等、可信赖。可追溯性，产品制备所用材料均来自澳大利亚。采集血清的牛的出生、饲养、运输或屠宰场所均不经过疯牛病(BSE)疫区，原料均通过严格标准采自中国许可的澳大利亚非蓝舌病毒(BTV)地区。每批次均附有含原产地信息的分析证书(CoA)。原材料加工，血液取自澳大利亚地区受国家监管的工厂。全血使用严格的无菌采集技术收集，然后在可控条件下凝结。离心后收集血清并立即冻存。过滤和包装，冻存的血清原料在可控条件下解冻，然后通过一系列不同孔径的膜过滤，并在封闭系统中进行分装。血清包装入无菌带刻度的塑料瓶后，密封冻存于-10~-40°C环境。

为什么使用胎儿血清而不是新生儿血清或成人血清？胎儿血清含有较多的生长因子，丙种球蛋白（即抗体）含量较低，非胎儿血清也有。这些很重要，因为生长因子促进细胞存活和增殖，而抗体可以与培养的细胞结合。此外，与成人或新生儿相比，胎儿血清中的补体蛋白（补体）含量较低。这些补体具有溶解培养细胞和干扰免疫测定的不良作用。血清和血浆均来自全血，通过离心去除包括红细胞在内的成分。血浆和血清之间的区别在于，凝血蛋白存在于血浆中，但已从血清中去除。血浆一般是通过在离心前向血液中加入抗凝剂来制备的，但不会去除凝血蛋白。通过在离心前使血液凝固或通过普遍/渐进离心来制备血清。因此，与凝血相关的纤维蛋白原和蛋白质不存在于血清中。虽然胎牛血清与新生牛血清的成分并不存在很大的差别，可是诸如促细胞生长因子和促贴附因子等组份并不相同。

胎牛血清使用中的常见问题：如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损?将血清从冷冻箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室温下使之全融。但必须注意的是，融解过程中必须规则地摇晃均匀。长时间储存在2-8℃时，血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此，推荐在-20℃以下储存血清，并避免反复冻融。我们建议血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时，请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶，建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。胎牛血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物。海宁标准胎牛血清Fetal Bovine Serum（Standard）

胎牛血清全程冷链运输，无冻融现象。RPMI 1640 Medium (含双抗)采购

使用胎牛血清的注意事项：注意解冻的方法，再高质量的胎牛血清也要在使用的时候坚持谨慎的原则，因此在解冻血清的时候，要细心地考虑到其解冻时体积一般会增大的特点，事先为血清预留出能够容纳膨胀体积的空间。如此一来，便不会发生污染或者容器冻裂的情况。另外更好采用分步解冻的方式解冻血清，即先利用冰箱或冷库将其溶解满几天，之后在室温下全溶后再进行分装。胎牛血清的灭活，一般是用水浴加热的方式来加热已经完全解冻的血清，那么需要注意的是，加热的过程中一定要规则地将血清摇晃均匀。而之所以这么做，是为了能够让血清中的补体成分去活化。不过胎牛血清的灭活并不是强制的要求，客户可以自行选择是否进行灭火处理。RPMI 1640 Medium (含双抗)采购

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