外泌体的提取方法在外泌体载药系统中应用——超高速离心法。其中超高速离心法是常用的,该方法是被誉为分离外泌体的“金标准”。因操作简单,不需要复杂的技术支持,并且成本相对较低而被广fan使用。但是该方法耗时、产率低,得到的外泌体的数量和质量很大程度上受转子的类型、转子沉降角度等因素影响,其中主要的问题就是差速离心法获得的沉淀物是外泌体,但也会有其他的囊泡、蛋白质或蛋白和RNA的聚集体。所以得到的外泌体的纯度和产量都不高。外泌体内源性载yao方式即先将药物载入供体细胞中，当药物分选进入外泌体并释放外泌体后分离纯化而获。河北整体实验外泌体载药咨询问价
中流细胞的异常增殖和高迁移水平是恶性中流细胞发生转移的重要特征。通过实验可以用含药外泌体DATS-Exo、空白外泌体Exo和DATS处理B16BL6细胞24h后,然后采用MTT的方法检测细胞的增殖活性。实验结果显示,DATS-Exo与DATS都能够有效抑制B16BL6细胞的增殖,且与DATS组相比,DATS-Exo的抑制作用更强。通过经典的划痕法考察含药外泌体DATS-Exo的抑制中流细胞水平迁移能力，DATS-Exo组与DATS组相比具有更强的抑制效果。实验结果表明,将大蒜素DATS制备成外泌体载药系统是可以明显提高其体外抗中流细胞转移的能力。江西外泌体载药技术原理间充质干细胞外泌体既有作为载药载体的特性，还有MSC的多种生物学功能，本身也可以作为“药物”使用。
外泌体的提取方法在外泌体载药系统中应用——免疫亲和层析法。利用生物体内存在的抗原、抗体之间高度特异性的亲和力进行分离的方法,主要用于生物大分子的分离、纯化。将其应用于外泌体的分离主要是借助外泌体表面的特异性抗体,如TSG101或四跨膜蛋白。此方法的原理是利用抗原抗体的特异性结合,只有囊泡表面有特异性的抗体才可以被识别,这使得提取的外泌体纯度高,但是产量低。分别用超速离心、密度梯度离心和免疫层析法,从血浆和细胞上清中提取外泌体蛋白,结果表明,免疫亲和层析法得到的外泌体表面存在多种标记蛋白(Alix、CD9、CD63),同时,ELISA和PCR结果也证明了该方法的可行性。
外泌体的提取方法在外泌体载药系统中应用——尺寸排阻色谱法。尺寸排阻色谱法时外泌体提取的一种方法，利用分子筛理论,开始是根据蛋白质分子大小分离蛋白质的色谱技术。该方法的主要优点是不需要很大的离心力,从而保证了外泌体的完整性。对比超高速离心和尺寸排阻色谱法得到的外泌体蛋白,结果显示, 尺寸排阻色谱法得到的外泌体的蛋白丰度高于超高速离心法。这些基于过滤或尺寸排阻色谱的新方法为外泌体大规模的生产和临床应用提供了可能。超滤也是根据外泌体的尺寸将其分离出来的一种方法,超滤一般被认为是外泌体分离过程中的一个准备过程,通过超滤除去大分子和小分子的蛋白质。不过连续的超滤可以分离出外泌体,和超高速离心相比,超滤不需要特殊的设备就可以较短时间内分离出外泌体。但是,超滤膜对外泌体的黏附作用会降低外泌体的产量,并且超滤过程中施加的外力可能会使外泌体变形或者破裂。装载紫杉醇的外泌体靶向给药系统通过微流控技术纯化后可用于抗中流zhiliao。
外泌体载药系统一直是众多研究者关注的焦点。SUN等人在早期的动物实验中对脂多糖（LPS）诱导的脓毒性休克小鼠模型进行腹腔注射含姜黄素的外泌体。结果表明，外泌体可用作kang炎药物的体内载体。自此，揭开了外泌体介导药物传递系统研究的新篇章。他们改用鼻腔内注射，结果发现，载有姜黄素或信号传导与转录激huo因子3抑制剂的外泌体可用于zhiliaoLPS诱导的脑炎症、实验性自身免疫性脑炎和GL26脑中流模型。随后又有研究者发现，向野生型小鼠静脉注射携带小干扰核糖核酸序列的外泌体，能明显抑制阿尔茨海默病zhiliao靶点β-淀粉样前体蛋白裂解酶1的表达。外泌体对基因类药物的装载方式一般采用电穿孔法和化学转染法。河北整体实验外泌体载药咨询问价
外泌体已开发作为多种药物的载体，主要包括抗中流药物类、kang炎药物类、基因类及蛋白类等其他类型药物。河北整体实验外泌体载药咨询问价
在药物递送系统中，理想的载体应该是安全、有效,并且有很好的生物利用度。同时,载体的稳定性,低的细胞毒性和免疫原性,以及能否成功地将药物运送到特定的组织或细胞也是至关重要的。外泌体作为药物递送系统具有一系列的优点:(1)从患者的组织或血液收集(如骨髓、单核细胞或巨噬细胞)的外泌体,载药后可以逃避单核吞噬细胞系统(MPS)的qing除,从而减少药物的qing除率。(2)外泌体具有潜在的靶向性,可以增加药物输送到靶组织的能力[10]。(3)外泌体膜的特定脂质体和蛋白质,使得外泌体可以直接与靶细胞膜融合,从而明显提高药物进入细胞的可能性。(4)外泌体载体可以避开内吞途径的内化,而且外泌体的安全性在许多临床试验已经得到证实。河北整体实验外泌体载药咨询问价
