胎牛血清使用中的常见问题:血清中包含絮状沉淀,它们是什么,怎么处理?沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性,不会影响产品性质。要除去沉淀,离心血清(400g,1-2分钟)或者简单的让其沉淀在瓶子底部,将血清小心的转移到另一个无菌瓶里(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀,因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以,使用产品时要摇动并加热血清至37℃,沉淀会自然消失。实验室如何选择适合的血清?国内一致认为HYCLONE的血清是更好的,但是根据我在北美的经历,国外一般认为GIBCO比HYCLONE好,所以并不是价格决定质量,但是总的来说这两种价格普遍偏贵,一般不是太娇气的细胞,国产的就够用了。此外,由于国内HYCLONE,GIBCO并没有生产线,我们只能从代理商那里买,而代理商又鱼龙混杂,所以买到假货的可能性也很大。胎牛血清全程冷链运输,无冻融现象。建德哺乳动物细胞生长培养基
胎牛血清都有哪些重要的指标:一、内有害元素,内有害元素是革兰氏阴性菌的细胞壁外壁层上的特有成分。当细菌死亡自溶或粘附在其它细胞时,才表现其毒性。内有害元素直接参与细胞凋亡,血清中内有害元素含量越低,对细胞毒性越小,越利于细胞的生长和传代;内有害元素含量过高,会直接导致细胞提前老化。国际上规定,胎牛血清的级别,应以内有害元素水平的高低来确定,其中,特级胎牛血清的内有害元素应。二、血红蛋白含量,胎牛血清的颜色会根据血红蛋白含量的不同表现出黄色、淡黄色、橘红色、微红色等。细胞培养用血清的标准是血红蛋白含量不高于20mg/dl,颜色越红,数值越高;反之,数值越低。实际上,血红蛋白含量的高低对血清并无直接影响。这个指标的意义在于能体现出采集血液过程的严谨规范程度,良好的操作能降低血清的溶血。义乌McCoy's 5A培养基胎牛血清经过细胞培养和杂交瘤细胞培养验证。
对于细胞培养而言,胎牛血清(FetalBovineSerum,FBS)的重要性不言而喻。尽管近年来无血清培养基和非动物来源的培养基越来越受到关注,但目前大部分细胞还无法适用这些培养基,并且存在费用较高和细胞生长较缓慢的缺点,因此,含有FBS的完全培养基仍然是目前主流的细胞培养体系。把细胞养好的三个关键要素是:良好的细胞来源,正确的实验操作,以及合适的培养体系。其中“合适的培养体系”就是要创造适合细胞生长的环境,给细胞建立一个满意的“家”,而FBS就好比于这个家的装修,可以提高细胞的居住环境和舒适性,让细胞更好更快地生长!
胎牛血清是一种天然产物,原产地牛源的生长环境和健康状况对于血清的产量和品质都有着重要影响。当产地的气候、环境等因素发生变化时,牛只数量的减少会直接影响血清产量,例如近年来澳洲爆发的森林火灾、千年难遇洪水、蓝舌病病情等,对当地畜牧产业造成了深远影响。随全球科研领域不断发展,血清需求量日益增加,合规血源变得愈发珍稀,高等血清更是一货难求。受此国际市场环境的巨大冲击,近期澳大利亚、新西兰和南美乌拉圭进口胎牛血清的原料价格持续高涨。胎牛血清天然含有粘附蛋白等细胞外基质成分,促进细胞的附着、铺展。
血清和血浆均来自全血,通过离心去除包括红细胞在内的成分。血浆和血清之间的区别在于,凝血蛋白存在于血浆中,但已从血清中去除。血浆一般是通过在离心前向血液中加入抗凝剂来制备的,但不会去除凝血蛋白。通过在离心前使血液凝固或通过普遍/渐进离心来制备血清。因此,与凝血相关的纤维蛋白原和蛋白质不存在于血清中。在人类中,以下22种蛋白质占血清和血浆总蛋白质含量的99%:白蛋白、总IgG、转铁蛋白、纤维蛋白原、总IgA、α-2-巨球蛋白、总IgM、α-1-抗胰蛋白酶、C3补体、结合球蛋白、α-1-酸性糖蛋白、载脂蛋白-B、载脂蛋白-A1、脂蛋白(a)、因子H、铜蓝蛋白、C4补体、补体因子B、前白蛋白、C9补体、C1q补体和C8补体。剩下的1%包括数百种蛋白质。更丰富的血清蛋白白蛋白,浓度为50mg/ml,约占总蛋白质量的一半。胎牛血清分装冻存时,须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均。海安特级胎牛血清 Fetal Bovine Serum(Superfine)
胎牛血清是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。建德哺乳动物细胞生长培养基
胎牛血清的保存方法:热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻的血清。加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分灭活。除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物明显增多,而且还会影响血清的质量。补体参与反应有:细胞毒作用,平滑肌细胞收缩,肥大细胞和血小板释放组胺,增强吞噬作用,促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。血清中的沉淀物絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量。可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理。显微镜下"小黑点":经过热处理过的血清,沉淀物的形成会明显增多。有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染。一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清。建德哺乳动物细胞生长培养基
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