重组蛋白是应用了重组DNA或重组RNA技术而获得的蛋白质。用于体外生产重组蛋白的宿主细胞主要是细菌(枯草芽孢杆菌、大肠杆菌)、酵母、昆虫细胞、哺乳动物细胞。 生产的蛋白在活性和应用方法方面均有所不同。根据自身的下游运用选择合适的蛋白表达系统,提高表达成功率。重组蛋白已被广泛应用于蛋白结构研究、免疫检测试剂、重组蛋白药物、诊断试剂开发、抗体药物靶点、CAR-T细胞靶点、Fc受体、流感病毒蛋白和细胞因子等大多数热门研究领域。严格的质量控制系统, 才能保证重组蛋白产品的生物活化与一致性。ProSpecBDNF重组蛋白
蛋白质生物学不仅包含研究内容,也包含了研究所需的工具。即基于蛋白质结构及功能的研究,和利用抗体、蛋白及多肽等作为纯化、检测和分析生物系统的工具。有些蛋白分析方法(如western blotting和ELISA等)已作为实验室的常规实验方法使用了多年。其它方法如定量蛋白质谱的实验方法则是相对较新的实验技术,并且正在快速发展中。针对重组蛋白纯化,赛默飞提供种类丰富的标签选择,包括6xHis, GST, DYKDDDDK (FLAG), c-myc, 和 HA。还提供一系列磁珠和树脂等纯化产品,磁珠、磁性琼脂糖、散装树脂、离心柱或试剂盒,FPLC层析柱,96孔过滤板等,用于从大肠杆菌、酵母、昆虫或哺乳动物表达系统中纯化从微克(μg)到低千克(kg)级重组蛋白。可满足大多实验的需求,包括高通量筛选、批量处理、中试和工艺纯化等。ProSpecBDNF重组蛋白选择合适的重组蛋白表达系统,至关重要。
不同表达系统所生成的重组蛋白间有何主要区别?以赛默飞为例,Thermo Fisher Scientific™ 所提供的重组蛋白产品通常在大肠杆菌,昆虫细胞或哺乳动物细胞等不同的表达系统中产生。不同表达系统之间产生的重组蛋白的主要差别在于这些蛋白所携带的翻译后修饰,如糖基化修饰。在大肠杆菌中生成的重组蛋白未经糖基化。在昆虫细胞中产生的重组蛋白通常经有部分糖基化,但不含半乳糖和唾液脱盐酸,糖链也无复杂分支。在哺乳动物细胞中生成的重组蛋白会发生附带完全的糖基化修饰。备注:Mimic™ Sf9 昆虫细胞(来源于sf9昆虫细胞系,经改造可稳定表达多种哺乳动物糖基转移酶)可产生用于表达带末端唾液酸和半乳糖的复杂的N-糖链。
量化生产的重组蛋白种类有限,如果购买不到所需蛋白,则需要重组蛋白定制服务。对于特定的应用,使用正确的蛋白表达系统是实验成功的因素。以义翘神州为例,义翘神州的重组蛋白表达服务,拥有多年的重组蛋白表达经验,提供从基因合成、载体构建到蛋白表达及纯化的一站式服务。拥有多种重组蛋白表达系统,包括原核生物蛋白表达系统、酵母蛋白表达系统、昆虫细胞蛋白表达系统(杆状病毒)、哺乳动物细胞蛋白表达系统。具备多种纯化体系,为蛋白表达与纯化方面提供多种选择。自公司成立以来,已成功表达约6000 个毫克至克级的不同种属的重组蛋白。每年1000个新蛋白的研制和生产能力以及快速解决研发和生产问题的能力。拥有近百个2L 到1000L 不同体积的发酵罐和超过30 种重组蛋白纯化体系,可以满足高通量及大规模的重组蛋白表达需求。重组蛋白的应用显著增长,用于重组蛋白表达和纯化的技术和产品也得以增长。
目前中国重组蛋白药物主要有∶重组胰岛素、重组干扰素、重组凝血因子、重组粒细胞集落刺激因子、酶替代重组蛋白药物、重组生长因子等。市场上,生产销售胰岛素的主要企业有诺和诺德、礼来、赛诺菲、通化东宝、甘李药业、联邦制药等,各公司在产品线上各有不同。通化东宝是生产上市重组人胰岛素的国内公司,长久以来深耕二代胰岛素市场,甘李药业则选择专注于三代胰岛素市场,联邦制药是继甘李药业后第二家生产上市三代胰岛素的国内公司。从国内市场竞争格局上来看,诺和诺德、赛诺菲及礼来三巨头依旧占据主要地位,而通化东宝的二代胰岛素目标市场在集中在基层领域。不同的重组蛋白系统有不同的优缺点。普欣EGF重组蛋白怎么样
重组蛋白,可用于细胞生长和分化、细胞信号转导以及涉及疾病发作和进展的研究。ProSpecBDNF重组蛋白
哺乳动物蛋白表达系统在生产重组蛋白中的应用中,优势明显。具体表现为以下方面,能实现翻译后修饰及正确的蛋白折叠复性:哺乳动物为真核细胞,细胞器可以对蛋白正确折叠加工。表达水平高:载体可在哺乳动物细胞中高表达重组蛋白,表达量可高达1-3g/L。蛋白表达高效稳定:高效启动子控制,稳定表达,并可以选择多种表达,如瞬时表达、稳定细胞株表达、营养缺陷型细胞株表达(DHFR/GS)、大规模悬浮细胞表达等。适合大规模蛋白表达:常用的哺乳动物表达宿主细胞(HEK293和CHO),使用悬浮细胞培养,可以在一个月内可产生数克级蛋白。ProSpecBDNF重组蛋白
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