哺乳动物蛋白表达系统在生产重组蛋白中的应用中,优势明显。具体表现为以下方面,能实现翻译后修饰及正确的蛋白折叠复性:哺乳动物为真核细胞,细胞器可以对蛋白正确折叠加工。表达水平高:载体可在哺乳动物细胞中高表达重组蛋白,表达量可高达1-3g/L。蛋白表达高效稳定:高效启动子控制,稳定表达,并可以选择多种表达,如瞬时表达、稳定细胞株表达、营养缺陷型细胞株表达(DHFR/GS)、大规模悬浮细胞表达等。适合大规模蛋白表达:常用的哺乳动物表达宿主细胞(HEK293和CHO),使用悬浮细胞培养,可以在一个月内可产生数克级蛋白。溶解后的重组蛋白如何保存?PeproTechBMP-2重组蛋白怎么样
近年来,用于重组蛋白表达和纯化的技术和产品迅速增长。自从亲和标签融合技术出现以来,多种多样的短肽或蛋白亲和标签极大地方便了外源表达重组蛋白的分离与蛋白质复合体的纯化,已成为蛋白质研究领域不可或缺的工具。多聚组氨酸标签(His-tag)是目前高通量蛋白纯化普遍使用的亲和标签,His 标签融合蛋白的固定化金属离子亲和层析(immobilized metal-ion affinity chromatography, IMAC)被作为主要的蛋白纯化方法。从重组蛋白的表达优化,到小量诱导纯化,再到中试、大规模生产需要众多繁琐、大量的工作。快速、可靠、高效的自动化分离分析技术可极大地提高效率,降低时间、人员成本。义翘神州IL-9重组蛋白45.苏州近岸蛋白专注生物医药领域中的重组蛋白质。
如果说明书上没有具体的说明,如何重溶(Reconstitute)冻干的重组蛋白?我们建议采用以下方式:(1)将试剂瓶和重溶缓冲液平衡至室温。(2)短暂离心试剂瓶以确保在小瓶底部收集所有冻干物。(3)加入推荐的重溶缓冲液,达到产品说明上推荐的浓度。避免剧烈振荡或移液器吹打,这可能导致蛋白质变性。(4)使试剂瓶在室温下重溶15-30分钟,可使用360度摇床或手动轻轻上下颠倒。(5)每管体积不小于10μL分装,并按产品说明书上的指示储存。(6)如果小瓶内呈现薄片或颗粒,则在室温下将产品混合几小时,然后在4℃过夜。
不同细胞研究中添加的重组蛋白有所不同。人胚胎干(ES)细胞研究中的重组蛋白主要有,细胞培养用人重组actin A,bFGF,IGF-II等,细胞分化用BMP-4,EGF和HGF。间充质干(MSC)细胞研究中的重组蛋白主要有,间充质干(MSC)细胞培养和自我更新的生长因子:LIF,bFGF,EGF,HGF,PDGF和Wnt3,MSC分化的生长因子或细胞因子:BMP-2与TGF-β1。神经干细胞(NSC)研究中的重组蛋白主要有,重组EGF,重组bFGF,和重组VEGF,用于神经干细胞的扩增。此外,包括BDNF在内的多几种神经营养因子例如BDNF,CNTF,和GDNF也可适用于相关研究。高纯度、高活性、低内毒素,高批次间一致性是选购重组蛋白的重点。
苏州近岸蛋白质科技股份有限公司,成立于2004年,是一家专注于生物医药领域中重组蛋白质技术与应用研发的****。公司建立了蛋白质研发、分子进化、抗体开发技术平台以及在诊断、疫苗、药物等蛋白质应用领域的综合技术平台,可实现从蛋白质原料到应用技术开发的全产业链的创新支持。基于公司出色的重组蛋白质制备平台,novoprotein 研发生产的细胞因子、酶试剂产品凭借其优良的品质、高性价比赢得了海外细胞因子及生物试剂销售商的认可。已为十余个国家与地区的数千家企业与科研机构提供可靠的产品与服务,与国内外生物药、疫苗、体外诊断等企业建立了长期合作关系,并给广大科研单位提供产品与服务,公司产品及服务被上千篇SCI论文引用。多肽类激素药是重组蛋白药物中的明星产品。ProSpecIL-3重组蛋白
高质量的重组蛋白能提高实验的可重复性与结果的可信度。PeproTechBMP-2重组蛋白怎么样
蛋白的溶解性与很多因素有关,其中比较重要的是pH值和离子强度。购买的重组蛋白按照说明上所标明的溶解液来溶解。如果您所用的溶解液的pH值和离子强度与说明书中所标明的不符,很多时候会造成细胞因子或重组蛋白不能完全溶解或者根本无法溶解,这样所配得的细胞因子或重组蛋白必然活性不够或丧失。重组蛋白溶解时一定要溶解到指定的浓度,高于或低于该浓度范围,都可能会导致重组蛋白不稳定,出现活性下降的现象。另外,重组蛋白在溶解时,一定不能用涡旋仪进行快速振荡,以免出现蛋白链断裂。重组蛋白的冻干粉是非常容易溶解的,一般用移液器的吸头轻轻吹几下,即可使细胞因子或重组蛋白完全溶解。PeproTechBMP-2重组蛋白怎么样
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