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重组蛋白基本参数
  • 品牌
  • R&D Systems;PeproTech;ProSpec
  • 型号
  • 齐全
重组蛋白企业商机

在生物学研究和蛋白质功能研究中,常用的方法之一是重组融合蛋白,简称融合蛋白。重组融合蛋白是由两个或两个以上原为不同蛋白质编码的基因组合而成的。由融合基因翻译而来的包含单个或多个多肽的重组融合蛋白获得了来自每个原蛋白的功能特性。融合蛋白有三个重要的用途:帮助纯化克隆基因,报告表达水平,作为组织化学标签,使蛋白质在细胞、组织或有机体中的位置可视化。在重组蛋白纯化中,重组融合蛋白法通常用于亲和层析,在亲和层析中,将易于纯化的蛋白与研究人员希望研究的蛋白相连接。许多蛋白质和多肽已被用作融合标签,包括谷胱甘肽- s -转移酶(gst标签)、麦芽糖结合蛋白(mbp标签)、多组氨酸(his标签)、人类生长因子、泛素和抗体表位。此外,β-半乳糖苷酶、荧光素酶和绿色荧光蛋白(GFP)通常作为部分蛋白表达和定位的报告因子。如何长期保存重组蛋白?重组蛋白厂家

如果说明书上没有具体的说明,如何重溶(Reconstitute)冻干的重组蛋白?我们建议采用以下方式:(1)将试剂瓶和重溶缓冲液平衡至室温。(2)短暂离心试剂瓶以确保在小瓶底部收集所有冻干物。(3)加入推荐的重溶缓冲液,达到产品说明上推荐的浓度。避免剧烈振荡或移液器吹打,这可能导致蛋白质变性。(4)使试剂瓶在室温下重溶15-30分钟,可使用360度摇床或手动轻轻上下颠倒。(5)每管体积不小于10μL分装,并按产品说明书上的指示储存。(6)如果小瓶内呈现薄片或颗粒,则在室温下将产品混合几小时,然后在4℃过夜。重组蛋白厂家重组蛋白药物主要有哪些?

功能性ELISA是一类以ELISA形式进行的、基于体外配体结合的分析法。该方法用于检测目的蛋白与其天然结合物配体之间(如生长因子与其受体)的结合能力。如果在该检测中生长因子能够与其天然受体相结合,则该生长因子很可能是具有功能的。ED50为OD值读取过程中能够提供50%信号强度的生长因子浓度(在包被了受体的平板上)。重组蛋白使用了基于细胞的检测分析或功能性ELISA分析对其生物学活性进行了检测,产品页上会提供相应的ED50值。也有些重组蛋白没有提供生物活性数据。在大多数情况下,这表明没有进行生物活性测试,但它并不一定意味着蛋白是没有活性的。在没有生物活性数据的情况下,这些蛋白可用做蛋白质分子量标准,蛋白免疫印记阳性对照(如果是全长的重组蛋白)或免疫原。其它可能的用途是配体结合试验或ELISA的标准品。

购买的重组蛋白单位一般是 μg,重组蛋白检测结果和用量常用单位是 U/mL 或 IU/mL。U是什么?和IU之间有什么差别?它们又是怎么与 μg 进行换算的呢?首先,U 是蛋白活性单位,用于计量蛋白本身的生物学活性。活性单位指在适条件下,单位时间内产生单位生物学效应的蛋白量。以酶为例,1961年,国际生物化学学会酶学委员会提出采用统一的「国际单位」(IU)来表示酶的活力,在合适条件下,每分钟内催化 1 微摩尔(μmol)底物转化为产物或转化底物中 1 微摩尔的有关基团所需的酶量。即 1 IU=1 U=1 μmol/min。IU 与 μg之间的换算,要引入比活性的概念。比活性是指单位质量蛋白的生物学活性单位,通常用 U/μg 或 μmol/min/μg 表示。以酶为例,在合适条件下,如果 1 μg 酶可以在 1 分钟内催化 1μmol 的底物,那么其比活性就是 1U/μg。比活性是重组蛋白的一项重要指标。进行比活性项目的检测,不仅可以反映产品生产工艺的稳定情况,而且可以比较不同表达体系、不同生产厂家生产同一产品的品质情况。比活性高说明产品的生产工艺更先进、纯度更高、质量更优。重组蛋白的表达系统有多种。

重组蛋白的许多生产厂家都是不限制产品使用期限的,不规定重组蛋白和抗体产品的失效期或生产日期。在适当的存储条件下,重组蛋白和抗体可以保持活性稳定多年。这些条件包括以冻干粉形式存储蛋白,以大于 0.1 mg/mL 的蛋白浓度存储冷冻的产品(-20 °C 或 -80 °C)以及限制冻融循环的次数。但是,厂家常规质量控制测试可确保所有产品在销售时都具有可接受的生物活性。在实验室的正常条件下使用时,我们保证产品达到或超过我们提供的技术参数。由于无法控制终端用户的存储条件,通常,保质期为自购买之日起 6-12 个月。若有特殊要求,请参见各产品说明书。进口重组蛋白品牌有哪些?人IL-9重组蛋白定制

PeproTech提供多种高质量细胞因子和重组蛋白,包装规格多,备受科学家青睐。重组蛋白厂家

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