miRNA的运载也存在着种种挑战:miRNA体内稳定性差、生物分布不理想、易被体内酶降解以及容易引起副反应等。越来越多的研究表明外泌体也是体内运载miRNA的优良载体,并且利用外泌体运输miRNA的zhiliao方法已经在许多疾病模型中得以应用。采用转染间充质干细胞的方法,使外泌体载有anti-miR-9。在进行间充质细胞和多形性成角质细胞瘤(GBM)细胞间anti-miR-9传递的实验时,发现两种细胞不jin可以通过缝隙连接介导的细胞间通讯(GJIC)也可以通过外泌体传递anti-miR-9。且anti-miR-9降低两种GBM细胞(U87和T98G)对中流药物替莫唑胺(TMZ)的抵抗能力的功能主要由外泌体传递的anti-miR-9实现,而非经GJIC传递的anti-miR-9,显示出外泌体在运载miRNA进行基因zhiliao时的潜力。外泌体载药系统在ai症、脑梗死和神经退行性疾病等各种疾病模型的研究中显示出理想的zhiliao效果。样本外泌体载药实验大概费用
外泌体载药系统中外泌体提取的方法有很多种,有差速超高速离心法、超滤法、试剂盒提取方法、磁珠免疫法等,但单一外泌体分离方法都有其不可解决的弊端,而联合不同的分离方法可得到更纯净、更丰富的外泌体。在装载连翘酯苷A(FTA)的外泌体递药系统的功效中的研究中,采用了差速离心法和超滤法提取外泌体,先使用超滤管浓缩细胞上清液,富集外泌体,再使用超高速离心提取外泌体,缩减了离心次数和时间,提高了外泌体提取效率,且整个过程简单易操作。同时采用低温超声孵育的方法制备FTA-Exos递药系统。吉林样本外泌体载药实验服务装载紫杉醇的外泌体可有效抑制胰腺ai细胞的增殖。
外泌体也可作为蛋白类药物的载体用于疾病的zhiliao。Haney等人将包载过氧化氢酶的外泌体用于帕金森疾病的zhiliao。实验结果表明,超声是将过氧化氢酶包载到外泌体中的jia方式,能有效地避免过氧化氢酶的降解。体内研究结果显示,包载过氧化氢酶的外泌体能明显地降低大脑黑质致密部中炎症因子CD11b的表达,该组中多巴胺神经的数量比对照组高3倍,说明它能有效地保护多巴胺神经,防止其退化。目前已有研究报道,外泌体自身携带的蛋白类物质同样可以用于疾病的zhiliao。
与人工合成囊泡相比,外泌体虽然具有一定的靶向性,但由于其高度的复杂性和成分的多样性,作为载药体的应用仍缺乏普遍靶向性,可能产生脱靶效应,诱发不良反应;而且可溶性低,循环半衰期短,因此针对外泌体表面标志物的改造以获得靶向性一直是研究热点;此外,也有大量研究针对内容物进行改造,近年来主要以外源性的抗中流药物、核酸分子、转录因子和酶类,内源性母乳多糖、低聚糖、多肽等为“货物”,将它们载入外泌体后运送到标靶位置。对母乳外泌体进行载药改造,既保留了外泌体本身的特性,同时充分利用了功能性内外源物质,又可进一步优化外泌体的靶向性与稳定性,有望为zhiliao新生儿相关疾病提供新的思路和方法。外泌体作为药物载体可稳定存在于血液中,纳米级尺寸增强药物在中流部位的渗透滞留效应(EPR)。
外泌体的提取方法在外泌体载药系统中应用——免疫亲和层析法。利用生物体内存在的抗原、抗体之间高度特异性的亲和力进行分离的方法,主要用于生物大分子的分离、纯化。将其应用于外泌体的分离主要是借助外泌体表面的特异性抗体,如TSG101或四跨膜蛋白。此方法的原理是利用抗原抗体的特异性结合,只有囊泡表面有特异性的抗体才可以被识别,这使得提取的外泌体纯度高,但是产量低。分别用超速离心、密度梯度离心和免疫层析法,从血浆和细胞上清中提取外泌体蛋白,结果表明,免疫亲和层析法得到的外泌体表面存在多种标记蛋白(Alix、CD9、CD63),同时,ELISA和PCR结果也证明了该方法的可行性。外泌体载药后可以绕开P-糖蛋白,明显降低药物进入细胞后的外排作用。样本外泌体载药实验大概费用
HEK293FT来源外泌体与脂质体融合为杂交外泌体,可装载并传递靶向RunX2的CRISPR/Cas9系统至间充质干细胞中。样本外泌体载药实验大概费用
传统的药物递送系统(如脂质体、合成纳米粒)jin能起到简单的药物递送作用,而外泌体不jin可以传递药物到受体细胞,并且它自身携带的mRNA、蛋白类等物质具有生理活性,因此在未来的研究中可以选择不同细胞来源的外泌体作为药物载体,对疾病进行更有效的zhiliao。除了通过细胞产生需要的不同类型外泌体,近年来对于仿生外泌体的研究也引起了人们广fan的兴趣。设计了一种通过离心悬浮细胞制备类似外泌体纳米囊泡的装置,这种装置制备的纳米囊泡产量比外泌体高250倍。因此,依靠仿生外泌体代替外泌体可以有效地解决外泌体载药量低、分离纯化耗时耗力、产量不足等问题,但它仍处于初步研究阶段。样本外泌体载药实验大概费用
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