外泌体的提取方法在外泌体载药系统中应用——免疫亲和层析法。利用生物体内存在的抗原、抗体之间高度特异性的亲和力进行分离的方法,主要用于生物大分子的分离、纯化。将其应用于外泌体的分离主要是借助外泌体表面的特异性抗体,如TSG101或四跨膜蛋白。此方法的原理是利用抗原抗体的特异性结合,只有囊泡表面有特异性的抗体才可以被识别,这使得提取的外泌体纯度高,但是产量低。分别用超速离心、密度梯度离心和免疫层析法,从血浆和细胞上清中提取外泌体蛋白,结果表明,免疫亲和层析法得到的外泌体表面存在多种标记蛋白(Alix、CD9、CD63),同时,ELISA和PCR结果也证明了该方法的可行性。负载姜黄素的外泌体可经外泌体转运通过血脑屏障, 运送到脑组织中, 减轻氧化应激,维持脑血管屏障功能。天津外泌体载药技术原理
静脉注射修饰RVG神经元靶向肽的外泌体能透过血脑屏障,用于阿尔茨海默症的zhiliao。Alaarez-Erviti等通过基因工程技术使DC细胞分泌的外泌体膜上连接一个特异性RVG神经元靶向肽,从而使包载siRNA的外泌体顺利地靶向到脑中特定的神经细胞。研究结果显示,负载siRNA的RVG-EXOs可以使阿尔茨海默症相关BACE1mRNA下调61%,蛋白表达下调62%,明显降低β-淀粉样肽1-42水平。之后,COOper等利用相同的技术递送α-突触核dan白siRNA到转基因模型鼠中,致使大鼠中脑、纹状体、皮质层区域mRNA水平分别下调49%、56%、50%,相应的α-突触核dan白水平下调32%、26%、30%,而且能有效地抑制中脑区域α-突触核dan白的聚集,展示了外泌体用于脑部疾病zhiliao的巨大潜力。江西整体项目外泌体载药实验大概费用载药的外泌体提纯以后一般会通过静脉注射、皮下注射、腹膜内注射或者中流处注射等方式进行疾病zhiliao。
平阳霉素对多种ai细胞有有效的抑制作用。使用乳腺ai来源的外泌体装载平阳霉素作用于乳腺ai中流干细胞,观察其对乳腺ai中流干细胞活力和侵袭能力的影响。结果表示,随着平阳霉素浓度增加,细胞活力逐渐下降,并且搭载平阳霉素外泌体对细胞活力的抑制作用更佳。相比于直接用平阳霉素处理细胞,用外泌体装载的平阳霉素对乳腺ai中流干细胞的细胞活力具有更好的抑制效果。因此,载药外泌体具备有效降低乳腺ai中流干细胞恶性生物学行为的潜力。
外泌体载药系统中外泌体提取的方法有很多种,有差速超高速离心法、超滤法、试剂盒提取方法、磁珠免疫法等,但单一外泌体分离方法都有其不可解决的弊端,而联合不同的分离方法可得到更纯净、更丰富的外泌体。在装载连翘酯苷A(FTA)的外泌体递药系统的功效中的研究中,采用了差速离心法和超滤法提取外泌体,先使用超滤管浓缩细胞上清液,富集外泌体,再使用超高速离心提取外泌体,缩减了离心次数和时间,提高了外泌体提取效率,且整个过程简单易操作。同时采用低温超声孵育的方法制备FTA-Exos递药系统。外泌体可作为天然的药物运载系统,将zhiliao分子、药物等运送至靶细胞,进而发挥zhiliao作用。
中流坏死因子相关凋亡诱导配体(TNFrelatedapoptosisinducedligand,TRAIL)能够在多种中流细胞中诱导选择性凋亡,而对正常细胞无毒性作用,已经成为临床前研究中有发展前景的抗中流药物之一。Shamili等人利用非病毒载体将编码TRAIL-GFP的质粒载入间充质干细胞(MSCs)。研究结果表明,MSCs衍生的负载TRAIL的外泌体(Exo TRAIL)通过促使ai细胞大量坏死抑制黑色素瘤进展,并且其抗中流活性呈现剂量依赖性。间充质干细胞外泌体(MSC-Exo)还能够通过递送内源性或者外源性的miRNA或蛋白质,zhiliao其他多种中流。外泌体载yao方法-共孵育方法适用于亲脂类药物。黑龙江组织外泌体载药参考价格
口服递送装载紫杉醇(PAC)的外泌体作用于人肺ai荷瘤小鼠,其中流的生长明显受到抑制。天津外泌体载药技术原理
1. 外泌体作为粒径纳米级的天然囊泡具有介导细胞间信号转导、抗原呈递和免疫应答等功能。此外,外泌体还兼具人工合成囊泡的小粒径、脂溶、稳定、高渗透性和可改造性等特点,通过共孵育等主动载yao方式和超声法等被动载yao方式可实现外泌体载药。母乳中富含外泌体,可促进细胞增殖和迁移,减轻炎症,对新生儿相关疾病 ( 肠炎、过敏、感ran等) 具有保护潜能。通过对母乳外泌体进行表面分子修饰和内容物深度改造后,有望为新生儿疾病提供更加高效、稳定的zhiliao手段。天津外泌体载药技术原理
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