自噬基本参数
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自噬企业商机

2005年,Lemaster提出线粒体自噬的概念:细胞利用自噬活动的选择性,通过自噬溶酶体清chu细胞内衰老、损伤或功能障碍的线粒体,维持细胞内线粒体质量和数量的稳定。线粒体自噬是一种选择性自噬现象,参与调节细胞内稳态,与细胞发挥正常功能密切相关。近年来,线粒体自噬在肝脏疾病、糖尿病、心血管疾病、帕金森综合征等疾病中的研究取得了突破性进展。线粒体自噬是复杂的生理过程,在不同细胞中有多种诱导和调控机制,如酵母中的自噬相关基因(autopahgyrelatedgenes,Atg)家族蛋白诱导的调控机制及网织红细胞中NIX(Nip3-likeproteinX)介导的线粒体自噬机制等。小自噬也就是通过溶酶体细胞膜凹陷,将细胞质物质直接吞入溶酶体的过程。安徽细胞自噬电镜检测

线粒体自噬通过自噬降解胞内受损或多余的线粒体,是维持细胞稳态的关键机制之一。该途径异常会导致一系列疾病,如神经退行性疾病、病症等。在线粒体自噬发生过程中的关键步骤是自噬小体识别待降解线粒体的过程,该过程一般认为由自噬受体和LC3/GABARAP家族蛋白之间的相互作用实现。目前仍有比较多线粒体自噬受体的选择性识别机制尚不明确。该研究探讨线粒体自噬特异性受体Bcl-rambo与LC3s/GABARAPs的选择性结合及其分子识别机制,研究该选择性结合对Bcl-rambo介导的线粒体自噬的影响。研究发现:Bcl-rambo与6种LC3/GABARAP家族蛋白的相互作用强度有明显差异。通过分子建模及突变研究发现这种选择性可能与自噬受体的LIRmotif的某些特定残基有关。进一步的细胞内实验表明,破坏这种选择性识别机制会导致Bcl-rambo介导线粒体自噬异常。上海细胞自噬正常细胞自噬增强,可表现出阻止肿细胞发生的功能。

在自噬过程中,通过压力诱导自噬后,细胞质物质被自噬体的双膜结构隔离。这些自噬体与溶酶体融合,成为自溶体,一些被隔离的货物被降解,然后回收以维持细胞内稳态。在我们的生命中,细胞会因为氧化应激(长期使用和经久不修,会出现老化,失灵的现象,一般情况下,细胞可能会凋亡)而积累损伤,慢慢变老。随着年龄的增长,这种压力会逐渐增加,逐渐削弱细胞活力,使细胞效率降低。而自噬可以清理掉磨损的细胞,并进行更换,从而使细胞衰老的时间延长。

目前认为,自噬体的膜不是直接来源于高尔基体或内质网,而是在胞浆中重新生成的,但具体的机制尚不清楚。当beclin-1被活化后,胞浆中先形成比较多个membranesource(自噬体膜发生中心),在它们不断扩展的过程中,VMP1蛋白由内质网和高尔基体转位到自噬体膜上(VMP1又叫TMEM49,已知唯独与自噬有关的跨膜蛋白),同时,MAP1-LC3由胞浆型(即LC3-I)转位到自噬体膜(即LC3-II),LC3这一转变过程可被WesternBlot和荧光显微镜检测到,现已成为监测自噬体形成的推荐方法。UA可引导粒线体的自噬作用,并防止有功能障碍粒线体的累积。在囓齿动物理,UA可经由粒线体引发增进运动能力,这些新的发现建议UA在增进粒线体和肌肉功能方面有医药潜力。效表达红色荧光蛋白、绿色荧光蛋白和LC3B的融合蛋白,呈现明亮的红色和绿色荧光,可以用于细胞自噬的检测。

汉黄芩苷是中药黄芩的有效成分之一,研究发现,在给予50、100、200、300、400 μmol/L的汉黄芩苷后,MDA-MB-231细胞活力有不同程度的降低;汉黄芩苷可引起MDA-MB-231细胞自噬,且具有时间和浓度依赖性,其调节细胞自噬的机制与MAPK-mTOR通路相关而非JNK通路。另外,从中药点地梅中分离得到的三萜皂苷类化合物saxifragifolin D(SD),增加MCF-7和MDA-MB-231细胞LC3-II、Beclin-1、III型PI3K(Vps34)蛋白的量,并通过活性氧(ROS)介导的内质网应激(ER stress)途径诱导乳腺ai细胞凋亡和自噬,抑制ai细胞的增殖。由于自噬体膜形成过程中需要LC3,因此通过标记LC3可以识别自噬体。安徽细胞自噬电镜检测

分子伴侣介导的自噬:胞质内蛋白结合到分子伴侣后被转运到溶酶体腔中,然后被溶酶体酶消化。安徽细胞自噬电镜检测

防己诺林碱是中药粉防己的有效成分之一,1×10-3~1×103 mmol/L的防己诺林碱可激huop53/sestrin2/AMPK通路,诱导HepG2和PLC/PRF/5细胞自噬性死亡,但不诱导细胞凋亡;抑制AMPK通路和干扰Atg5基因后,可削弱防己诺林碱的上述作用,提示防己诺林碱诱导细胞自噬的作用机制可能与激huop53/sestrin2/AMPK通路相关。火麻仁的成分大ma酰B也可通过抑制Akt/mTOR通路诱导HepG2细胞自噬性死亡。另外,姜黄素和阿霉素联合用药后,可诱导HepG2细胞自噬,上调LC3-II的量,提高LC3标记的自体吞噬体和自噬性溶酶体的表达,同时诱导凋亡,也提示联合用药防治肝ai的有效性。安徽细胞自噬电镜检测

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