胎牛血清应该怎么选?稳定性,FBS作为其他行业的副产品,其生产在本质上会受到天气、食物供应、经济条件和牛群规模及病情等各种因素的影响,导致血清的供应可能出现货源、价格及批次间的不稳定性,从而造成实验的不顺甚至实验失败。在过去,国内外已有多个实验室出现过因血清批间差异大而导致实验结果无法重复的情况,浪费了巨大的时间和金钱成本。因此,找到稳定提供同批次FBS的供应商,对于确保自己细胞实验结果的真实性和可重复性具有重要意义,而且花在重复实验或检验新批次上的时间将很大减少。由于胎牛血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间。DMEM(高糖)培养基(含双抗)供货价格
血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成分虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、元素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。牛血清是细胞培养中用量更大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成分,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。1.提供对维持细胞指数生长的元素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他元素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到消毒作用。4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。食蟹猴血清供应报价胎牛血清是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
如何解冻血清?血清应该在2-8°C过夜解冻以避免降解,或者在室温条件下,定期轻轻摇动使组分重悬。解冻的血清在加入细胞培养基前应该混合均匀。由于反复冻存会严重影响血清品质,建议将解冻的血清分装成单次使用量,并冻存于-20°C。如果储存于2-8°C,应该在2-4周使用。温度超过37°C时会降解营养成分,破坏血清功能。如果血清收到时存在部分解冻,还能继续使用吗?血清是干冰包装运输,到达时应该是冷冻状态。但是,如果由于运输时间超期导致部分解冻,依然可以继续使用。完全解冻后分装成单次用量进行冻存。血清产品的保质期是多久?大部分血清产品,在未开封冻存的情况下生产之日起5年,具体可参考瓶身或CoA上的信息。
为什么有些血清是热灭活的?如何热灭活?哺乳动物血清中天然存在的补体蛋白参与细胞溶解事件、收缩平滑肌、从肥大细胞和血小板中释放组胺和激发淋巴细胞和髓细胞。热灭活破坏了血清中补体的活性,因此免疫学应用,培养胚胎干细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时推荐使用。热灭活方法是在56°C水浴中处理30分钟,并每隔大约10分钟旋转一次瓶子。为了保持精确,可使用一个类似大小的瓶子作为对照,对照瓶内放入同等体积的水,并放置一个温度计,在温度到达56°C时开始计时30分钟。热灭活过程必须小心控制,避免血清中支持细胞和组织繁殖的关键蛋白组分发生降解。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛。
胎牛血清使用中的常见问题:血清中包含絮状沉淀,它们是什么,怎么处理?沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性,不会影响产品性质。要除去沉淀,离心血清(400g,1-2分钟)或者简单的让其沉淀在瓶子底部,将血清小心的转移到另一个无菌瓶里(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀,因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以,使用产品时要摇动并加热血清至37℃,沉淀会自然消失。实验室如何选择适合的血清?国内一致认为HYCLONE的血清是更好的,但是根据我在北美的经历,国外一般认为GIBCO比HYCLONE好,所以并不是价格决定质量,但是总的来说这两种价格普遍偏贵,一般不是太娇气的细胞,国产的就够用了。此外,由于国内HYCLONE,GIBCO并没有生产线,我们只能从代理商那里买,而代理商又鱼龙混杂,所以买到假货的可能性也很大。虽然胎牛血清与新生牛血清的成分并不存在很大的差别,可是诸如促细胞生长因子和促贴附因子等组份并不相同。温岭RPMI 1640 Medium
解冻胎牛血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均,减少沉淀的发生。DMEM(高糖)培养基(含双抗)供货价格
胎牛血清是妊娠后期剖腹取出的胎牛血清。胎牛血清营养成分完全而丰富,代谢产物极少,微生物传染的可能性更小,品质更高,是组织细胞培养和病毒增殖时的重要营养来源。在细胞培养过程中,经常加入5%-20%的胎牛血清(澳洲),更常使用的胎牛血清(澳洲)浓度是10%。高浓度的血清可能改变细胞的基因表达谱,影响后续实验的结果,在实验中使用10%的澳洲胎牛血清培养293T细胞,效果非常好。但是有些细胞也会使用5%的胎牛血清(澳洲)或者20%的胎牛血清(澳洲),要根据具体细胞选择合适的胎牛血清(澳洲)浓度。DMEM(高糖)培养基(含双抗)供货价格
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