细胞和组织培养为什么需要使用血清?血清通常作为补充剂,以2-10%的浓度加入培养基中,为细胞提供综合营养、元素、生长和附着因子。血清还可作为细胞培养系统的缓冲液,避免各种因素(包括pH变化、蛋白水解活性或重金属、内毒等)干扰细胞生长或产生毒性作用。血清是如何加工的?血清采集后冷冻运输至加工工厂,解冻并检测细菌、病毒、内有害元素和血红蛋白含量等多项指标。选择更优良的血清在无菌环境下进行系列膜过滤无菌处理,然后在无菌环境下进行分装并快速冻存于-20°C,在所有批次验证达到或找过QC标准之前隔离存放。胎牛血清免受蛋白酶、毒性物质、PH值波动、机械剪切力、氧化及自由基的损伤。建德RPMI 1640 Medium (含双抗)
血清是细胞培养过程中常用的生物试剂,市面上有很多种类的血清,现在就来给大家介绍其中的一款——透析胎牛血清。透析胎牛血清是采用透析的方法,过滤去除10KDa以下的小分子(如氨基酸、核苷:次黄嘌呤和胸腺核苷等、胆固醇等),而保留血清中的大分子成分,因而可用于一些特定的细胞实验,比如:需要避免细胞培养基中一些小分子干扰的实验。使用放射性标记小分子,对生物合成过程进行监测,以研究蛋白质等大分子的生化性质、合成、加工、细胞内传送、分泌和降解过程。这时,常将细胞放在含有充足养分和放射性标记氨基酸(如35S标记的蛋氨酸或半胱氨酸)的培养液中进行标记。为避免外源未标记的氨基酸的干扰,这时所用的血清就是透析胎牛血清,不含蛋氨酸和半胱氨酸,基础培养基也要求不含蛋氨酸和半胱氨酸。建德RPMI 1640 Medium (含双抗)胎牛血清全程冷链运输,无冻融现象。
胎牛血清特点:采集方法:通过密闭系统收集法保证血清质量,保证低内有害元素、低血红蛋白过滤方法:通常采用3个连续的100nm孔径的过滤器过滤检测体系:每批产品均经过严格的细菌、支原体、病毒、内有害元素、血红蛋白等检测。胎牛血清功能及作用:牛血清是细胞培养中用量更大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必需的营养成分,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。1.提供对维持细胞指数生长的元素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他元素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到消毒作用。
胎牛血清的作用:保护细胞,胎牛血清可以为生日包的生长提供一些重要的元素,同时可以为身体提供蛋白质,能够识别维生素和一些其他的物质,因此能够比较好的来处理一些有害物质。这个产品也可以提供蛋白酶的抑制剂,可以使细胞传代时,将剩余的胰蛋白酶失去活性,因此能够起到保护细胞不受到伤害的作用。胎牛血清是一个比较先进的产品,也是一个比较先进的研发成果,目前的生产成本是比较高的,所以在市面上的价格并不会太便宜,根据了解目前的销售价格可能需要2000多元,所以大家看到几百元的产品要慎重的购买,当然可能也会与规格的大小有密切的关系。胎牛血清提供对维持细胞指数生长的元素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。
胎牛血清应该怎么选?血源可追溯性:选择来源安全、可追溯的FBS对于细胞培养来说至关重要。目前市面上存在较多以假乱真的FBS产品,科研工作者对血清的真实产地、来源难以鉴别。对此,国际血清行业协会(ISIA)实施了供应链可追溯性的行业标准,以确保FBS的质量和安全性。例如,FBS供应商是否保留原产地的可追溯记录?是否持有血清生产各阶段处理、运输和商业交易的文件?这些都是判断FBS可追溯性需要考虑的因素。产品检测,每款FBS在生产上市之前,必须经过严格的质控检测。质控环节必不可少,以确保上市的血清符合规定合乎规格,而血清产品分析证书(COA)就是FBS质控的重要体现。在COA中,常规的检测指标包括内有害元素、总蛋白、细菌、病毒等,例如我国药典规定,FBS中内有害元素含量应≤10EU/mL,另外总蛋白为30-50mg/mL、血红蛋白检测不高于30mg/dL。虽然胎牛血清与新生牛血清的成分并不存在很大的差别,可是诸如促细胞生长因子和促贴附因子等组份并不相同。建德RPMI 1640 Medium (含双抗)
胎牛血清还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分更少。建德RPMI 1640 Medium (含双抗)
活性炭处理胎牛血清的应用:活性炭处理胎牛血清主要用于受体研究和雌元素相关的细胞研究实验。同时活性炭处理胎牛血清极大的降低了多种元素和生长因子,减少了影响细胞生化分析的干扰因子。性炭处理胎牛血清减少了血清中的类固醇类化合物,3x100nm无菌过滤内有害元素≤10EU/mL,血红素≤20mg/dL。胎牛血清是一种性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。显然,胎牛血清是品质更高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分更少。建德RPMI 1640 Medium (含双抗)
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