金华DMEM (High Glucose)

胎牛血清使用中的常见问题：血清中包含絮状沉淀，它们是什么，怎么处理?沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性，不会影响产品性质。要除去沉淀，离心血清(400g，1-2分钟)或者简单的让其沉淀在瓶子底部，将血清小心的转移到另一个无菌瓶里(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀，因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以，使用产品时要摇动并加热血清至37℃，沉淀会自然消失。实验室如何选择适合的血清?国内一致认为HYCLONE的血清是更好的，但是根据我在北美的经历，国外一般认为GIBCO比HYCLONE好，所以并不是价格决定质量，但是总的来说这两种价格普遍偏贵，一般不是太娇气的细胞，国产的就够用了。此外，由于国内HYCLONE，GIBCO并没有生产线，我们只能从代理商那里买，而代理商又鱼龙混杂，所以买到假货的可能性也很大。胎牛血清是营养和能量来源；生长和粘附因子；肽和类固醇元素；载体蛋白。金华DMEM (High Glucose)

胎牛血清都有哪些重要的指标：总蛋白含量，胎牛血清的总蛋白含量一般范围是30-40mg/ml，数值偏高，说明采集血液的牛龄偏大，不是胎牛；数值偏低，表明血清可能掺水了。pH值，根据药典，胎牛血清的pH值在7.0-8.0之间，并没有什么具体依据把进口血清和国产血清用7.5这个分界线界定。渗透压，胎牛血清渗透压的检测一般采用冰点法，渗透压摩尔浓度（mOsmol/kg）：280-360之间。微生物，包括细菌、霉菌、支原体、噬菌体等。随着各个品牌血清生产条件的改善提高，细菌、霉菌等“大型”微生物几乎能100%控制。支原体通过0.1um3次无菌过滤去除。关于噬菌体主要是生产环境过程中带入，又无法过滤，很难彻底清理，但对血清质量影响不大，不过对于工业生产的客户来说，往往会采用γ照射的胎牛血清来避免噬菌体。温州胎牛血清胎牛血清全程冷链运输，无冻融现象。

活性炭处理胎牛血清的应用：活性炭处理胎牛血清主要用于受体研究和雌元素相关的细胞研究实验。同时活性炭处理胎牛血清极大的降低了多种元素和生长因子，减少了影响细胞生化分析的干扰因子。性炭处理胎牛血清减少了血清中的类固醇类化合物，3x100nm无菌过滤内有害元素≤10EU/mL，血红素≤20mg/dL。胎牛血清是一种性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛；新牛血清取自出生24小时之内的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。显然，胎牛血清是品质更高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分更少。

胎牛血清、新生牛血清、小牛血清区别三者之间的区别：1、采集血液时间不同，胎牛血清（FetalBovineSerum）是在母牛怀孕5-8个月时，通过胎牛心脏穿刺采集血液获取的血清。新生牛血清（NewbornCalfSerum）是来自刚出生~出生后2周内的新生牛静脉取血。小牛血清（CalfSerum）采自出生后2周至1年内的小牛静脉取血。2、组份与比例不同，两者所含的促细胞生长因子、促贴附因子、元素及其他活性物质等组份与比例不同。胎牛血清尤其含有胚胎发育所必需的生长因子。一些生长因子到胎牛10个月时就消失了。用途与用法不同，某些细胞必需胎牛血清才能生长，而有些细胞只需小牛血清即可。使用浓度一般在5%-10%，有特殊要求的浓度在20%。胎牛血清可以提供细胞生长所需的天然元素或天然的生长因子。

血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成分虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、元素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。牛血清是细胞培养中用量更大的天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成分，常用于动物细胞的体外培养，具有极为重要的功能。1.提供对维持细胞指数生长的元素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。2.提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他元素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到消毒作用。4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。胎牛血清免受蛋白酶、毒性物质、PH值波动、机械剪切力、氧化及自由基的损伤。McCoy's 5A培养基现货

胎牛血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃至-70℃低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。金华DMEM (High Glucose)

胎牛血清给细胞提供的益处主要体现在6个方面：1、提供细胞生长所需的天然元素或天然的生长因子。2、提供天然的结合蛋白，能识别氨基酸、脂质、金属离子和元素等，能结合并调节它们的活性。已知清蛋白(albumin）即具有上述功能，并对细胞代谢、生物合成、增殖和存活具有潜在的影响。又如胎牛血清中富含胎球蛋白（Fetuin），具有多个钙离子结合位点，因而能调节和维持血清中的钙离子浓度。3、天然含有粘附蛋白等细胞外基质成分，促进细胞的附着、铺展。4、提供消毒功能。这主要通过血清中的某些蛋白与有毒的金属离子结合来完成的。如金属硫蛋白，对多种重金属有高度亲和性，并可清理细胞生长环境中的氧自由基（·O），具有很强的抗氧化活性，可防止细胞衰老。5、提供酸碱度缓冲的作用，以及维持渗透压。6、提供蛋白酶抑制剂，使细胞免受蛋白酶的损伤。因此在细胞消化时，常用含血清的培养液终止胰酶对细胞的作用。金华DMEM (High Glucose)

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