●原因:①组织脱水,透明不够。②浸蜡时间过长、浸蜡温度过高。③组织脱出是由于脱水、透明时间不够,或组织中含有乙醇等,石蜡不易渗入组织中故导致石蜡与组织分离。④二甲苯使用时间过久。●解决方法:①必须按组织大小厚薄选择脱水、透明时间。②依组织的性质和结构特点确定浸蜡时间、控制包埋温度。一般这种情况难以补救。③脱水,透明渗蜡不够,应重新熔化,退回入二甲苯和酒精,再进行渗蜡包埋。④更换二甲苯。2.切片皱褶太多且不能完全展开●原因:①石蜡太软或室温过高。②切片刀上粘有残余的石蜡,刀口不干净。③组织浸蜡时间不够或脱水、透明不够。④切片刀不锋利。●解决方法:①可将蜡块放入冰箱中冰冻后切片。并在切片时一边切片一边用冰块冰冻或换蜡。如室温过高,可开空调降低室温。②切片刀不干净,可用棉花沾少许二甲苯将刀口拭干净。③组织浸蜡不够,可重复浸蜡过程。④将切片刀磨锐利再行切片。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。病理实验外包检测,动物模型 - 南京英瀚斯生物提供小鼠模型.**模型.病理实验外包检测。福建专门做病理实验外包服务
病理实验外包,病理染色切片常见问题及解决方法:1.切片弯曲且不能形成直带●原因:①蜡块上下或左右两边不平行。②蜡块与切片刀刀口不平行。③组织块外形不整齐。④切片刀各处的锋利程度不一致。●解决方法:①将蜡块四边反复修平对称。②调节蜡块夹持器,使其与切片刀平行。③修整组织块时,注意修切整齐。④移动切片刀,更换刀口位置。2.切片上出现裂纹●原因:①切片刀上有小缺口,或刀口不平整。②组织中可能含有较硬之物质,如固定液之结晶石灰质。③包埋时石蜡冻结太慢。●解决方法:①切片刀某处有缺口,可调换刀口部位或重新磨刀。刀口上缺口过多且不平整,可先将刀锋垂直在磨刀石上轻轻磨数次,然后按常规磨刀田。②组织中硬性物质太多,则不宜用。③纠正包埋时的缺点。一般待蜡块周围凝结一层,即可放入冷水中。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。上海组织病理实验外包公司病理实验外包检测,经验丰富,操作熟练。
病理实验外包常见染色介绍Warthin-Starry银染:Warthin-Starry银染染色原理在于螺旋体表面的黏蛋白与银结合,呈黑色。染色结果:菌丝及颗粒呈黑色,背景呈黄色。银染一种是检测聚丙烯酰胺凝胶中蛋白质的方法,其原理是银离子在碱性pH环境下被还原成金属银,沉淀在蛋白质的表面上显色。银染的方法种类很多,有文献报道的就有100多种。但是其准确的染色机制还不是特别地清楚。由于银染的灵敏度很高,可染出胶上低于1ng的蛋白质点,故普遍地用在2D凝胶分析上,及极低蛋白含量测定的垂直凝胶中。主要是用于垂直凝胶电泳中低丰度蛋白的检测,如内源性GST-Pulldown、Co-IP等实验中相互作用蛋白的研究。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。
病理实验外包,样品保存和寄送注意事项一、取材注意事项1.取材动作要迅速,不宜作太久的拖延以免组织细胞的成分、结构等发生变化。2.切片材料应根据需要观察的部位进行选择,尽可能不要损伤所需要的部分。二、固定注意事项1.一般固定液,都以新配为好,配好后应贮存在阴凉处,不宜放在日光下,以免引起化学变化,失去固定作用。2.有些混合固定液的成份之间会发生氧化还原作用,一定要在使用前才混合,如果混合太早,固定时就没有作用了。3.固定材料时,固定液必须充足,一般为材料块的20~30倍,有些水分多的材料,中间应更换1~2次新液。4.材料固定完毕后,保存于严密紧塞或加盖的容器里,同时在容器外上标签,并随同材料在溶液中投入相应的标签,以免相互混淆。标签上注明固定液、材料来源、日期等。标签上的文字,应用黑色铅笔或绘图黑墨水书写。南京实验医学平台一站式病理实验外包检测平台。
病理实验外包,病理染色常见染色介绍油红O染色:油红O脂肪染色法是指在日常病理诊断和科研工作中为了显示组织内的脂肪常采用油红O进行染色的方法,油红O为脂溶性染料,在脂肪内能高度溶解,可特异性的使组织内甘油三酯等中性脂肪着色。肝细胞内的脂肪滴呈红色,细胞核呈蓝色1.标本人或动物的肝组织等,甲醛—钙液固定,冰冻切片,厚10μm。2.改良的油红O染色液油红O0.5g,50%乙醇100ml。将油红O溶于乙醇内,且不断搅拌至完全溶解即可。配制好的染液置磨口瓶内保存备用。3.染色步骤①切片干燥后入50%乙醇稍洗;②油红O乙醇染液作用8min;③50%乙醇分化,自来水终止分化;④苏木素复染核,自来水返蓝,甘油明胶封片。揭开病理实验外包神秘面纱,南京英瀚斯生物。浙江病理实验外包服务
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病理实验外包,病理染色网状纤维染色Gordon-Sweets银氨染色法黑色:网状纤维红色:胞核(核固红复染)黄棕色:胶原纤维淡红色:细胞质(红液复染)弹性纤维染色Gomori醛复红染色法*甲醛生理盐水液固定的染色效果比较好显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法蓝绿色:弹性纤维红色:胶原纤维黄色:背景糖类染色过碘酸-Schiff(PAS)染色法红色:糖原及其他PAS反应阳性物质蓝色:细胞核南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。英瀚斯生物细胞实验外包。福建专门做病理实验外包服务
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