微小RNA(miRNA)和细胞外囊泡中包含的其他成分可能反映疾病的存在。特发性肺纤维化(IPF)患者的肺组织、痰液和血清显示出miRNA表达的改变。我们设计这项研究是为了测试来自IPF个体的尿液和/或组织来源的外泌体miRNA是否携带可促进纤维化的物质。从尿液(U-IPFexo)、肺组织肌成纤维细胞(MF-IPFexo)、患有IPF的个体(n=16)和年龄/性别匹配的无肺病对照(n=10)的血清中分离外泌体。我们分析了分离的外泌体的microRNA表达及其体内生物分布。我们研究了对离体皮肤伤口愈合和体内小鼠肺模型的影响。U-IPFexo或MF-IPFexo表达miR-let-7d、miR-29a-5p、miR-181b-3p和miR-199a-3p,这与之前关于从IPF患者的肺组织/血清中获得的miRNA表达的报道一致。体内生物分布实验在静脉输注后5分钟内检测到正常C57Bl6小鼠肺部的生物发光外泌体,随后分布到其他organ,无论外泌体来源如何。在肺泡上皮I型和II型细胞中观察到用金纳米粒子标记并通过透射电子显微镜成像的外泌体。用U-IPFexo或MF-IPFexo处理非纤维化肺获得的人和小鼠肺穿孔产生纤维化表型。在人体离体皮肤模型和体内肺模型中也诱导了纤维化表型。我们的结果提供了IPF系统特征的证据,即从纤维化来源获得的外泌体含有促纤维化miRNA。 miR-155可分泌至外泌体中介导邻近胰腺ai细胞的吉西他滨耐药,是潜在的胰腺ai化疗疗效预测因子。湖南动物组织外泌体提取
外泌体(exosome)堪称一位“亦正亦邪”的“多面手”,疾病的发生fa展离不开它,免疫作用离不开它,疫苗也可以用到它,疾病诊断有时也需要它,并且更多外泌体做的“坏事”和“好事”还在被不断发现,更多外泌体的作用也在不断被发掘。醉近的研究表明了外泌体作为无细胞诊疗的潜在用途,这可能为解决临床中的疑难问题提供新的策略。外泌体(exosome)是由细胞内多泡体(multivesicularbody,MVB)与细胞膜融合后,释放到细胞外基质中的膜性囊泡,可以运输丰富的蛋白质、脂质、DNA和RNA等物质。越来越多的研究表明,外泌体在细胞间远距离通讯中起着至关重要的作用,因为它们可以通过循环系统到达其他细胞与组织,产生远程调控作用。因此,人们对外泌体的功能及其作为小分子诊疗载体的潜在应用产生了极大的兴趣。 黑龙江水果外泌体鉴定透射电子显微镜分辨率可达0.1-0.2 nm,可将被观察物放大数百万倍,是外泌体双层囊膜结构观测的经典方法。
年龄相关性黄斑变性(AMD)是失明的主要原因。视力丧失是由视网膜色素上皮细胞(RPE)和光感受器萎缩和/或视网膜和脉络膜血管生成引起的。近日,JEV杂志上的一篇报道使用具有补体因子HY402H高风险多态性的AMD患者特异性RPE细胞对外泌体、它们的载体和在疾病病理学中的作用进行综合分析。研究表明AMD RPE的特点是增强的极化外泌体分泌。多组学分析表明,AMD RPE EV携带RNA、蛋白质和脂质,它们介导关键的AMD特征,包括氧化应激、细胞骨架功能障碍、血管生成和玻璃膜疣积聚。
研究认为,在外泌体中可以发现少量的DNA,这种DNA可以对检测血清外泌体中CA相关突变有价值,外泌体中特定的miRNA或miRNA组可能在CA的检测中提供诊断或预后潜力。外泌体中的致ai和抑aimiRNA可能具有较高的诊断价值,因为它们在ai细胞和正常细胞之间的差异表达,可能增强它们在早期诊断中的有用性,致aiKras被报道在外泌体中差异富集miR-100,循环中外泌体miR-21升高与胶质母细胞瘤和胰腺ai、结直肠ai、结肠ai、肝ai、乳腺ai、卵巢ai和食管ai相关,尿源性外泌体miR-21升高与膀胱ai和前列腺ai相关。其他与多种CA类型相关的外泌体致aimicroRNA包括miR-155、miR-17-92簇和miR-1246。在脑、胰腺、结直肠、结肠、肝脏、乳腺、前列腺和食管ai;口腔鳞状细胞ai;以及淋巴瘤和白血病中观察到上调。tumour抑制miRNA,包括miR-146a和miR-34a,与肝脏、乳腺、结肠、胰腺和血液恶性tumour相关。 中流细胞来源的外泌体能促进中流的转移。
外泌体是磷脂双层囊泡,可以由大多数的细胞产生,包括B细胞、T细胞、树突状细胞(DC)、巨噬细胞、神经元、胶质细胞、大多数肿瘤细胞系和干细胞等。外泌体的粒径在40到120纳米之间。作为胞外小泡的一种,当多泡体与质膜融合时,外泌体被分泌到细胞外。醉近,越来越多的证据表明,在生物体内遗传物质转移的自然途径中,外泌体可以在细胞之间传递丰富的物质。外泌体输送到受体细胞是介导细胞行为变化的关键步骤。此外,它们在细胞间通讯中也发挥着重要作用。由于这些特性,外泌体被用作药物和基因递送的载体。外泌体:细胞间的转运体醉早外泌体被认为是细胞的“垃圾袋”,让细胞摆脱一些无用蛋白,但近数年研究中发现,外泌体所携带的的“货物”具有重要的生物学意义。外泌体具有多种生物学功能,包括T细胞的抗原呈递和细胞因子转运。 外泌体可携带蛋白质、脂类、核酸(miRNAs,ncRNAs)等多种生物功能大分子。湖南动物组织外泌体提取
外泌体被工程化改造后,具有靶向特定细胞类型或组织的功能。湖南动物组织外泌体提取
细胞外囊泡(EV)是纳米级颗粒,在临床领域具有巨大潜力,因为它们的生物分子特征是用于CA诊断和预后的非侵入性液体活检的关键。EVs存在于大多数体液中,因此很容易从患者身上获得,优于传统的侵入性组织活检和成像技术。然而,有一些限制因素阻碍了EV的临床使用。EV生物标志物从“实验台到床边”的转化受到目前在实验室中实施的EV分离和随后的生物标志物检测方法的阻碍。尽管目前的纯化和检测方法是有效的,但它们缺乏实用性,因为它们需要高体液量、设备可用性低、周转时间慢和成本高。对克服这些限制的技术的高需求导致了纳米技术设备的重大进步。这些设备旨在将EV分离和生物标志物检测集成到从体液中直接检测EV的一步法中。这为EV加速进入当前临床标准提供了希望。这篇综述强调了EV作为CA生物标志物的重要性、临床研究目前面临的方法学障碍以及新型纳米设备如何促进临床转化。 湖南动物组织外泌体提取
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