mRNA也可以作为“货物”被外泌体运输。利用多泡体(含外泌体)负载mRNA/蛋白进行中流zhiliao的研究。研究者们利用脂质体2000或病毒载体对HEK-293细胞进行转染,使其分泌的多泡体含有mRNA/蛋白(CD-UPRTEGFP,其中CD:胞嘧啶脱氨酶;UPRT:尿嘧啶磷酸核糖转移酶;EGFP:增强型绿色荧光蛋白)。将此多泡体注射至小鼠的神经鞘瘤处,并辅助注射5氟尿嘧啶(5-FC),神经鞘瘤的增长被明显抑制。这主要是由于CD和UPRT可以将5-FC转化为5氟尿嘧啶脱氧核苷酸(5-FdUMP),而后者又是胸甘酸合成酶的抑制剂,可以抑制脱氧胸甘酸的合成,从而起到抑制DNA的合成以及促进中流细胞凋亡的效果。Saydam等的研究表明多泡体/外泌体不jin可以有效输送mRNA/蛋白质,并且句有与其他抗ai药物联合zhiliao中流的潜力。装载紫杉醇的外泌体可有效抑制胰腺ai细胞的增殖。广东细胞样本外泌体载药参考价
载药后EVs表征鉴定载药芳式或负载药物可能对EVs造成一定的影响,例如,电穿孔有引起EVs聚集或融合的风险、超声可能破坏EVs的结构、挤压可能影响EVs膜蛋白及zeta电位等。考虑到这些潜在的问题,EVs载药完成后,通常需要再次分离EVs,去除游离的药物分子,并对载有药物的EVs进行表征鉴定(如TEM、纳米流式、WB等),与载药之前进行比较,以确定载药对EVs存在的影响。比较理想的结果是,载药前后无明显差异,EVs完整性、稳定性等均处于较好状态。湖南细胞外泌体载药实验大概费用在中风大鼠中,装载丰富miR-133b的间充质干细胞外泌体能促进星形胶质细胞释放外泌体。
外泌体的小尺寸和轻微的负ZETA电位赋予了它们特殊的体内特性,如增强渗透性和保留率(EPR)。EV的免疫监测特性也引起了人们对基于免疫疗法的药物递送系统(DDSs)的极大关注。因此,从材料的角度来看,外泌体是一种自然形成的纳米载体,将功能货物包裹在磷脂双分子层囊泡中,引起了人们对生物医学应用的关注。外泌体已经证明了它们克服其他基于纳米颗粒的相关限制和不足。除了物理化学性质外,外泌体还表现出更快的内化进入细胞、更长的循环半衰期、以及与理想配体的额外功能。这些优势可以进一步扩展它们在纳米生物学和临床应用中的作用。通过外泌体传递药物的方法已经得到了很多试验,研究策略要么改变了它们的表面修饰、要么制造混合纳米囊泡。由于其纳米级尺寸,外泌体有可能改善抗ai诊治和药物输送。使用基因或非基因修饰的外泌体可以增强化疗药物的细胞毒性和靶向性。
外泌体的提取方法在外泌体载药系统中应用——聚合物沉淀法。用于分离病毒和其他的生物大分子,已有50多年历史,近几年,将其作为一种新的方法来分离外泌体。目前,市场已经有应用聚乙二醇(polyeth yleneglycol,PEG)溶液提取外泌体的试剂盒,常见的是SystemBiosciences公司的ExoQuick®和ExoQuick-TC®kits,该试剂盒操作简单不需要特殊的仪器,但是价格昂贵。提取外泌体的试剂盒主要成分是PEG8000(30%~50%),将试剂盒与体液或细胞培养液4℃孵育过夜,之后再低速离心。即可进行外泌体的提取,此方法实行起来较为简单。外泌体成分复杂,未装载药物的外泌体可能促进供体中流细胞的增殖。
PTX是一种天然的抗中流药物, 已在临床上广fan应用, 但因其句有剂量依赖性毒性、水溶性差和静脉注射zhiliao效果较差等问题限制了PTX使用。在异种中流移植的裸小鼠肺ai模型中, 使用牛奶来源的外泌体作为PTX的药物载体, 经口服给药结果显示, 负载PTX的外泌体句有良好的耐酸性和稳定性, 能明显抑制中流的生长, 并且较静脉给药明显降低了药物本身毒性与免疫反应。有实验利用超声引导巨噬细胞来源外泌体装载PTX, 发现外泌体载药组较传统给yao方式对P-gp阳性耐药细胞的细胞毒性增加了50倍以上, 对Lewis肺ai自发转移模型句有很强的杀伤作用, 说明以外泌体为载体的PTX句有改善化疗药物耐药性, 增强抗ai效果的潜能。外泌体载药系统在ai症、脑梗死和神经退行性疾病等各种疾病模型的研究中显示出理想的zhiliao效果。安徽细胞外泌体载药实验参考价格
MHS来源外泌体装载连翘苷(phil)对外泌体的特异蛋白(CD63,Alix)的表达无影响。广东细胞样本外泌体载药参考价
外泌体载药系统一直是众多研究者关注的焦点。外泌体载带药物常用的电穿孔方法,通过将外泌体、药物和电穿孔缓冲液共孵育,然后在一定条件下行电脉冲处理,后用微型挤出机挤出而实现外泌体载药。该方法成功将大分子卟啉装载入乳腺ai细胞分泌的外泌体中;有研究表明外泌体成功载带RNA药物miR一26a可用于肝aizhiliao。该方法是否可实现外泌体载带蛋白质类药物有待进一步研究。该方法可能存在破坏蛋白质的结构、影响蛋白质的活性和蛋白质装载率低等缺点,从而限制其应用。广东细胞样本外泌体载药参考价
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