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病理实验外包，病理染色HE染色常见问题：Q5：细胞核呈棕红色改变答：苏木素染液过度氧化；或苏木素染色后反蓝不足导致。应该立即更换苏木素染色液。或在流动自来水(一般自来水PH7.5-7.8)，或在稀释的氨水溶液，或在0.2%碳酸氢钠中适当浸泡，这些步骤均可一定程度地加强苏木素染色后的反蓝效果。Q6：伊红染色较淡答：伊红的PH改变了(PH可能已大于5)；或反蓝液体未漂洗干净，残留后影响胞浆嗜酸性染色；或者切片太薄并且在随后的脱水步骤停留过久。对策：检查伊红染色液PH，可采用乙酸调至4.6-5.0。根据以上提示，调整实验步骤。病理实验外包检测，免疫荧光染色，医学科研实验服务。吉林病理实验外包选择

病理实验外包，病理染色荧光原位杂交技术详细介绍1、原理FISH(fluorescenceinsituhybridization)技术是一种重要的非放射性原位杂交技术。它的基本原理是:如果被检测的染色体或DNA纤维切片上的靶DNA与所用的核酸探针是同源互补的，二者经变性-退火-复性，即可形成靶DNA与核酸探针的杂交体。将核酸探针的某一种核苷酸标记上报告分子如生物素、地高辛，可利用该报告分子与荧光素标记的特异亲和素之间的**化学反应，经荧光检测体系在镜下对待测DNA进行定性、定量或相对定位分析。2、实验流程FISH样本的制备→探针的制备→探针标记→杂交→（染色体显带）→荧光显微镜检测→结果分析。3、特点原位杂交的探针按标记分子类型分为放射性标记和非放射性标记。用同位素标记的放射性探针优势在于对制备样品的要求不高，可以通过延长曝光时间加强信号强度，故较灵敏。缺点是探针不稳定、自显影时间长、放射线的散射使得空间分辨率不高、及同位素操作较繁琐等。南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。福建组织病理实验外包实验室病理实验外包检测服务介绍，医学造模以及评价。

病理实验外包，样品保存和寄送注意事项一、取材注意事项1.取材动作要迅速，不宜作太久的拖延以免组织细胞的成分、结构等发生变化。2.切片材料应根据需要观察的部位进行选择，尽可能不要损伤所需要的部分。二、固定注意事项1.一般固定液，都以新配为好，配好后应贮存在阴凉处，不宜放在日光下，以免引起化学变化，失去固定作用。2.有些混合固定液的成份之间会发生氧化还原作用，一定要在使用前才混合，如果混合太早，固定时就没有作用了。3.固定材料时，固定液必须充足，一般为材料块的20~30倍，有些水分多的材料，中间应更换1~2次新液。4.材料固定完毕后，保存于严密紧塞或加盖的容器里，同时在容器外上标签，并随同材料在溶液中投入相应的标签，以免相互混淆。标签上注明固定液、材料来源、日期等。标签上的文字，应用黑色铅笔或绘图黑墨水书写。

病理实验外包，病理染色免疫组化染色的分类：1）按标记物质的种类，如荧光染料、放射性同位素、酶（主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶）、铁蛋白、胶体金等，可分为免疫荧光法、放射免疫法、免疫酶标法和免疫金银法等。2）按染色步骤可分为直接法（又称一步法）和间接法（二步、三步或多步法）。与直接法相比，间接法的灵敏度提高了许多。3）按结合方式可分为抗原-抗体结合，如过氧化物酶-抗过氧化物酶（***）法；亲和连接，如卵白素-生物素-过氧化物酶复合物（ABC）法、链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结（SP）法等，其中SP法是比较常用的方法；聚合物链接，如即用型二步法，此方法尤其适合于内源性生物素含量高的组织抗原检测。电镜检测，病理实验外包选南京英瀚斯。

病理实验外包，病理染色冰冻切片介绍;冰冻切片是指将组织在冷冻状态下直接用切片机切片。它实际上是以水为包埋剂，将组织进行冰冻至坚硬后切片的。在冰冻切片前组织不经过任何化学药品处理或加热过程，明显缩短了制片时间。同时，由于此法不需要经过脱水、透明和浸蜡等步骤，因而较适合于脂肪、神经组织和一些组织化学的制片，并作为快速切片的方法应用在临床诊断。一、取材应尽可能快地采取新鲜的材料，防止组织发生死后变化。二、速冻1.将组织块平放于软塑瓶盖或特制小盒内（直径约2cm）。2.如组织块小可适量加OCT包埋剂浸没组织，然后将特制小盒缓缓平放入盛有液氮的小杯内。3.当盒底部接触液氮时即开始气化沸腾，此时小盒保持原位切勿浸入液氮中，大约10~20s组织即迅速冰结成块。4在制成冻块后，即可置入恒冷箱切片机冰冻切片。5.若需要保存，应快速以铝箔或塑料薄膜封包，立即置入-80℃冰箱贮存备用。南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。专注于整体的科研项目、病理实验外包检测解决方案。吉林病理实验外包选择

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病理实验外包，南京英瀚斯可开展冰冻切片免疫荧光染色1.  冰冻切片室温晾干15 min，可用含10%正常山羊血清的PBS室温封闭切片1小时（此步可不洗）。2.  滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液（抗体的量视组织大小而定，原则是可以均匀覆盖组织面，且保证整个过程中不会使组织干涸）。3.  将切片放在加了PBS的免疫组化湿盒，室温孵育2小时或4℃过夜。4.  第二天先将湿盒放到37℃回温1 h，然后吸取片上的一抗进行回收，将切片插入到小染缸PBS冲洗。5.  滴加用PBS稀释好的二抗（避光）置于分子杂交箱中37℃孵育1小时。回收二抗，切片置于染缸内，PBS洗5 min×3次。6.  滴加DAPI工作液染核，室温10~20 min（工作浓度0.1%染色15 min）。7.  回收DAPI，滴加5-10 μl 抗荧光衰减封片剂或中性树胶，用处理干净的盖玻片封片，即可到荧光显微镜或者共聚焦显微镜下观察拍照。8.  做好的片放在切片盒内，置于4℃冰箱，可保存一周左右。吉林病理实验外包选择

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