病毒(Virus)由一种核酸分子(DNA或RNA)与蛋白质(Protein)构成或由蛋白质构成(如朊病毒)。根据遗传物质的组成,可分为单链DNA病毒(ssDNA)、双链DNA病毒(dsDNA)、单链RNA病毒(ssRNA)、双链RNA病毒(dsRNA)和蛋白质病毒(如朊病毒)。根据宿主类型的不同,可以分为噬菌体(细菌病毒)、植物病毒(烟花叶病毒)和动物病毒(如禽流感病毒、天花病毒和HIV等)。病毒全基因组测序(VirusWholeGenomeSequencing,VWGS),是指基于第二代高通量测序技术,对病毒全基因组进行测序,利用生物信息分析手段,得到病毒的全基因组序列,解析编码信息,并获得相应的变异信息。
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能实现对病毒的全基因组进行测序的技术手段:早期在高通量测序技术普及之前,对病毒的全基因组进行测序是通过非特异性扩增+克隆结合sanger测序来完成的。当物种有了参考的序列之后,可以通过特异性扩增+sanger测序获得全基因组序列。Sanger测序准确度高,读长很长,但与此同时,扩增和克隆工作费时费力,由于流程繁琐,加上快速变异导致引物无法通用,该方法对于大量基因组的测序工作而言,可操作性不强,这对于研究者一直是一个困扰。高通量测序技术正式启用之后,研究者可以将样品处理至标准浓度和体积后进行测序和分析,减少了工作量,增加了成功率。探普生物进行了大量有针对性的研发和测试,开发了全套的实验和分析流程用于对病毒的全基因组进行测序,该流程自运行以来广受研究者们好评。
一直以来,病毒基因组测序都是疾病诊断、流行病学调查和宿主-病原关系研究的重要手段。病毒的全基因组测序以及对应的生物信息学分析方法是研究病毒进化、毒力因子变异、疫病爆发之间的关系、疫病传播途径、不同遗传变异的分布模式、疫病发生地理区域的基础。与传统Sanger测序相比,NGS技术的发展使得一个小的研究小组可以拥有大量病毒株的全基因组序列,测序成本也在逐步降低。由于NGS产生的数据量非常庞大,其序列拼接难度也随之增加。而且对于低浓度高复杂度的样本,研究者除了PCR外别无他法。而PCR方法往往具有偏好性,丢失的片段将为序列组装带来非常高的失败率。对于完全未知的样本,无法通过PCR进行富集,要鉴定其种类需要调用各种方法,逐个尝试工作量之大,其效率之低,使得一个新的研究方法的出现及其必要。
对病毒全基因组进行测序,利用生物信息分析手段,得到病毒的全基因组序列。
深度测序技术对经济市场具有的影响:未来社会的创新驱动将由信息技术向心理社会健康方面转移。可以预见,全球老年化社会到来后的经济主战场将是健康行业,而以基因测序预测健康和临床准确分型的市场将会越来越大。深度测序相关的经济市场有两个方面。一是测序仪器和技术相关的市场,二是测序应用市场的竞争。一个显见的例子是,近年来深度测序技术促进了对肺病的进一步认识和分型,更多的位点突变如ALK、ERCC1、MET、PI3K、RRM1等被陆续发现,多基因检测肺病致病驱动基因对医生准确选择靶向药物十分重要。以肺病中常见的EGFR突变型为例,对于敏感性基因突变(19Del+L858R),第1代靶向药物(如易瑞沙等)可以进行良好的调整和控制;但是对于耐药性基因突变(T790M),则需要第三代靶向药物(AZD9291)才有较好的临床效果。不久的将来,病症患者将获得更具个性化的药物,从而达到准确医疗。
高通量测序能否定向检测细菌病毒等微生物?江苏全基因组二代测序上哪找
全基因组测序可以检测个体基因组中的全部遗传信息,准确性高。重庆深度测序分析诊断
对病毒的全基因组进行测序时,生物信息学分析是如何进行的?生存环境和状态决定了对病毒的全基因组进行测序的下机数据一般都伴随大量的宿主和其他微生物的数据。探普生物基于该特点,优化了自有数据库,搭载了的生物信息学分析流程,可处理复杂背景下的目标物种序列。探普生物基于该特点,优化了自有数据库,专门搭载了生物信息学分析流程,可处理复杂背景下的目标物种序列。生物信息学流程主要包括对非目标数据进行去除以及对目标序列进行筛选,高质量高完整度的序列拼接以及后续的高级分析,如SNP分析,进化分析,耐药位点分析等。在探普的流程下,可以获得完整性很高的基因组序列。
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