舟山高离心力离心管咨询

一提起蛋白质浓缩、更换缓冲液，我们都会想起超滤。这是一种我们都很熟悉的膜分离技术。它可用来分离溶液中极小的颗粒和溶解的分子。这种方法的较大特点是操作简便，只需要浓缩离心管和离心机，即可圆满完成我们的任务。与层析、透析等方法相比，超滤对被处理的分子更加温和。它不需要有机萃取，就不会导致蛋白变性。这种方法非常高效，可同时浓缩和纯化分子。操作可在低温（比如冷库）下进行。另外，快速、便宜，也是许多人青睐它的原因。浓缩离心管的操作很简单。选择适当的浓缩离心管，加入待处理的样本，按照离心管的指示进行离心操作，之后回收截留的样本。在离心力的作用下，溶液中的小分子溶质和溶剂透过超滤膜，被收集在滤过液收集瓶中，而大分子溶质被超滤膜截留在浓缩离心管中。这种分离的主要依据是分子大小，但分子形状和电荷等其他因素也会有影响。超滤离心管通常由聚碳酸酯或聚丙烯制成，具有强度高和化学惰性。舟山高离心力离心管咨询

蛋白质浓缩和替代缓冲液常用的超滤管，微孔(mwco10kd)常用的micon-ultra-15超滤管。根据靶蛋白的分子量、浓缩前的体积和浓缩的靶体积，还可提供不同尺寸和尺寸的其他类型的mwco超滤管。它可以重复使用。1。选择合适的超滤管主要考虑分子量和浓度。通常靶蛋白的分子量不应大于靶蛋白分子量的1/3。例如，当靶蛋白的分子量为35kDa时，可以选择靶蛋白分子量为10kDa的超滤管。如果靶蛋白的分子量约为10kd，则可使用分子量为3kd的超滤管。2。新购买的超滤是干燥的。使用前加入Milliq水。水的体积完全覆盖在膜上，冰浴或冰箱被预先冷却几分钟。倒出水后，可以加入蛋白质溶液。蛋白质添加量不超过管顶白线。超滤管在加入蛋白质溶液前需要在冰上预先冷却。三。平衡。宁波10K超滤离心管生产厂使用超滤离心管时应注意保持其平衡和稳定，并调整旋转参数以确保较佳效果。

当浓缩到剩下1ml时，取50ul缓冲溶液，加入10ul流穿，看有没变蓝色，以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了，将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管，用5mgml的BSA离心10min，再取流穿，跑蛋白胶或Bradford粗测，继续加入剩下的蛋白液浓缩（在冰上操作，防止蛋白受热），直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀，导致堵管。若发生沉淀，要确定沉淀的具体原因，是蛋白浓度过高还是Buffer不合适；前者可用多根超滤管同时超滤，降低浓度的办法解决，后者的方法是换不同的缓冲溶液，直到蛋白不发生沉淀为止。

离心过程中注意是否发生蛋白沉淀，导致堵管。若发生沉淀，要确定沉淀的具体原因，是蛋白浓度过高还是Buffer不合适；前者可用多根超滤管同时超滤，降低浓度的办法解决，后者的方法是换不同的缓冲溶液，直到蛋白不发生沉淀为止。用以浓缩蛋白，如果要换Buffer，在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候，轻轻加入新的Buffer（经0.22um超滤膜超滤），再浓缩至1ml左右，连续三次，之后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定，一般不多于500ul，也有浓缩至200ul以内的情况。按照每次至少10倍左右的体积浓缩算，三次达到1000倍以上，基本上可以达到换buffer的目的。超滤离心管通常有不同孔径大小的超滤膜供选择，以便过滤出不同大小范围内的目标分子。

离心管,管状试样容器，可带密封盖或压盖,是实验室里面常见的一种实验耗材，主要是配合离心机使用，即将实验液体装在其中，然后放在离心机里面离心。进口离心管按照材料分类：塑料离心管，玻璃离心管，钢制离心管，又可以分为PP、PC、PS等，根据不同需要，生产厂家会选择不同的塑料材料来进行制作。根据其大小，又分为1.5ml、2ml、5ml、10ml、15ml、50ml等，国产的离心管一般就是这几个规格，用的较多的也就是10ml和50ml的。如果您的离心机是配30ml或者其他规格的离心管时，就要考虑进口的了。另外，离心管还有圆底和尖底，以及螺旋盖和插盖之分。螺旋盖的离心管带有较精细的刻度，插盖的只有一个总体的容量标示。超滤离心管可用于分离和纯化各种大分子化合物，如蛋白质、核酸、多糖等。嘉兴蛋白分离离心管采购

使用超滤离心管时应注意避免振动或震动造成样品混乱并影响分离效果。舟山高离心力离心管咨询

离心管就是一个简单的可以承受高转速压力的管子，比如离一些样品，分离出上清沉淀。 蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管，目前较常用的就是Millipore的。目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。可重复使用，使用一次就扔掉太浪费。以下是个人总结的使用方法和注意事项。离心超滤管会有一个类似于内管和外管的两个部分，内管中是带有一定分子量的膜，当高速离心时，分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了，分子量比它大的就截留在上面(即内管中)，就是超滤的原理。超滤离心管的选择主要看你要截留那部分物质，就选择比较小分子量小的，如果你要截留26KD的，你要的超滤管就要比26小。但两者也要有一定的差距，比如，选择20-25KD之间的就不合适，因为26的也可能会出去(这是由制造工艺决定的)。所以选择20KD以下的超滤管比较合适。舟山高离心力离心管咨询

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