接种细胞:转染前,用胶原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化细胞并计数(不建议用胰酶)。调整细胞浓度,将细胞铺入细胞培养的器皿,每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到70~80%。2.准备DNA-PEI复合物:DNA、PEI试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。依据表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他适合的无蛋白培养基稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI试剂。每1μgDNA需用1.5-5μL线性PEI转染试剂(这个需要客户自行摸索配比,每一批转染试剂和每一批DNA比例可能会稍有不同)。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管,一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中(注意:请勿颠倒添加顺序)。充分混匀后,室温静置10~25min以形成DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时,请用圆底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL离心管。3.转染细胞:直接向每个孔中加入DNA-PEI复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在无血清条件下转染时,去除生长培养基,替换成无血清培养基,然后滴DNA-PEI复合物。转染1.5h后,添加½体积的包含30%血清的生长培养基。更多PEI相关产品信息,欢迎咨询上海曼博生物!PEI转染试剂的工作原理是什么呢?速溶型PEI转染试剂官方代理商
对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞,在转染前两天铺板可显著提高转入基因的表达水平。如果选择转染前两天铺板,可适当降低铺板密度,以确保转染时细胞的汇合度仍为70~80%。2.对于接触抑制敏感的细胞,可适当降低铺板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情况下,DNA-PEI复合物仍能转染细胞,但是DNA-PEI复合物必须在无蛋白存在的条件下形成。我们推荐使用Opti-MEMITM培养基以达到*转染效率。其他的无蛋白培养基则需测试与线性PEI转染试剂的兼容性。阳离子聚合物PEI转染试剂常见问题有比较好的转染试剂推荐吗?
对大多数细胞来而言,每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX转染试剂都能获得较高转染效率。使用者也可尝试每1μgDNA使用1.5~4μL体积线性PEIMAX转染试剂进行优化。PEIMAX(MW40,000)为Polysciences公司生产的化合物产品,每批产品出厂前都经过严格的检测,保证每批产品都100%合格、稳定且品质高,但由于作为转染试剂使用过程中有很多实验室因素(配置方法,PH,水纯度,称量的准度,dnaRNA纯度,细胞状态,细胞品系…)造成溶解出现问题或者转染效率出现差异,所以厂家只受理该产品纯度,分子量及重量缺失破损等相关投诉,针对极个别客户溶解问题和转染效率问题我们能友善解决。
准备DNA-PEI复合物:DNA、PEI试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。依据表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他适合的无蛋白培养基稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI试剂。每1μgDNA需用2-5μL线性PEI转染试剂。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管,一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中(注意:请勿颠倒添加顺序)。充分混匀后,室温静置10~25min以形成DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时,请用圆底聚丙烯管,例如Falcon5mL/14mL离心管。转染细胞:直接向每个孔中加入DNA-PEI复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在无血清条件下转染时,去除生长培养基,替换成无血清培养基,然后滴DNA-PEI复合物。转染3h后,添加?体积的包含30%血清的生长培养基。更多关于Polysciences产品,欢迎咨询上海曼博生物!25K和40K的PEI转染试剂有哪些区别?
对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞,在转染前两天铺板可显著提高转入基因的表达水平。如果选择转染前两天铺板,可适当降低铺板密度,以确保转染时细胞的汇合度仍为70~80%。2.对于接触抑制敏感的细胞,可适当降低铺板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情况下,DNA-PEI复合物仍能转染细胞,但是DNA-PEI复合物必须在无蛋白存在的条件下形成。我们推荐使用Opti-MEMITM培养基以达到*转染效率。其他的无蛋白培养基则需测试与线性PEI转染试剂的兼容性。更多关于PEI转染试剂相关问题,欢迎咨询上海曼博生物!PEI转染试剂有没有毒性呢?不同分子量PEI转染试剂转染步骤
Polysciences转染试剂怎么样?速溶型PEI转染试剂官方代理商
随着科学技术发展,医药冷链物流技术不断涌现,同时在我国高度重视下,冷链物流标准逐渐完善。但我国医药健康仍存在体系不完善、物流成本高和技术、设施落后的问题。在市场机遇与现存问题面前,如何把握医药健康未来发展趋势显得尤为重要。我国高度重视血小板裂解液,WB自动孵育系统,微流控器官芯片,蓝牙无线标签机的供应保证工作,推动研发和供应保证也是深化医药卫生体制改进的重要任务。医药相关部门多次发布政策文件,鼓励血小板裂解液,WB自动孵育系统,微流控器官芯片,蓝牙无线标签机的研发和生产,提高医药的供应保证能力。自2015年以来,健康科技成为医药健康有限责任公司增长**快的领域。事实上,根据硅谷银行的分析,有风投支持的健康科技行业募资次数在这段时间增长了25%,硅谷银行与其中大约40%的欧美公司进行了合作。加之生物医药科技(人体干细胞、基因诊断与zhiliao技术开发和应用除外)领域内的技术开发、自有技术转让,并提供相关的技术咨询和技术服务;计算机软件的开发、设计、制作(音像制品、电子出版物除外)、销售自产产品;实验室试剂及耗材(药品、危险品除外)、化工原料及产品(除危险化学品、监控化学品、烟花爆竹、民用baozha物、易制毒化学品)、仪器仪表、机械设备、电子设备、塑料制品、玻璃制品、办公用品、电子产品的批发、进出口、佣金代理(拍卖除外)。【依法须经批准的项目,经相关部门批准后方可开展经营活动】“两票制”压缩流通渠道层级,减少中间环节层层加价;反商业贿赂、税务改进等一系列政策的落地,迫使产业从不规范、低水平的商业化向规范的、高水平成熟的商业化进化。速溶型PEI转染试剂官方代理商
上海曼博生物医药科技有限公司坐落于自由贸易试验区达尔文路16幢104室,是集设计、开发、生产、销售、售后服务于一体,医药健康的贸易型企业。公司在行业内发展多年,持续为用户提供整套血小板裂解液,WB自动孵育系统,微流控器官芯片,蓝牙无线标签机的解决方案。公司主要产品有血小板裂解液,WB自动孵育系统,微流控器官芯片,蓝牙无线标签机等,公司工程技术人员、行政管理人员、产品制造及售后服务人员均有多年行业经验。并与上下游企业保持密切的合作关系。依托成熟的产品资源和渠道资源,向全国生产、销售血小板裂解液,WB自动孵育系统,微流控器官芯片,蓝牙无线标签机产品,经过多年的沉淀和发展已经形成了科学的管理制度、丰富的产品类型。我们本着客户满意的原则为客户提供血小板裂解液,WB自动孵育系统,微流控器官芯片,蓝牙无线标签机产品售前服务,为客户提供周到的售后服务。价格低廉优惠,服务周到,欢迎您的来电!
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【详情】细胞分盘:通过胰酶消化收集细胞,用适当的完全培养基以4×105至8×105细胞/cm2的密度平铺细胞...
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