PVDF膜即聚偏二氟乙烯膜(polyvinylidene fluoride)是蛋白质印迹法中常用的一种固相支持物。PVDF膜是疏水性的,膜孔径有大有小,随着膜孔径的不断减小,膜对低分子量的蛋白结合就越牢固。PVDF膜大于20kda的蛋白选用0.45um的膜,小于20kda的蛋白选用0.2um的膜。PVDF膜在使用时需预处理,用甲醇处理的目的是活化膜上的正电基团,使其更容易与带负电的蛋白结合。PVDF膜具有较高的机械强度,是印迹法中的理想固相支持物材料。1、水处理用PVDF膜,分为超滤膜和微滤膜两种,主要用于污水、海水淡化等的前处理,去除大分子、细菌、泥沙等杂质2、户外建筑用PVDF膜,主要用户户外建筑的玻璃、外墙、户外广告牌等的保护,主要是耐老化和耐磨功能3、电池用PVDF膜,包括在燃料电池和锂离子聚合物电池中的隔膜应用。PVDF转印膜能够保证良好的图案复现性。杭州PVDF转印膜选择
硝酸纤维素膜/PVDF膜:用于蛋白免疫印迹的固相载体有多种,硝酸纤维素膜及PVDF(聚亚乙烯双氧化物)膜较为常用。硝酸纤维素膜具有结合 能力强,膜不需要活化,背景浅,能进行多次免疫检测并且功能基团寿命长等优点,但极易破碎不易操作。PVDF膜在制备多肽供蛋白质化学分析中较为常用。它 具有较强的蛋白质结合能力和高信噪比,所以不会因为重复使用探针而使蛋白质丢失。另外,膜的开放孔结构使其更容易与被吸附的蛋白质结合。可用于Western杂交、dot/slot 杂交、蛋白质测序、以及MS分析。适用于Southern/Northern/Dot/Slot Blot/Colony Lift实验和Western、蛋白质测序以及MS分析。转印膜价格表膜材料具有长久效用和优异的稳定性。
其实我们并没有那么多选择。经过使用实践,各供应商一般都只提供两个型号,就是135s和180s。虽然看到有些厂家的产品目录上型号种类繁多,但这两个型号的定货量就占了95%以上,其他型号供货上也就远不如这两个型号来得顺利。135s一般用在双抗体夹心法,180s一般用在竞争法. 你所要做的是,先选择其中的一个型号, 然后比较不同供应商同一个型号的差异,由于前面说的添加配方与你的试验条件配合的不同,这个差异可能大也可能小。具体要根据试验结果来确定之后的选择。我个人不建议地毯式的测试不同规格/不同厂家的膜,这样成本高,成功的几率也小。
PVDF超滤膜的优点:机械强度高:机械强度决定了膜元件的膜丝坚韧程度,能够有效降低膜丝断丝的可能性,如果超滤膜断丝过多,则无法继续进行使用,必须更换新的超滤膜元件。使用寿命长:PVDF超滤膜具有优异的抗污染、抗氧化、亲水性能,能够有效防止膜元件被污染,定期进行清洗即可恢复膜元件的过滤性能,延长膜元件的使用寿命,PVDF超滤膜通常能够使用3-5年左右。过滤孔径小:PVDF超滤膜的过滤孔径通常为0.1微米,能够有效过滤水中的大分子、细菌、泥沙、微生物、胶体、硅藻等杂质,且产水质量稳定,不易被杂质污染、堵塞。产水质量好:PVDF超滤膜的产水经过0.1微米孔径过滤后,可以直接饮用,安全等级非常高,作为反渗透预处理装置时,产水可以直接进入反渗透膜。PVDF转印膜材料能够在复杂工艺和高温环境下保持稳定。
如何选择膜?经常会遇到的问题是,我是做什么项目的,我该选择那类膜?这里涉及到一个膜的分类标准问题,一个供应商可能提供这个膜是8um,但另一个供应商告诉你膜是135s的。这之间的区别与联系是什么?um指的是膜孔径,而从上面膜的生产过程,我们可以看出,膜的孔径实际上是没有办法界定的。由于干燥成型等过程的非均一,膜的孔径也是非均一的.膜孔径的说法实际上是沿用了一直以来的一个形象称呼.而以秒为单位的定义为,每4cm膜,水的层析时间是140s.该单位已经越来越被各大厂商所接受,成为了一个通用的比较标准.以下我们将采用s单位来进行交流。换算情况大致为:8um=135s;6um=180s。PVDF转印膜能够提高工业生产效率。宁波Western 印迹转印膜定做
PVDF转印膜具有良好的化学稳定性。杭州PVDF转印膜选择
安装转印槽子:将滤纸和海绵放入电印迹缓冲液中浸泡一下,依次按照海绵、滤纸、PVDF膜、凝胶、滤纸、海绵的次序将电印迹夹层装好,并放入小型电转槽中;电印迹转移:于转印条件下(50V,100-170mA)室温进行电印迹转移,转移时间一般为5-2小时(根据蛋白质具体分子量大小而定);PVDF膜染色前处理:取出PVDF膜并用去离子水漂洗,用甲醇浸泡数秒钟,然后进行染色;膜染色:染色剂30-50秒(切勿超过1分钟),50%甲醇脱色(勤换脱色液),之后用去离子水充分洗涤后晾干即可。转印膜是一种经济型选择,用于核酸和蛋白质印迹实验方案。这种硝化纤维素转印膜,是Southern、colony/plaque以及蛋白质实验方案中较初使用的膜。NC HATF所含的混合纤维素酯基质,不含在细胞生长过程中会干扰细胞壁完整性的表面活性剂。这些膜用于colony lifts。NC HAHY所含的混合纤维素酯基质,所带的表面活性剂能够增强可湿性以及转印过程中的处理能力。两种膜对核酸和蛋白质都具有高吸附容量。适用于常规转印。杭州PVDF转印膜选择
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