首先,我们分析一下液体在膜上的运动过程. 一张长度为4cm的膜, 每隔1cm做一个标记, 当液体运动过标记处时记录时间点. 那么你将会发现液体在膜上的运动是呈减速前行的. 而两张不同秒数的膜(例如135s, 180s)在同一时间标记点处的运动速度不同.这个试验用清水做不好观察,可以考虑用色素水溶液,非常明显。那么从这个试验可以看出,在通过同一T线喷点位置时, 金溶液通过的速度是快速膜大于慢速膜. 那么通过速度越快和包被在T线的物质反应时间也就越短, 读数快, 那么灵敏度也就越低. 反之, 反应时间长, 读数慢, 也就灵敏度高. 同时还有一个问题是, 反应时间越长, 发生非特异性结合的可能性就越大, 所以过长时间的反应不一定就能够真正的提升灵敏度. 所以这里就有一个读数时间/反应灵敏度/非特异性结合的均衡。膜材料易于加工和安装。杭州PVDF转印膜排行榜
随着膜孔径减小,膜的实际可用表面积递增,膜结合蛋白的量也递增. 估量表面积的参数为表面积比率(实际可用表面积与所用膜平面积的比率).另外, 膜孔径越小,层析速度也越小,那么金标复合物通过T线的时间也就越长,反应也就越充分.综合以上两点,结论为膜孔径越小灵敏度越高.但是同时也减慢了跑板速度,增加了非特异性结合的机会,也就是假阳性越高.所以要按照试验结果挑选适合实际项目的膜,找到合适的平衡点。首先,单克隆抗体与膜的结合优于多克隆抗体, 主要时由于多克隆抗体有很多不同的表面位点, 而各位点与膜的较佳结合条件都有细微的差别, 毫无疑问就增加了优化难度。其次,分子量越大,蛋白越难结合到固相材料上。广东蛋白吸附转印膜供应商PVDF转印膜采用的技术先进、工艺独特。
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其实我们并没有那么多选择。经过使用实践,各供应商一般都只提供两个型号,就是135s和180s。虽然看到有些厂家的产品目录上型号种类繁多,但这两个型号的定货量就占了95%以上,其他型号供货上也就远不如这两个型号来得顺利。135s一般用在双抗体夹心法,180s一般用在竞争法. 你所要做的是,先选择其中的一个型号, 然后比较不同供应商同一个型号的差异,由于前面说的添加配方与你的试验条件配合的不同,这个差异可能大也可能小。具体要根据试验结果来确定之后的选择。我个人不建议地毯式的测试不同规格/不同厂家的膜,这样成本高,成功的几率也小。PVDF转印膜具有良好的化学稳定性。杭州PVDF转印膜排行榜
转印膜材料涂布均匀,能够减少失误。杭州PVDF转印膜排行榜
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