一般来说,超滤的回收率可达90%以上。样本损失大多是由于滤膜表面和容器表面的非特异性吸附引起的。因此,选择口碑好、优良品质的浓缩离心管非常重要。作为过滤方面的老牌公司,提供了多种浓缩离心管,可对50 μl到60 ml的样本进行高效的浓缩和脱盐。它配备了(改良的聚醚砜)膜,确保低的非特异性吸附和高的回收率。当然,这个的前提是你选对了浓缩离心管。浓缩离心管,适合处理不同体积的样本。你可以根据你的样本量来选择。不过,如果样本浓度低体积大,可以选择较小容积的浓缩离心管多次重复加样离心。一旦样本体积确定,下一步就是选择适当的MWCO。对于蛋白质而言,建议所选滤膜的MWCO是欲截留分子大小的1/6-1/3。通常,截留孔径越小,流速越慢,但截留比例更大。使用超滤离心管时应注意遵循正确的操作流程和实验室规范,并定期进行质量控制和评估。上海30K超滤离心管咨询
离心管就是一个简单的可以承受高转速压力的管子,比如离一些样品,分离出上清沉淀。 蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管,目前较常用的就是Millipore的。目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。可重复使用,使用一次就扔掉太浪费。以下是个人总结的使用方法和注意事项。离心超滤管会有一个类似于内管和外管的两个部分,内管中是带有一定分子量的膜,当高速离心时,分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即内管中),就是超滤的原理。超滤离心管的选择主要看你要截留那部分物质,就选择比较小分子量小的,如果你要截留26KD的,你要的超滤管就要比26小。但两者也要有一定的差距,比如,选择20-25KD之间的就不合适,因为26的也可能会出去(这是由制造工艺决定的)。所以选择20KD以下的超滤管比较合适。杭州蛋白分离离心管生产公司超滤离心管可用于分离细胞培养上清中的蛋白质和小分子物质。
超滤离心管具有快速超滤功能,能够达到较高的浓缩倍数,轻松实现从稀释和复杂的混和样本中浓缩回收目的产物。垂直设计的超滤膜以及较大的有效滤膜表面积有助于快速的样本处理,获得较高样本回收率(通常>90%),并达到30倍的浓缩。产品特点:超滤离心管设计用于体外诊断,包括分析浓缩血清、尿液、脑脊液和其他体液;*内附膜可高效回收分子量范围的有效成分;*截留回收率高达80%以上;*标注浓缩量为200μl;*使用固定转子离心机时,较大处理样本量为10ml,较大RCF为5000xg;*使用吊桶式离心机时,较大处理样本量为12ml,较大RCF为4000xg;*热密封膜较大限度地减少了下游提取物;*垂直膜的设计减少浓缩所用时间(10-15分钟);*管体有带刻度印刷标识及可写入文字的白色的区域;*经过严格的泄漏测试。
实验室常用的离心管有塑料的和玻璃的,一般塑料的用得较多,因为玻璃的离心管不能用在高速或者超速离心机上。塑料的离心管又有PC (聚碳酸酯)、PE (聚乙烯)、PP(聚丙烯)等材质。PP的管子性能相对来说比较好。塑料的离心管透明或者半透明,可以直观地看到样品的离心情况,但是比较容易变形,抗有机溶剂的腐蚀性较差,所以使用寿命较短。因此,实验室一般会经常购买离心管。PC (聚碳酸酯):透明度较好,硬度大,可以高温消毒,但不耐强酸强碱以及一些有机溶剂如酒精之类。主要用于5万转以上的超高速离心。PE(聚乙烯):不透明。和丙铜、醋酸、盐酸等不反应,较为稳定,高温下容易变软。PP(聚丙烯):半透明,化学及温度稳定性较好,但是在低温下会变脆,所以在离心时不要在4℃以下。超滤离心管适用于从细胞培养基、血浆、尿液等样品中提取蛋白质、核酸、多糖等大分子化合物。
选择合适的超滤管,主要考虑MWCO和浓缩体积,较常见的是10kD。到底选择多大截留分子量比较合适呢?10kDa、 5kDa、还是30kDa?通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤 管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同,表格中有。新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。使用超滤离心管时应注意避免污染和交叉传播,并对设备进行彻底清洁消毒。成都浓缩超滤离心管使用方法
超滤离心管通常由聚碳酸酯等材料制成,可承受高速旋转和高温高压。上海30K超滤离心管咨询
超滤离心管使用注意事项:当浓缩到剩下1ml时,取50ul缓冲溶液,加入10ul流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了,将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管,用5mgml的BSA离心10min,再取流穿,跑蛋白胶或Bradford粗测,继续加入剩下的蛋白液浓缩(在冰上操作,防止蛋白受热),直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀,导致堵管。若发生沉淀,要确定沉淀的具体原因,是蛋白浓度过高还是Buffer不合适;前者可用多根超滤管同时超滤,降低浓度的办法解决,后者的方法是换不同的缓冲溶液,直到蛋白不发生沉淀为止。上海30K超滤离心管咨询
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