胎牛血清有必要做热灭活吗?实验证明,经过正确处理的热灭活胎牛血清,对于大多数的细胞而言都是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至可能因为高温处理影响了血清的质量,从而造成细胞生长速率的降低。经过热处理的血清,沉淀物的形成会明显的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此类沉淀物增加得更多,这常常会使研究者误认为是微生物的分裂扩增。因此我们建议客户,若非必须,可以不需要做热处理这一步。如此一来,不但节省客户宝贵的时间,更确保血清的质量。好的的胎牛血清是让细胞“快乐成长”的必备营养物。金华优等血清厂家
胎牛血清:胎牛血清是通过母牛剖腹产胎牛心脏密闭穿刺采的血获得的新鲜胎牛全血,经自然层析、离心后收集得到去除血细胞、纤维蛋白等成分的淡黄色透明上清液体,后经生产使用多级高置流膜过滤技术和三级0.1µm终端微滤方法处理后,常用于细胞培养相关实验。胎牛血清是细胞培养中常用的天然培养基,因为胎牛未进食过母乳,所以IgG含量低,且含有丰富的细胞生长必须的营养成份,故目前多数实验人员选择的都是胎牛血清进行动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。泰州赛业血清销售公司胎牛血清提供对维持细胞指数生长的Hormone。
胎牛血清如何采取?在牛屠宰过程中,如发现母牛怀孕,就应立即将生殖系统从尸体中分离出来,在无菌条件下从子宫中取出小牛,进行脐带打结处理,清理羊水并消毒。在胎儿两肋之间直接插入一根针头到心脏,在真空的条件下,血液通过导管被抽入无菌的血液收集袋内。在没有真空泵时,也可将血液收集袋放在胎牛身体下面,通过重力作用或按摩方式进行收集。血液收集后,放在低温条件下凝集,经过离心去掉凝集物而获得血清。胎牛血清的获得量取决于胎儿的大小和年龄。胎儿至少3个月,否则会因心脏太小而不便于操作。一个3月龄的胎儿可产生150mL的血清;6月龄和9月龄的胎儿可分别产生350mL和550mL血清。
如何挑选好的胎牛血清:好的胎牛血清是实验的成功的前提是所有实验人做细胞培养的共识,如何挑选好的胎牛血清,可以从以下几个方面着手。1.外观,好的血清应是透明清亮,土黄色或棕黄色,无沉淀或极少沉淀,比较粘稠。如发现血清浑浊,不透明,含许多沉淀物,说明血清污染或血清中的蛋白质变性;若棕红色,说明,血清中的血红蛋白含量太高,有溶血现象。2、总蛋白含量,胎牛血清一般范围是30-40mg/ml,数值偏高,说明牛龄偏大,不是胎牛;数值偏低,表明血清可能掺水了。3、血红蛋白,标准为不高于,20mg/dl,颜色越红,数值越高;反之,数值越低。4、pH国产血清,大多高于7.5,进口胎牛血清,大多低于7.5,具体原因未知,可能和牛龄有关。FBS的常见处理方法是热灭活,其中将FBS在56°C的水浴中加热30分钟,偶尔摇晃。
细胞培养用到的胎牛血清需要灭活吗:细胞培养胎牛血清是不可或缺重要培养基,胎牛血清中含有诸多细胞生长因子,维生素,氨基酸等物质。我们常会看到胎牛血清的标注上有对产品灭活也有没有灭活的,胎牛血清为什么不需要热灭活便可以使用。事实上,热灭活目的是为了去除血清中补体等对热敏感的物质,但是在胎牛血清中对补体的灭活则明显没有必要。胎牛血清中含有的C1,C6单单达成年动物血清的1-3%,而其它补体成分单单有成年动物的5-50%,至于补体的主要成分C3在胎牛血清中则几乎不能检出。细胞培养胎牛血清是不可或缺重要培养基。武汉特级血清多少钱
透析胎牛血清主要用于可能需要关注小分子浓度的特殊研究。金华优等血清厂家
胎牛血清在细胞培养中的作用:1.提供对维持细胞指数生长的Hormone,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他Hormone等,能结合或调节它们所结合的物质活力。3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到释放毒性作用。4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。5.起酸碱度缓冲液作用。6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。7.参与细胞冻存。在细胞培养中,胎牛血清加入基础培养基的浓度大多为5%~20%(常见为10%)的。具体到不同试验,应依据文献报导,或细胞类型或基础培养基的成分来确定较佳浓度。胎牛血清应在-20℃储存,运输应干冰冷链运输,避免反复冻融,确保血清中因子活性不受影响,保证血清优良品质。金华优等血清厂家
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目前大多数研究仍然使用胎牛血清作为细胞培养的重要组分。胎牛血清具有丰富的营养成分和生长因子,可以提供细胞所需的生长和增殖条件。然而,随着研究的深入,人们对胎牛血清的替代品和使用方法在不断探索和改进。未来的研究将进一步揭示胎牛血清对细胞特性和功能的影响,并寻找更好的替代品,以提高细胞培养的效果和可靠性。总之,胎牛血清作为细胞培养基的重要组分,对细胞的特性和功能具有一定的影响。尽管存在一些争议,但目前大多数研究仍然使用胎牛血清作为细胞培养的常规组分。随着研究的深入,人们对胎牛血清的替代品和使用方法在不断改进。未来的研究将进一步揭示胎牛血清对细胞特性和功能的影响,并寻找更好的替代品,以提高细胞培养的...