按用途可分:制备型离心管和分析型离心管。大量离心管(500mL、250mL)。普通离心管(50mL、15mL)。微量离心管(2mL、1.5mL、0.65mL、0.2mL) 塑料离心管,玻璃离心管,钢制离心管。1、塑料离心管。塑料离心管的优点是透明或者是半透明的,它的硬度小,可用穿刺法取出梯度。缺点是易变形,抗有机溶剂腐蚀性差,使用寿命短。塑料离心管都有管盖,它的作用是防止样品外泄,尤其是用于有放射性或强腐蚀性的样品时防止样品外泄是很重要的一点;管盖还有一个作用是防止样品挥发以及支持离心管,防止离心管变形。在挑选这一点的时候还要注意检查管盖是否严密,在试验时能否盖严,以到达倒置不漏液;我们都知道在塑料离心管中,常用材料有聚乙烯(PE),聚碳酸酯(PC),聚丙烯(PP)等,其中聚丙烯PP管性能会相对较好,所以,我们在挑选塑料离心管时尽可能的考虑聚丙烯的塑料离心管。使用超滤离心管时应注意避免过度压力造成膜堵塞或损坏,并影响实验结果。重庆3K超滤离心管生产公司
超滤作为一种膜分离技术,普遍应用于生物样品的浓缩、脱盐和缓冲液置换,其原理是溶液在力的作用下,通过超滤膜孔径的筛滤,大分子量的颗粒被截留下来,而水、溶剂和低分子量溶质则允许透过膜,从而达到浓缩、脱盐和缓冲液置换的目的,这种方法较大的特点是操作简便、快速、高效,可同时浓缩和纯化分子。如何使用超滤心离心管1. 使用角转子加到超滤装置上,较大样本量为15 毫升(Anavo Ultra-15)。2. 将带盖过滤装置放入离心机转子内; 用一个类似的装置来平衡。3. 使用定角转子时,将薄膜面板朝上定位,较大旋转 5000 xg,旋转 30 分钟。4. 为了回收浓缩的溶质,在过滤装置的底部插入一个移液管,通过左右扫动的方式将样品抽离,以保证总回收率。超滤液可贮存在离心管中。说明:为达到较佳回收率,离心后应立即取出浓缩样品。舟山3K超滤离心管选择超滤离心管可用于从血浆或尿液中提取蛋白质和核酸等大分子化合物。
注意:超滤离心管中的滤膜一旦润湿 后应避免变干。如果在预清洗后不是立即使用,则让液体保留在滤膜上,直到使用。6.使用方法:1).将超滤内管插入所提供的一个微量离心管中。2).向超滤管内管中加入不超过500 μL的样本,并盖上盖子。3).将盖好盖子的超滤管放入离心转子中,让盖子的连接带朝着转子的中间;用一个类似的超滤管平衡。4).以14,000 x g离心约10-30分钟,具体时间取决于所使用超滤管的NMWL。5).离心结束后将整个超滤管从离心机中取出,取出内管。6).为了回收浓缩后的溶质,将内管倒过来插在-个干净的微量离心管中。放在离心机中,让打开的盖子朝着转子的中间;用一个类似的超滤管进行平衡。以1 ,000 x g离心2分钟,使浓缩后的样本从超滤内管转移到收集管中。超滤液可以保存在收集管中。
超滤离心管的分子量选择:按照样品量和目标分子量选择适当的超滤离心管,为了得到较高的收率,所选滤膜的截留分子量MWCO建议选择所需截留分子大小的1/3左右,不超过目标分子量的一半。因为超滤膜上孔径是平均孔径,膜上的孔并非均匀,离心高压下也可能渗漏,因此截留孔径越小,流速越慢但截留比例更大。如果样本浓度低体积大,可选择较小容积的超滤管多次重复加样离心。如果同时需要脱盐和去除可溶小分子杂质,可将待浓缩样品稀释到超滤管较大容积再离心,重复2次可除去99%盐。避免过长时间或者过速离心,虽然优良品质的产品都有防死端设计,可避免过度离心造成膜表面干而造成不可逆吸附。超滤离心管的应用领域普遍,包括生物医学研究、制药工业、食品科学等。
超滤离心管使用方法和注意事项:1、选择合适的超滤离心管,主要考虑MWCO和浓缩体积,通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤离心管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤离心管。2、新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤离心管需要插在冰上预冷。3、质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。不同离心机的转速rpm换算成g之后,有所不同。离心机的加速度调至低档,减小对膜的压力。注意,一定要等离心机达到目的转速之后,方可离开离心机,否则离心机出问题时,无法*时间处理,后果不可预测!超滤离心管通常由聚碳酸酯等材料制成,可承受高速旋转和高温高压。重庆3K超滤离心管生产公司
超滤离心管还可以用于浓缩样品,减少其体积并提高浓度。重庆3K超滤离心管生产公司
超滤离心管关于回收率的疑问?一般对浓度大于0.1mg/ml的溶质进行回收,回收率在90%以上。通常,样品损失是由于滤膜表面和料管表面的非特异性吸附造成的。为了获得较高的回收率,所选滤膜的截留率约为目标蛋白的1/3。超滤膜是一种非对称膜,其孔径呈正态分布。在高压离心下也可能发生泄漏,在这种情况下蛋白质可能会发生变形。因此,截留孔径越小,流速越慢,但回收率会更高。浓缩过程中有蛋白质沉淀,如何处理?如果蛋白质浓缩过快或过多,都可能造成蛋白质沉淀,浓缩后的蛋白质之后浓度不宜过高;对于对浓缩速度敏感、易沉淀的蛋白质,建议改进方法如下:1)降低离心速度,2)使用截留分子量较大的超滤膜3) 吹吸浓缩管,然后离心。重庆3K超滤离心管生产公司
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