可以通过多个超滤管同时超滤来降低浓度,而后者通过改变不同的缓冲液直到没有蛋白质沉淀。用来浓缩蛋白质的。如果要更换缓冲液,当总蛋白溶液浓缩到1毫升左右时,轻轻添加一个新的缓冲液〈用0.22um超滤膜超滤后〉,然后连续浓缩到1毫升左右。浓缩液的之后体积取决于所需的蛋白质浓度,通常不超过500 ul,但也要浓缩到200 ul以下。根据每次至少10次的体积浓度计算,1000次以上的3次基本可以达到更换缓冲器的目的。提取之后浓缩蛋白的操作在冰上进行。黄色设备头(200ul)用于提取之后的蛋白质浓缩物。设备头沿设备头边缘轻轻插入。将蛋白溶液轻轻吹匀。注意不要触摸超滤膜。吸取浓缩液,一次较多吸200 ul,直至耗尽。之后留在管底的浓缩液不需要吸收,否则太困难,可能损坏超滤膜。之后,在无超滤膜的超滤管中加入milliq水,以防止超滤膜干燥。超滤离心管也可用于血清学检测和诊断,以确定人类或动物体内某些抗体的存在与否。苏州超滤离心管选择
A(聚酰胺):这种材质是PP和PE材质的聚合物,半透明,化学性质非常稳定,单不耐高温。PF(聚氟):半透明,可以低温使用,如果是-100℃-140℃下的实验环境,就可以用这种材质的离心管。CAB(醋酸丁酯纤维素):透明,可用于较稀的酸、碱、盐,以及酒精、蔗糖的梯度测定。PS(聚苯乙烯):透明,硬度大,对大多数的水溶液稳定,但是会被多种有机物腐蚀,多用于低速离心,而且一般是一次性使用。离心管分类:按材质可分:塑料离心管、玻璃离心管和不锈钢离心管等。按速度可分:低速离心管和高速离心管。按容量可分:微量离心管、小容量离心管和大容量离心管。一般称容量大于100mL的离心管为离心瓶。绍兴浓缩超滤离心管制造厂超滤离心管通常由聚碳酸酯或聚丙烯制成,具有强度高和化学惰性。
避免过度浓缩,体积越小,越容易因表面吸附而损失得率。离心后用Tips轻轻吹吸几次滤膜截留的溶液,必要时补加一定体积的缓冲液冲洗膜表面,有助于减少膜表面吸附,能提高回收率。尽量避免Tips接触膜表面。离心管是一个简单的可以承受高转速压力的管子,比如离一些样品,分离出上清沉淀。超滤离心管会有一个类似于内管和外管的两个部分,内管中是带有一定分子量的膜,当高速离心时,分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即内管中),就是超滤的原理.常用于浓缩样品。 超滤离心管通常不需要预处理即可使用,不过对于蛋白质样本处理,特别是较稀的蛋白质溶液来说(<10ug/mL),用超滤膜浓缩回收率常常是不定量的。
超滤离心管使用注意事项:(1)选择合适的超滤管。通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。2)新买来的超滤是干燥的,使用前加入超纯水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。(3)平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。不同离心机的转速 rpm换算成g之后,有所不同。离心机的加速度调至较低档,减小对膜的压力。注意,一定要等离心机达到目的转速之后,方可离开离心机,否则离心机出问题时,无法一时间处理。膜与转轴的方向根据说明书调整(角转离心机的情况是膜与轴垂直)。在实际使用中,一般转速开的比说明书里的要低,这样可以延长离心管的使用寿命。使用超滤离心管时应注意选择正确的膜孔径,以确保所需分子能通过筛选过程。
超滤离心管是否可以重复使用:离心超滤管通常不能消毒再次性使用。由于单管价格并不便宜,不少人尝试重复使用----经验是用蒸馏水清洗膜表面多次,离心一次到两次,那种可以反向离心的小管子可以加蒸馏水浸泡后反向多离心一次,会好些。可重复用于同一样品,不用时可用蒸馏水浸泡,但是要防止细菌污染。不同样品就不要混用了。有人说泡在20%酒精、1N的NaOH(氢氧化钠)中,防止长菌,而且防干,只要超滤膜侵了水,就不可以再让它干,但也有人说会破坏膜结构。反正厂家一般不支持重复用。多次重复使用会堵塞滤膜上的孔径,甚至出现漏液现象,影响实验结果。使用超滤离心管时应注意遵循正确的操作程序和安全规定,以避免意外伤害或污染。绍兴浓缩超滤离心管制造厂
超滤离心管可用于从血浆或尿液中提取蛋白质和核酸等大分子化合物。苏州超滤离心管选择
离心过程中注意是否发生蛋白沉淀,导致堵管。若发生沉淀,要确定沉淀的具体原因,是蛋白浓度过高还是Buffer不合适;前者可用多根超滤管同时超滤,降低浓度的办法解决,后者的方法是换不同的缓冲溶液,直到蛋白不发生沉淀为止。用以浓缩蛋白,如果要换Buffer,在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候,轻轻加入新的Buffer(经0.22um超滤膜超滤),再浓缩至1ml左右,连续三次,之后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定,一般不多于500ul,也有浓缩至200ul以内的情况。按照每次至少10倍左右的体积浓缩算,三次达到1000倍以上,基本上可以达到换buffer的目的。苏州超滤离心管选择
杭州迈恩科技有限公司依托可靠的品质,旗下品牌迈恩以高质量的服务获得广大受众的青睐。业务涵盖了血清移液管,格栅膜,过滤膜,滤芯等诸多领域,尤其血清移液管,格栅膜,过滤膜,滤芯中具有强劲优势,完成了一大批具特色和时代特征的医药健康项目;同时在设计原创、科技创新、标准规范等方面推动行业发展。我们在发展业务的同时,进一步推动了品牌价值完善。随着业务能力的增长,以及品牌价值的提升,也逐渐形成医药健康综合一体化能力。公司坐落于靖江街道申达路888号4幢,业务覆盖于全国多个省市和地区。持续多年业务创收,进一步为当地经济、社会协调发展做出了贡献。