可以通过多个超滤管同时超滤来降低浓度,而后者通过改变不同的缓冲液直到没有蛋白质沉淀。用来浓缩蛋白质的。如果要更换缓冲液,当总蛋白溶液浓缩到1毫升左右时,轻轻添加一个新的缓冲液〈用0.22um超滤膜超滤后〉,然后连续浓缩到1毫升左右。浓缩液的之后体积取决于所需的蛋白质浓度,通常不超过500 ul,但也要浓缩到200 ul以下。根据每次至少10次的体积浓度计算,1000次以上的3次基本可以达到更换缓冲器的目的。提取之后浓缩蛋白的操作在冰上进行。黄色设备头(200ul)用于提取之后的蛋白质浓缩物。设备头沿设备头边缘轻轻插入。将蛋白溶液轻轻吹匀。注意不要触摸超滤膜。吸取浓缩液,一次较多吸200 ul,直至耗尽。之后留在管底的浓缩液不需要吸收,否则太困难,可能损坏超滤膜。之后,在无超滤膜的超滤管中加入milliq水,以防止超滤膜干燥。超滤离心管可以用于分离各种细胞类型,并进行进一步的培养、检测和研究。重庆3K超滤离心管选择
我用的是3500g,4度离心,时间可以自己控制,取决于你之后的浓缩体积,我一般是200ul左右。千万别一下离心时间太长,不同的蛋白浓缩的速度不同,有的需要长时间离心,有的则一下子就好。当然也和你的蛋白是否比较纯,所用的是什么buffer,还有蛋白的浓度有关系。所以离心时要先短些时间观察一下你的浓缩速度,不要一下子浓缩过了,甚至形成沉淀就得不偿失了。另外其实他们的管子都设计的是一次性使用,所以如果想重复使用,不要离得速度太高,4000-4500RPM就差不多了,另外重复使用时要看看管壁上有没有裂纹,现在的管子好像不如从前的结实了。四川外泌体超滤离心管规格超滤离心管可以通过配合其他实验室设备使用,如高速冷冻机、凝胶电泳仪等来达到更好的效果。
我们面对上面客户反映的问题使用2次以上出现问题是很正常的,但是我们也不能保证客户使用5次,8次,还是更多次就一定会出现穿孔不能用,我们必须再一次强调提醒做实验的各位老师,这个超滤管必须严格按照说明书规定,一次性使用,不要重复使用,重复使用虽然有的人可以用几次,但是过滤效果已经严重影响了,效果肯定一次次的下降!你说这样过滤的样品做后续实验,那你的后续实验还可信吗?所以厂家也一再强调较好不要重复使用!另外,有的客户说自己的超滤管使用一次就碎了,这是什么原因呢?超滤管的质量问题还是离心机转速的问题呢?说到这里,我们也再一次提醒大家超滤管使用如果转速太高,离心力肯定会更大!这样不断用力磨损,很容易一次就碎了,也可能使用几次碎了!
脱盐、更换缓冲液或渗滤是从含有生物分子的溶液中去除盐分或溶剂的重要方法。盐分去除或缓冲液更换可通过超滤管来完成,具体过程是浓缩样本,弃去滤出液,然后向浓缩液中加入任何所需的溶剂,恢复到样本原先的体积。"洗出"的过程可反复进行,直到杂质的浓度被充分降低。关于超滤管的常见问题与解答:Q:超滤管的膜材质是什么?A:超滤管的膜材质为默克密理博特有的Ultracel再生纤维素膜,生产工艺严格,截留分子量明确而准, 蛋白吸附损失小。Q:如果要用超滤的方法分离两种蛋白,那么这两个蛋白的大小需要相差多少?A:按照经验,建议两个蛋白的分子量要相差 一个数量级(10倍)。超滤离心管适用于从细胞培养基、血浆、尿液等样品中提取蛋白质、核酸、多糖等大分子化合物。
以下是处理超滤管,重复利用超滤管的步骤。倒出超滤管里的水,用milliQ水轻轻润洗几次,【若管底有可见的蛋白沉淀,可以先加入水,然后用设备头吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉淀悬起,然后倒掉,不可用自来水猛冲】然后加入0.2M的NaOH溶液,室温放置20min,期间平衡超滤管。再离心10min。倒出残留的NaOH溶液,将管芯浸入MilliQ水的烧杯(1或2L)中,放置几个小时,再换新的水,放置几个小时,不断稀释NaOH浓度。50ml管和盖子用自来水洗,内壁再用MilliQ水洗干净。取出浸没的管芯,加至接近满的MilliQ水,50ml管也加满MilliQ水,将管芯慢慢放入50ml。离心管,排出部分水,然后盖上盖子,放4度保存,直到下次使用。一般来说,按照上述步骤和注意事项,每根管用三四年不会坏。超滤离心管通常被用于生物医学、制药、食品科学等领域中。四川外泌体超滤离心管规格
超滤离心管还可用于检测食品样品中的致病菌、重金属等污染物,并进行食品安全监测和控制。重庆3K超滤离心管选择
A(聚酰胺):这种材质是PP和PE材质的聚合物,半透明,化学性质非常稳定,单不耐高温。PF(聚氟):半透明,可以低温使用,如果是-100℃-140℃下的实验环境,就可以用这种材质的离心管。CAB(醋酸丁酯纤维素):透明,可用于较稀的酸、碱、盐,以及酒精、蔗糖的梯度测定。PS(聚苯乙烯):透明,硬度大,对大多数的水溶液稳定,但是会被多种有机物腐蚀,多用于低速离心,而且一般是一次性使用。离心管分类:按材质可分:塑料离心管、玻璃离心管和不锈钢离心管等。按速度可分:低速离心管和高速离心管。按容量可分:微量离心管、小容量离心管和大容量离心管。一般称容量大于100mL的离心管为离心瓶。重庆3K超滤离心管选择