蛋白质浓缩和替代缓冲液常用的超滤管,微孔(mwco10kd)常用的micon-ultra-15超滤管。根据靶蛋白的分子量、浓缩前的体积和浓缩的靶体积,还可提供不同尺寸和尺寸的其他类型的mwco超滤管。它可以重复使用。1。选择合适的超滤管主要考虑分子量和浓度。通常靶蛋白的分子量不应大于靶蛋白分子量的1/3。例如,当靶蛋白的分子量为35kDa时,可以选择靶蛋白分子量为10kDa的超滤管。如果靶蛋白的分子量约为10kd,则可使用分子量为3kd的超滤管。2。新购买的超滤是干燥的。使用前加入Milliq水。水的体积完全覆盖在膜上,冰浴或冰箱被预先冷却几分钟。倒出水后,可以加入蛋白质溶液。蛋白质添加量不超过管顶白线。超滤管在加入蛋白质溶液前需要在冰上预先冷却。三。平衡。超滤离心管还可以用于检测样品中的微生物或细胞,并进行分析和研究。温州10K超滤离心管公司
超滤管,即超滤离心管,是生物、化学实验室非常重要的分离装置。超滤管可以去除蛋白质及大分子杂质,经常用于蛋白浓缩和更换缓冲液的操作,超滤是实验室常用的分离技术,是一种加压膜分离技术,膜孔径介于微滤和反渗透之间,通过膜表面的微孔结构对物质进行选择性分离。在一定压力下,小分子物质可穿过一定孔径的特制薄膜,而大分子物质不能透过,从而将小分子与生物大分子分开,实现滤除微小固型颗粒物、大分子、病毒以及细菌等微生物的目的。超滤管一般由盖子、过滤器和离心管三个部分组成。超滤管具有快速超过滤功能,能够达到较高的浓缩系数,易于从稀释液或复杂的样本组合中进行浓缩液回收,其竖式设计以及可用的滤膜表面面积能够提供快速的样本处理速度和较高的样本回收率,并能进行80倍浓缩。温州外泌体超滤离心管使用方法使用超滤离心管时应注意保持其稳定性并避免操作失误导致实验失败或损坏设备。
超滤离心管关于回收率的疑问?一般对浓度大于0.1mg/ml的溶质进行回收,回收率在90%以上。通常,样品损失是由于滤膜表面和料管表面的非特异性吸附造成的。为了获得较高的回收率,所选滤膜的截留率约为目标蛋白的1/3。超滤膜是一种非对称膜,其孔径呈正态分布。在高压离心下也可能发生泄漏,在这种情况下蛋白质可能会发生变形。因此,截留孔径越小,流速越慢,但回收率会更高。浓缩过程中有蛋白质沉淀,如何处理?如果蛋白质浓缩过快或过多,都可能造成蛋白质沉淀,浓缩后的蛋白质之后浓度不宜过高;对于对浓缩速度敏感、易沉淀的蛋白质,建议改进方法如下:1)降低离心速度,2)使用截留分子量较大的超滤膜3) 吹吸浓缩管,然后离心。
质量和重心都应该平衡。注意速度和加速度不要太快,否则会直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心预冷至4度〉。膜和旋转轴的方向根据说明进行调整(对于角向离心机,膜垂直于轴〉。在实际应用中,一般的速度开度比手动低,可以延长离心管的使用寿命。4。当浓缩到剩余的1毫升时,取中国产的504.1l布拉德福德溶液,加104 l流过,看是否变蓝,以判断ur管是否漏蛋白。如果管道泄漏,重新倒入上层,然后流过新管道开始超滤。为了准确确定管道是否泄漏,用5 mg/ml BSA离心10分钟,然后将其穿过,大致运行胶水或Bradf ord,继续添加剩余的蛋白质溶液以浓缩(在冰上操作以防止蛋白质加热〉,直到所有浓缩物都添加完毕。离心过程中应注意是否有蛋白质沉淀,导致堵塞。如果发生沉淀,有必要确定沉淀的具体原因是蛋白质浓度过高还是缓冲液不当。超滤离心管还可以用于浓缩样品,减少其体积并提高浓度。
选择合适的超滤管。通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。新买来的超滤是干燥的,使用前加入超纯水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。不同离心机的转速rpm换算成g之后,有所不同。超滤离心管通常需要在低温条件下进行操作,以避免目标分子被破坏或失活。江苏浓缩超滤离心管在哪买
超滤离心管可用于从血浆或尿液中提取蛋白质和核酸等大分子化合物。温州10K超滤离心管公司
离心管定义:管状试样容器,可带密封盖或压盖。是实验室里面常见的一种实验耗材。1、按照其大小分:大量离心管(500mL、250mL);普通离心管(50mL、15mL)微量离心管(2mL、1.5mL、0.65mL、0.2mL)。2、按照底部形状分:锥形离心管,底部为锥形,是使用较多的离心管类型;平底离心管;圆底离心管。3、按照盖子闭合方式分:压盖离心管,以按压方式密封的离心管,常见于微型离心管;螺旋盖离心管,又可分为平盖(盖子顶部是平的)和塞盖(盖子顶部有塞子形状)。4、按照材料分:塑料离心管,玻璃离心管,钢制离心管。钢制离心管:钢制离心管强度大,不变形,能抗热,抗冻,抗化学腐蚀,它的应用也是相当普遍但使用时同样也应避免接触强腐蚀性的化学药品,如强酸、强碱等。尽量避免这些化学物质的腐蚀。温州10K超滤离心管公司