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原代肝细胞基本参数
  • 品牌
  • LV BioTech,立沃生物
  • 型号
  • 人,猴,大鼠,小鼠,犬,猪,牛,羊
原代肝细胞企业商机

原代肝细胞的体外培养和研究有着很大的应用范围。原代肝细胞(Primary hepatocytes)是指从动物肝脏取出后立即培养的肝细胞。原代肝细胞作为一种体外模型,具有其它体外模型不可替代的优点:1.与体内环境保持一致,酶量和辅助因子水平都是正常的生理浓度,可以在接近生理状态的的情况下研究药物的代谢和毒性;2.较好保留和维持了肝细胞的完整形态和肝细胞体外代谢活性,真实反应了体内的代谢情况。3.随着技术水平的不断提高,原代培养的动物和人肝细胞已广泛应用于药物研究:4.探讨药物在肝中的代谢途径和药物药代动力学的研究;5.评价药物和外源性物质对肝脏中细胞色素P450酶诱导作用并探讨其诱导机制;6.预测和解释药物与药物之间的相互作用;7.研究药物的细胞毒性等。因此了解或者掌握原代肝细胞体外培养和研究的相关技术对于提升相关试验的成功率非常有帮助。立沃生物的原代肝细胞配套提供液氮运输服务,以及发货细胞的定位跟踪,全力保护客户所需细胞安全。汕尾鸭原代肝细胞图片

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原代肝细胞的来源供体来源很多。鉴于人原代肝细胞存在数量稀缺和伦理道德等问题,研究人员尝试从动物肝脏中分离原代肝细胞,用来体外培养并进行研究。使用较多的是啮齿动物,还有一些哺乳动物和鱼类。目前常用的供体品系有树鼩、大小鼠、猪、新西兰兔、比格犬、猫、牛、羊、鸡、鸭、鹅、鱼等。 原代肝细胞除了供体品系不同以外,也会根据细胞来源的供体数,分为单供体和多供体。供体数的选择主要取决于实验的研究目的。 原代肝细胞的应用场景也很多。随着技术水平的不断提高,原代培养的动物和人肝细胞已广泛应用于药物研究:①探讨药物在肝中的代谢途径和药物药代动力学的研究;②预测和解释药物与药物之间的相互作用;③研究药物的细胞毒性等。河北人原代肝细胞贴壁立沃生物的原代肝细胞配套提供多种细胞培养技术支持,包括细胞培养技巧、细胞培养实验设计等。

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原代肝细胞的体外培养一直是困扰学者们开展肝病研究的难题。为了研究肝脏的生理和病理过程,学者们一直在努力开发体外培养原代肝细胞的方法。 一般来说,原代肝细胞体外培养可以维持7-14天左右,7天以后细胞的状态和活率会逐渐开始下降。 为了克服这些局限性,科学家们开始尝试将肝实质细胞和肝非实质细胞共同培养。根据邓宏魁教授的5C文章,将肝实质细胞和肝非实质细胞共同培养时,肝实质细胞和肝非实质细胞可以相互作用,形成更加复杂的细胞群体,从而更好地模拟肝脏的生理和病理过程,通过这种方法可以将原代肝细胞体外培养128天。 当然,共同培养方法也存在一些局限性,比如如何控制细胞的生长和分化、如何保持细胞的稳定性等。但是,随着技术的不断进步,相信这种方法将会越来越成熟,为研究肝脏生理和病理提供更加有效的手段。

原代肝细胞体外培养一般培养在瓶皿等容器中,根据它们是否能贴附在支持物上生长的特性,可分为悬浮型和贴壁型两大类。 原代肝细胞悬浮生长时可以呈单个细胞或细小的细胞团,胞体为圆形。其优点是在培养液中生长,生存空间大,允许长时间生长,便于大量繁殖。正常贴壁原代肝细胞具有接触抑制和密度抑制的双重特性,细胞相互接触后可抑制细胞的运动,因此细胞不会相互重叠于其上面生长。细胞生长、汇合成片后,虽发生接触抑制,但只要营养充分,仍可增殖分裂,但当细胞数量达到一定密度后,由于营养的枯竭和代谢物的影响,细胞分裂停止,称为密度抑制。 当肝细胞被分离后,可以进行悬浮培养或贴壁培养。悬浮培养的原代肝细胞在开始的4~6h内细胞色素P450酶的活性和体内一致,随时间的延长而迅速下降,故悬浮肝细胞一般用于代谢稳定性研究或代谢物谱研究。贴壁培养的原代肝细胞有足够的时间从损伤中恢复过来,保持了正常肝细胞的生物学特征及代谢活性,一般用于酶诱导研究、药物细胞毒性研究、慢代谢药物的代谢稳定性或产物推断研究。人原代肝细胞保留了细胞在体内环境里的功能与特性,是较为接近临床的一种标准体外短期培养模型。

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原代肝细胞是药物的毒性研究的重要组成部分。药物通过肝脏代谢后,大多数药物的毒性被消除,但同时也有一些无毒或低毒的物质通过生物转化后转变成有毒甚至毒性更大的物质,因此肝脏便必然成为研究药物毒性的重要target organ。原代肝细胞即为一个较好的筛选模型,尤其是在检测结构相关化合物时,原代肝细胞的角色更为重要。 人原代肝细胞是重要的体外模型。人原代肝细胞在较大程度上保留了细胞在体内organ里的功能,各种物质代谢功能和酶活性与体内的肝细胞极其相似,是较为接近临床的一种标准体外短期培养模型。人原代肝细胞通常从肝或肝组织中获得,一般在肝切除手术中或者肝移植后排斥的肝组织中获取,随后即时进行研究或者冻存待用。 原代肝细胞是肝脏疾病的研究以及相应药物的开发的重要载体。比如一些对于乙肝病毒的研究需要对肝细胞进行体外培养;一些严重肝脏疾病的细胞移植研究也要涉及到对原代肝细胞进行大量扩增。因此,原代肝细胞的体外培养和研究是一直以来科学家们关注的热点。立沃生物原代肝细胞可以用于肝脏疾病研究、药物代谢和药物毒性、筛选药物和测试药物的毒性等方面的研究。东莞鸭原代肝细胞贴壁

立沃生物的原代肝细胞可提供不同状态的细胞,如贴壁细胞、悬浮细胞等,满足客户基于使用场景的个性化需求。汕尾鸭原代肝细胞图片

解决人工肝脏合成难题,原代肝细胞是理想的肝细胞源。目前,常用的肝细胞源有人原代肝细胞、动物原代肝细胞、liver cancer细胞系HepG2、HepaRG、永生化细胞以及干细胞等。其中,人原代肝细胞是理想的肝细胞源,因为它们具有完整的肝功能和生理特性,能够更好地模拟人体肝脏的生理状态。但是,由于人原代肝细胞的获取和保存非常困难,且存在批次差异和有限的增殖能力,因此在实际应用中受到了一定的限制。 相比之下,动物原代肝细胞则具有更好的增殖能力和更便捷的获取方式,但是由于动物肝脏与人肝存在一定的差异,因此其在模拟人体肝脏生理状态方面存在一定的局限性。HepG2和HepaRG则是常用的liver cancer细胞系,它们具有较好的增殖能力和稳定性,但是存在致瘤风险,因此在临床应用中需要谨慎使用。 永生化细胞则是通过基因工程技术将原代肝细胞转化为无限增殖的细胞系,如HepG2.2.15和Huh7等。这些细胞系具有较好的增殖能力和稳定性,但是存在一定的局限性和风险。 综上所述,原代肝细胞是理想的肝细胞源,选择合适的肝细胞源需要综合考虑其功能、增殖能力、安全性等因素,以期达到想要的生物人工肝效果。汕尾鸭原代肝细胞图片

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在进行原代肝细胞培养时,选择合适的培养条件非常重要,以下是一些选择培养条件的建议:1.培养基:选择适合肝细胞生长的培养基,如William'sE培养基、RPMI1640培养基等。不同的培养基成分可能会影响肝细胞的生长和功能。2.温度和湿度:肝细胞的培养温度通常为37°C,湿度为95%左右。在培养过程中,需要保持培养箱内的温度和湿度稳定。3.氧气含量:肝细胞需要充足的氧气供应,因此需要选择透气性好的培养容器,并保持培养箱内的氧气含量充足。4.细胞密度:肝细胞的培养密度需要根据实验目的和培养条件来确定。一般来说,肝细胞的培养密度不宜过高,以免影响细胞的生长和功能。5.细胞因子:在培养过程中,...

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