病理实验外包,石蜡组织脱水注意事项1. 脱水必须在有盖的玻璃品中进行,防止吸收空气中的水分。2. 在更换高一级的脱水剂时,比较好不要移动材料以免损坏,可用吸管吸出器皿中的脱水剂,再用吸水吸尽器皿内剩余液,然后于皿中加入高一级脱水剂。3. 在低浓度酒精中,每级停留不宜太长,否则易使组织变软,助长材料的解体。4. 在高浓度或纯酒精中,每级停留的时间也不宜太长,否则会使组织变脆,影响切片。5. 如需过夜,应停留在70%酒精中。6. 脱水必须彻底,否则不易透明,甚至使透明剂内出现白色混浊现象。南京英瀚斯-病理实验外包检测-专业第三方检测机构。生物病理实验外包服务
病理实验外包,染色常见染色介绍天狼星红染色:主要由天狼星红染色液、Mayer苏木素染色液组成,主要用于各种组织病变时对胶原纤维异常或纤维增生的研究中,在普通光学显微镜下心脏血管等组织的胶原纤维被染成红色,在偏振光镜下对各种纤维化病变的分型和分级研究有一定的帮助作用。采用免疫组化技术也可显示Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维,但所用抗体昂贵,操作费时,而采用天狼星红染色试剂便宜,操作简单。天狼星红染色液操作步骤1、组织固定于10%福尔马林固定液,常规脱水包埋。2、切片厚6μm,常规脱蜡至水。3、天狼星红染色液滴染1h。4、流水稍冲洗,去除切片表面染液。5、Mayer苏木素染色液染细胞核8~10min。6、流水冲洗10min。7、常规脱水透明,中性树胶封固。天狼星红染色可用作肝纤维化以及肾纤维化模型的定性与胶原纤维沉积的半定量分析。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。湖北专业的病理实验外包推荐病理实验外包,靠谱的染色服务,快速高效实验。
病理实验外包,病理染色多聚甲醛保存组织的注意事项:多聚甲醛放置过久其中的醛基可能会被氧化为酸,使溶液pH降低,从而影响染色。不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同,应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。多聚甲醛虽然作用温和,但能硬化组织,固定时间过久会导致组织变脆,切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过24小时。多聚甲醛可长期存在于固定过的细胞或组织样品中,固定完成后用适当的洗涤液或水冲洗数小时仍会有残留,因此后续实验结果如果受醛基影响,须尽量洗去残留的多聚甲醛。醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或完全掩盖某些抗原决定簇,使之不能充分暴露,可造成假阴性的染色,影响免疫组化结果。因此,4%多聚甲醛固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时,有时需要对抗原先进行修复,然后才能进行免疫染色等后续操作。
病理实验外包,病理染色肌肉组织染色1.横纹肌组织染色Mallory磷钨酸苏木精染色法(PTAH)蓝色:胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、横纹肌黄色或枚红色:胶原纤维、网状纤维软骨基质、骨微紫色:粗弹性纤维(有时)紫蓝色或棕黄色:缺血缺氧早期病变的心肌2.早期心肌病变组织染色(1)Nagar-Olsen染色法(1974年)红色:缺氧心肌、红细胞黄色或黄棕色:正常心肌蓝色:细胞核(2)Poley显示缺氧心肌染色法(1964年)红色:缺氧心肌紫色:胞核绿色:其他组织南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。病理实验外包检测,一站式生物病理实验外包检测平台。
病理实验外包,冰冻切片取样实验步骤:一、取材应尽可能快地采取新鲜的材料,防止组织发生死后变化。二、速冻1.将组织块平放于软塑瓶盖或特制小盒内(直径约2cm)。2.如组织块小可适量加OCT包埋剂浸没组织,然后将特制小盒缓缓平放入盛有液氮的小杯内。3.当盒底部接触液氮时即开始气化沸腾,此时小盒保持原位切勿浸入液氮中,大约10~20s组织即迅速冰结成块。4在制成冻块后,即可置入恒冷箱切片机冰冻切片。5.若需要保存,应快速以铝箔或塑料薄膜封包,立即置入-80℃冰箱贮存备用。三、固定1.样品托上涂一层OCT包埋胶,将速冻组织置于其上,4℃冰箱预冷5~10min让OCT胶浸透组织。2.取下组织置于锡箔或者玻片上,样品托速冻。3.组织置于样品托上,其上再添一层OCT胶,以完全覆盖为宜,速冻架(PE)上30min。病理实验外包检测,经验丰富,操作熟练。海南专门做病理实验外包检测
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病理实验外包,病理染色HE染色常见问题:Q1:HE染色比较常见的红蓝失调答:(1)偏蓝色:苏木素染色过深,分化不够;伊红试剂过期;伊红染色时间太短,分化过度。(2)偏红色:苏木素染色过浅,分化过度;组织固定不佳,细胞核不着色;脱蜡不彻底,苏木素染不上;苏木素氧化成熟不够;伊红染色过深,分化不足。Q2:HE染色后出现的大白色斑块或斑点答:脱蜡前烤片温度偏低,时间过短,蜡未完全融化;切片在脱蜡溶剂中停留时间过短;脱蜡溶剂使用太久,得更新。生物病理实验外包服务