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生物缓冲剂在生物化学研究中有着重要的意义,在免疫印迹、生物芯片及生物杂交等实验及体外诊断、生物医药等行业中的应用非常***。生物缓冲剂系统包含几十个品种。典型品种如注射级氨丁三醇、HEPES等。本文将介绍其中**常见的品种——注射级氨丁三醇缓冲剂的优点及使用注意事项。
注射级氨丁三醇缓冲液优点如下:1.Tris碱的碱性较强,所以可以只用这一种缓冲体系配制pH范围由酸性到碱性的大范围pH值的缓冲液,应用范围广;2.Tris缓冲液对生物化学过程干扰很小,不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀;3.Tris在水中溶解度高,对很多酶的反应是惰性的;4.Tris缓冲能力高,在pH7.5-9.0之间有较强的缓冲能力;5.Tris缓冲剂应用***,在生物化学、分子生物学、体外诊断、化妆品、涂料等领域发挥重要作用。 安徽磷霉素氨丁三醇颗粒艾伟拓药用级氨丁三醇购买。
使用注射级氨丁三醇缓冲剂的注意事项:1.注射级氨丁三醇缓冲液的pH值受温度影响大,△pKa/℃=-0.031,例如:4℃时缓冲液的pH=8.4,则37℃时的pH=7.4,所以一定要在使用温度下进行配制,室温下配制的Tris-HCl缓冲液不能用于0℃~4℃。2.注射级氨丁三醇缓冲液的pH值受溶液浓度影响较大,缓冲液稀释十倍,pH值的变化大于0.13.Tris在一定程度上与各种分子反应,包括RNA酶抑制剂,醛,酶,DNA以及常见金属如Cr3+,Fe3+,Ni2+,Co2+和Cu2+等,在有些系统中会起抑制作用,在配制过程中需考虑与其他组分之间的相互作用;4.注射级氨丁三醇缓冲液易吸收空气中的CO2,配制的缓冲液要注意盖严密封;5.注射级氨丁三醇缓冲液对某些pH电极发生一定的干扰作用,需使用与注射级氨丁三醇溶液具有兼容性的电极;6.注射级氨丁三醇缓冲液不适用于二喹啉甲酸(BCA)测定;7.吸入,摄入,皮肤吸收注射级氨丁三醇可造成伤害,操作时需戴好手套和护目镜;8.作为蛋白缓冲液时,若后续工作需要质谱,则不适宜用注射级氨丁三醇,比较好换成其他质谱仪可耐受的缓冲液。
缓冲液的作用
缓冲液的作用是在有限的范围内调整溶液的pH值,使待测溶液的酸度符合分析方法所规定的范围,例如,苯酚在碱性介质及铁**钾存在下,可与4-氨基安替比林反应生成橙红色的安替比林染料,为了防止芳香胺类的干扰,以pH在10士0.2时**为适宜。为此,就需要在待测溶液中加入缓冲液,调整和控制待测溶液的pH为10.0士0.2。在实际工作中,有些分析人员由于不大了解缓冲液的作用机理,当所配制和使用的缓冲溶液与规定的数值不相符时,为使缓冲溶液达到要求,就用盐酸或氢氧化钠等强酸、强碱进行调节, 以为这样做可以使缓冲溶液尽快达到所需要的pH值,然而,结果却适得其反,这样的溶液pH值虽然调对了,可是它的缓冲体系却被破坏了,也就失去了缓冲的作用。
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生物制剂领域常用缓冲液
生物制剂领域常用的缓冲液主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris(三羟甲基氨基甲烷)等系统。生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系,因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值,而是缓冲液中的某种离子。如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲剂都可能产生不需要的化学反应。(1)硼酸盐:硼酸盐与许多化合物形成复盐、如蔗糖。(2)柠檬酸盐:柠檬酸盐离子容易与钙结合,所以存在有钙离子的情况下不能使用。(3)磷酸盐:在有些实验,它是酶的抑止剂或甚至是一个代谢物,重金属易以磷酸盐的形式从溶液中沉淀出来。而且它在pH7.5以上时缓冲能力很小。
氨丁三醇(Tris)是一种广泛应用于生物医药领域的缓冲盐,化学式C4H11NO3,白色结晶颗粒,常用于蛋白或核酸缓冲液,有效范围通常是pH7.0-9.2之间。Tris被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长,Tris也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一,其在电泳缓冲液中与甘氨酸构成缓冲体系,稳定电泳过程中的pH。此外Tris还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物,Tris也被用作滴定标准物。 艾伟拓氨丁三醇如何购买?辽宁鳞霉素氨丁三醇散
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缓冲盐氨丁三醇TRIS(供注射用)的原理及应用
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