希诺神州外泌体

外泌体有很多潜在优势，但是外泌体在药物递送中的应用研究才刚刚起步，尚有许多问题需解决：如何修饰外泌体的靶向性：缺氧瘤细胞来源的外泌体倾向于向缺氧瘤组织内募集；此外，还可通过在外泌体膜表面设计与靶细胞特异性结合的抗体、配体或受体来实现。如何提高药物装载效率：目前主要有①前装载方法（首先将药物加载到母细胞中，随后外泌体形成并包裹药物分泌到细胞外，常用的方法如转染、共孵育等）；②后装载方法（直接将药物加载到外泌体中，例如孵育、电穿孔、超声、挤出、冻融循环等）；③其他装载方法（主要是通过生物工程修饰母细胞来实现）。如何实现外泌体的大量生产：目前大规模生产外泌体的方法主要是自发生产和非自发生产。外泌体的形成始于细胞内陷，成熟于多囊泡胞内体，终于膜融合。希诺神州外泌体

外泌体是细胞间信息传递的重要“信使”,可通过三种方式介导细胞通讯:(1)外泌体以旁分泌的方式与靶细胞相互作用,通过受体–配体作用黏附到靶细胞表面,随后被内吞入靶细胞,或直接将内容物释放到靶细胞内,从而激huo靶细胞;(2)外泌体的胞外膜蛋白可以被蛋白酶切割,产生的片段可以与靶细胞的细胞表面受体结合,从而激huo靶细胞;(3)外泌体还可以与靶细胞直接接触发生膜融合,导致外泌体中的蛋白和核酸非选择性转移到目标细胞,从而引起靶细胞的响应。通过介导细胞间的通讯,外泌体不jin能够参与多种生理过程,比如消除胞内陈旧分子、呈递抗原、分化调节性T淋巴细胞或髓样细胞以抑制免疫反应,而且还可以参与疾病形成的病理过程,如通过与受体细胞的相互作用传播病原物质、促进中流转移过程中的血管生长和中流细胞迁移。成都外泌体PKH26抗体亲和法和密度梯度离心法，虽然可以提取到高纯度的外泌体，但不能提取完整外泌体。

血清和血浆为常规检测样本，具有微创取样的优点，是诊断疾病的理想样本。血液中外泌体能够作为胰腺ai、胃ai、肺ai和阿尔兹海默等疾病的早期诊断和疗效评价提供潜在标志物。血液外泌体来源的疾病标志物主要包括蛋白质和miRNA两类。Melo等发现利用胰腺ai细胞外泌体表面的磷脂酰肌醇聚糖-1(GPC1)能够实现胰腺ai早期诊断，利用该方法对血清中包含GPC1的外泌体进行检测，能够高特异性(100%)、高灵敏度(100%)地区分胰腺ai患者(246例)和正常人(20例)以及慢性胰腺炎患者(37例)。

外泌体携带的与疾病进展紧密关联的分子标志物可用于疾病进展的监视、检测和诊断,是一种潜在的非侵入性生物标志物。由于外泌体本身可以作为抗原提呈小泡,且有较长的循环半衰期,可用于免疫学相关研究,同时,源自ai细胞的外泌体可以被工程化,发挥免疫刺激作用,可作为中流疫苗应用于ai症的免疫zhiliao。此外,外泌体稳定而广fan地分布在qi官和组织中,具有低免疫原性、高耐受性等特点,且良好的膜渗透性可使其通过血脑屏障,因此可用作组织和qi官特异药物输送系统,兼有高输送效率和低副作用。因此,外泌体适合用作药物载体递送zhiliao剂(如阿霉素或姜黄素),zhiliao性miRNA、siRNA等核酸和蛋白质,运送至靶位点后实现靶向zhiliao。外泌体与各种疾病的相关性被检测出，特别是血液中释放的病细胞来源的外泌体。

Exosome（外泌体）是由活细胞分泌小囊泡，具有典型的脂质双分子层结构；参与细胞之间的交流，物质的运输以及正常生理过程的维持，此外还与疾病的产生有关。对分离的外泌体进行体外标记或示踪，有助于对外泌体的功能进行进一步的研究。目前对于外泌体的标记方法有很多种，包括亲脂性的染料和膜渗透型的化合物等。PKH67的体内荧光半衰期为10-12天。相比于PKH-67，PKH-26具有更长的半衰期，标记在兔红细胞上的PKH26半衰期长达100天以上。特别适用于体外增殖研究以及长期的体内细胞跟踪研究。外泌体被认为是疾病的生物标志物和预后因子，具有重要的临床诊断和治理意义。希诺神州外泌体

有关外泌体分泌和摄取及其组成、“运载物”和相应功能的精确分子机制刚刚开始研究。希诺神州外泌体

流式细胞技术针对外泌体的表面抗原标记物进行检测，能够实现外泌体的高通量、多通道分析。但是由于外泌体的粒径小、折射率低，所以采用常规的流式细胞仪进行检测时往往需要将外泌体与beads连接以增大表面积、增强反射，操作耗时又费力。Tian等搭建了一种高灵敏度的流式细胞仪(HSFCM)，将可检测的外泌体粒径降至40nm，能够在不连接beads的情况下实现每分钟10000个外泌体的检测，并且能够结合免疫荧光的方法进行外泌体标志蛋白质的定量检测，目前该仪器已商品化。希诺神州外泌体