PCR的工作原理:在TaqDNA聚合酶(热稳定DNA聚合酶)的作用下,由一对特异性引物经热变性-退火-延伸反应,三个不同温度的循环处理使得DNA由少量扩增到多量的一种体外DNA扩增技术。在反应体系内,以一对人工合成的寡核苷酸作为扩增引物,第一步,模板DNA变性,以构成脱氧核糖核酸的四种脱氧核苷酸为底物,目的基因作为模板,在DNA聚合酶的作用下模板DNA经过80-90℃高温变性,使模板DNA双链经PCR扩增形成的双链解离成单链。第二步,模板DNA与引物退火(复性),模板DNA解离成单链后温度降至50-60℃,引物与模板DNA单链互补配对。第三步,引物的延伸,DNA模板-引物结合物在DNA聚合酶作用下,70-75℃以dNTP为反应原料半保留复制合成一条新的模板DNA链。这三个步骤为一个循环,2-4分钟即可完成一个循环,2-3小时就能使极微量的DNA、片段、甚至单拷贝基因复制到几百万倍,从而实现对靶DNA的放大。由于扩增碱基序列按照靶DNA复制,因此PCR反应具有高度特异性。巧亦捷核酸检测一体机可以为宠物PCR检测提供严谨的准确结果,为检测人员提供信心保证。多重PCR动物检疫
使用平常的抗原试纸做动物诊断常会出现误诊的情况,如用抗原试纸条对刚买的小狗带到做检测,犬瘟试纸条检测是阴性,但回家养几天后小狗开始出现打喷嚏、咳嗽等症状,此时再去做检查,犬瘟检测则变成阳性,这种情况在宠物临床上并不少见。很有可能这只小狗在第、一次检查的时候已经传染并且向外排毒了,但是由于抗原滴度低排毒量比较小,试纸条检测不出来,错失了及早诊疗的机会。另一方面,抗体检测试纸并不能及时准确知道机体是否传染这个病原,就比如现在常见的猫咪弓形虫检测,只有猫咪接触病原一段时间后,才能产生足量的抗体,抗体试纸才出现阳性结果。当这些情况发生,结果都是令人很难过的。因为这不仅*意味着后期要花更多的Money用于诊疗,还会出现诊疗困难,毛孩子们受罪,甚至会出现我们都不愿意接受的死亡。所以我们更建议使用PCR技术进行临床诊断。多重PCR分析仪PCR是可以做到病原体准确诊断的技术,与胶体金试纸及荧光定量试纸的应用场景相同。
目前,市面上的宠物用分子检测平台普遍存在操作复杂,单价偏高,灵敏度不佳等问题,巧亦捷依托于自主研发的薄膜微流控技术,经多年沉淀,研发出全自动快速核酸检测一体机及多种配套检测试剂,仪器自动进行核酸提取和PCR扩增,让使用者将样本加入薄膜囊袋中就可上机进行核酸检测,且支持多重联检功能,一次可检测多种病原体。多重宠物检测试剂除了可解决操作的复杂性问题,也由于采用常规的多重PCR策略,可大幅降低检测试剂的费用。
无论是由病毒、细菌,还是原虫、寄生虫等引起的犬猫传染性疾病都可利用巧亦捷核酸一体机进行诊断。即使存在于患犬或患猫体内极少量的病原微生物,巧亦捷核酸一体机采用的PCR技术也能对病原微生物进行上百万倍的复制,从而达到可以被检出的浓度,因此巧亦捷核酸一体机能对犬猫传染病进行准确、高效的诊。例如猫鼻气管炎是由猫疱疹病毒引起的一类猫上呼吸道疾病,当猫传染疱疹病毒后,会表现出一系列的上呼吸道症状,但临床尚未有成熟的快速检测方法,用巧亦捷核酸一体机则可以快速准确的得出结果。其实PCR在技术上仍有突破空间,巧亦捷核酸检测一体机已可以实现多重检测。
巧亦捷核酸检测一体机有以下几点优势:1)、灵敏度高,显1著缩短窗口期,解决了潜伏期检测不出的问题。由于PCR的检测域远比测试纸广,在机体带毒的早期阶段(潜伏期),虽然病毒快速繁殖,但是测试卡却无法检出,巧亦捷核酸一体机就不存在潜伏期检测不出的问题;2)、特异性好:巧亦捷使用荧光探针技术,几乎没有方法学的假阳性;可直接揭示病原体的存在;3)、检测所需样本量少:只要少量的血液(0.2cc),少量的口鼻分泌物,就可以做出多个疾病项目;4)、用于体检筛查:特别是体弱或者老年动物,定期的体检筛查显得格外的重要,使用巧亦捷核酸一体机可协助医师早期发现疾病,把疾病消灭在早期阶段,延长宠物的寿命,从而提高从宠物福利;5)、用于鉴别诊断:当临床上出现类似症状的疾病时,核酸一体机可协助医师做出准确的诊断,提高临床的诊断率和治、愈率。巧亦捷核酸一体机采用的磁珠法对样本的要求低,可有效去除污染物,避免接下来的PCR反应出现问题。宠物用PCR荧光探针法
PCR技术又可以分为定量PCR和常规PCR,定量PCR分为实时荧光定量PCR(RT-PCR)和数字PCR。多重PCR动物检疫
巧亦捷全自动核酸一体机对于动物诊疗至关重要,于临床而言更是不可或缺。对于刚接回家的小宠物或注射疫苗前的小宠物,做PCR病毒学检查至关重要,可有效地排查致命传染病,可降低刺激导致潜伏病毒的激发,大幅提高相关传染病的康复几率。核酸检查对于潜伏病毒筛查能力比胶体金试纸,提早检测到病毒至少1周左右。也可以检测到疾病康复后两周以上的病毒。也可以惊醒早期干预诊疗,让一些严重的病,康复几率极大的提高。宠物医院拥有自己的PCR的检测速度比送到专业实验室提升了好几十倍。可帮助兽医师更有效的应对发病快速、病情严重的传染病诊疗。多重PCR动物检疫