SigmaPEI转染试剂使用注意事项

PEIMAX——高产工业化转染试剂-高度浓缩，可制备大量转染试剂Polysciences转染试剂系列是基于聚乙烯亚胺（Polyethylenimine，PEI）的产品，因其较高的转染效果，已广泛应用于工业化生产。聚乙烯亚胺是一种具有较高的阳离子电荷密度的有机大分子，每相隔二个碳原子，即每“第三个原子都是质子化的氨基氮原子，使得聚合物网络在任何pH下都能充当有效的“质子海绵”(protonsponge)体。PEI可用作转染试剂，它可以缩聚DNA分子形成颗粒并转染真核细胞。PEIMAX40K是由Polysciences出品的全合成线性聚乙烯亚胺瞬时转染试剂。PEIMAX是一款高度浓缩的粉剂，大量科学家选择PEIMAX，在内部自行制备低成本高效益的PEI转染试剂。多年以来，经过众多业内人士评审的公开研究和出版文献表明，在HEK293、CHO和Sf9系统中可获得很高的转染效率，在重组抗体和病毒载体生产中稳定性高，可靠性强。PEIMAX提供从96孔板到200L生物反应器持续的高基因表达细胞体系，实现从新药研发到工业化生产的轻松过度。而且与大多数细胞转染方案相比，使用PEIMAX至少可降低40%转染成本（部分案例可降低90%转染成本）。如想申请PEI试用装，请关注我们的公众号：Mine-bio，回复关键词“PEI申请”，即可参加！Polysciences PEI转染试剂中国区代理是哪家公司？SigmaPEI转染试剂使用注意事项

材料：质粒DNA指数生长的真核细胞PEI（聚乙烯亚胺）1×HBS（pH7.4）配方：PEI储存液（100μM）：称取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS（pH7.4）中，0.2μm滤膜过滤，储存于4℃备用。1×HBS（pH7.4）：将8.76gNaCl溶解于900ml超纯水，加入20ml1M的HEPES，调pH值到7.4，定容至1L，过滤（0.2μm滤膜）后储存于4℃备用。方法：1．细胞分盘：通过胰酶消化收集细胞，用适当的完全培养基以4×105至8×105细胞/cm2的密度平铺细胞于60mm组织培养皿上（根据实验需要选择培养皿，使细胞贴壁后所占总面积达到培养皿面积的70-90％）。根据细胞贴壁情况于含5％CO2的37℃温箱中孵育8-24h,当细胞贴壁完全后即可开始转染。转染前换入2mL预热的无血清培养基。更多关于PEI转染试剂相关产品技术问题，欢迎咨询上海曼博生物。

如想申请PEI试用装，请关注我们的公众号：Mine-bio，回复关键词“PEI申请”，即可参加！ Thermo FisherPEI转染试剂官方代理商PEI转染试剂是一种高分子化学类转染试剂.

对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞，在转染前两天铺板可显著提高转入基因的表达水平。如果选择转染前两天铺板，可适当降低铺板密度，以确保转染时细胞的汇合度仍为70~80%。2.对于接触抑制敏感的细胞，可适当降低铺板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情况下，DNA-PEI复合物仍能转染细胞，但是DNA-PEI复合物必须在无蛋白存在的条件下形成。我们推荐使用Opti-MEMITM培养基以达到*转染效率。其他的无蛋白培养基则需测试与线性PEI转染试剂的兼容性。Polysciences 是一家化学品制造公司，产品广泛应用于各个科研领域。公司成立于1961年，起初为电子显微镜提供纳米级样本制备方案，帮助科学家揭示未知领域。更多关于Polysciences PEI相关产品信息，欢迎咨询上海曼博生物！也欢迎关注我们的公众号：Mine-bio，查看更多技术文章！若想申请PEI试用装，可在后台回复“PEI申请” 提交需求！

上海曼博生物医药科技有限公司始终致力于为客户提供一站式生物医药科技服务，以创新和为价值理念，通过自身研发团队，以及与国内外专业科研团队强强联合，不断创新，为生命科学和医药研发行业提供产品和服务。生物医学工程是综合应用生命科学与工程科学的原理和方法，从工程学角度在分子、细胞、组织、乃至整个人体系统多层次认识人体的结构、功能和其他生命现象，研究用于防病、治病、人体功能辅助及卫生保健的人工材料、制品、装置和系统技术的总称。近期还有PEIfree试用装申请活动，欢迎咨询上海曼博生物！关注曼博生物公众号：Mine-bio，私信回复关键词：PEI申请，即可参加试用装申请活动。有哪些品牌的PEI转染试剂？

稳定转染方法1.接种细胞：转染前，用胶原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化细胞并计数（不建议用胰酶）。调整细胞浓度，将细胞铺入细胞培养的器皿，每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到70~80%。2.准备DNA-PEI复合物：DNA、PEI试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。依据表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他适合的无蛋白培养基稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI试剂。每1μgDNA需用1.5-5μL线性PEI转染试剂(这个需要客户自行摸索配比，每一批转染试剂和每一批DNA比例可能会稍有不同）。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管，一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中（注意：请勿颠倒添加顺序）。充分混匀后，室温静置10~25min以形成DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时，请用圆底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL离心管。3.转染细胞：直接向每个孔中加入DNA-PEI复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在无血清条件下转染时，去除生长培养基，替换成无血清培养基，然后滴DNA-PEI复合物。转染1.5h后，添加½体积的包含30%血清的生长培养基。欢迎关注我们的公众号：Mine-bio ，私信回复关键词“PEI申请“即可申请PEI试用装！哪个品牌的PEI转染试剂比较好呢?无动物源成分PEI转染试剂生产商

有哪些品牌的PEI转染试剂?SigmaPEI转染试剂使用注意事项

注意事项质粒质量：请务必使用高质量转染级无内质粒（推荐使用QIAGEN或者MN公司去内质粒提取试剂盒）。通过260nm光吸收测定DNA浓度，260nm/280nm比值确定DNA纯度（比值应该在1.8~2.0的范围之内）。如有可能，请通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的完整性。细胞条件：使用适当保存和经常传代的健康细胞。确保培养基没有被细菌、或支原体污染。如果细胞是近期复苏的液氮冻存细胞，请在转染前至少传代两次。建议使用GIBCO或者78bio公司血清培养细胞。近期还有PEIfree申请活动，欢迎咨询上海曼博生物！欢迎关注我们的公众号：Mine-bio，回复关键词“申请PEI”，即可参加活动！更多关于Polysciences PEI转染试剂相关产品信息，欢迎咨询上海曼博生物！SigmaPEI转染试剂使用注意事项