获取实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型小鼠小胶质细胞,并检测其特性。方法取8周龄,雌性C57BL/6小鼠行EAE造模,待至发病高峰期(第15天)时以PBS灌注后取小鼠后脑和脊髓,切碎后加胰酶消化,消化完成后通过100μm滤网滤过,而后采用Percoll密度梯度离心法分离获取单个核细胞,进一步利用CD11b与CD45抗体染色,通过流式细胞仪分选CD11b~+CD45~(high)和CD11b~+CD45~(low)细胞,即分别得到相对活化和静息的小胶质细胞,***对流式分选获取的小胶质细胞行qPCR检测。结果通过形态比较,获得了高纯度的小胶质细胞。FIZZ-1基因行qPCR检测,结果显示在EAE急性期M2型小胶质细胞明显增多,符合文献报道。结论该方法能从EAE小鼠体内分离获取高纯度的小胶质细胞,可用于相关目的基因后续检测。EAE小鼠模型可以反映MS的很多临床特征。小鼠eae模型
EAE模型的发展与年龄密切相关。幼龄动物发病后症状很快达到高峰,随后又迅速恢复,和成年动物相比病程较短,其抗原注射部位及CNS内的炎性细胞浸润程度较轻,并且幼龄动物体重偏小,一般情况差,易出现麻醉意外而死亡。若动物体重(周龄)偏大,则发病延迟,且症状较重,所以选择受试动物以青年期为佳。但若作为抗原提供者,其年龄可适当放宽,一般大于4周即可。MS多为青年女性,EAE的发生也存在性别差异。一般来讲,雌性动物较雄性敏感,表现在雌性动物的发病率高,临床症状相对严重,如Wistar大鼠及SJL/J小鼠,但也有的动物如Lewis大鼠,雄性较雌性敏感。另外实验时间选择在夏季比冬春季节诱导动物模型的敏感性更高。敏感性高的动物,有时症状较严重且死亡率高,应引起注意。江苏大鼠eae模型怎么造模小鼠是EAE研究中常见的物种,主要是因为它们具有成本低、研究方案成熟和具有繁殖转基因品系的特点。
EAE模型是由针对CNS髓鞘发生免疫攻击的CD4+Th1细胞介导的自身免疫性疾病,抗原致敏的T细胞穿过血脑屏障进入中枢,诱发对自身髓鞘抗原的免疫应答,导致脑及脊髓的免疫损伤。EAE是人类MS的经典动物模型,通过对EAE发病机制、病情发***展规律、临床及病理改变、***及预防等方面的深入研究,能够为MS的***提供充分的实验依据。词条图册EAE发病有多种诱发因素,包括食物、药物及***等。大鼠的饲养环境级别越高,清洁度越高,接触诱发因素的几率越小,在相同条件下致敏,其发病率就越低,因此选用普通动物即可。**近有报道说明,EAE的发病还与动物的血脑屏障的形成有关。
实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)是一种以特异性致敏的CD4+T细胞介导为主的,以***系统内小血管周围出现单个核细胞浸润及髓鞘脱失为特征的自身免疫性疾病,是人类多发性硬化(MS)的理想动物模型,在临床神经免疫学的研究中具有重要意义。抗原佐剂为非特异性免疫增强剂,它可改变抗原的物理性状,延长抗原在体内的储留时间,刺激抗原提呈细胞及淋巴细胞,从而增强和扩大免疫应答效果,它还能引起迟发性血脑屏障通透性增加和自身免疫反应。MOG是目前常用建立EAE模型的髓鞘抗原,多以诱发慢性EAE(Chronic EAE)模型。
EAE动物模型的建立为多发性硬化症(MS)的临床研究提供了不可或缺的动物实验基础。这一模型不仅模拟了MS在人体内的病理过程,还使得科学家们能够在控制实验条件的情况下,对疾病的发生、发展以及***反应进行深入研究。通过观察和记录EAE动物模型在疾病进程中的表现,科学家们能够收集到大量有价值的实验数据,为MS的发病机制、病理变化以及***效果的评估提供重要依据。此外,EAE动物模型还为新药物的研发和现有***方法的优化提供了实验平台,使得科学家们能够在动物体内测试药物的有效性和安全性,为MS的临床***提供更加可靠的依据。因此,EAE动物模型的建立对于推动MS的临床研究具有重要意义。将抗原与佐剂的混合乳剂直接注射至动物体内,经过一定时间的潜伏期,诱导EAE模型的产生。黑龙江专业的eae模型是哪家
MS的每个方面都需要在EAE模型中进行单独研究,增加了数据分析的难度。小鼠eae模型
用大鼠制备EAE有许多优点,如品系多,选择余地大,繁殖快,同一品系中个体间差异小,实验方便。其中Lewis大鼠诱发的EAE具有稳定性好、敏感性高等特点,其病程为单相,多数可自行恢复,对再次诱发很快产生强的耐受性,多用作EAE激发和缓解机制的研究。而SJL/L及PL/J小鼠对再次诱发的敏感性没有明显降低,且几乎可见到人类MS的所有病理改变,可诱发出更接近于人类MS的缓解复发型EAE模型,但它的EAE发生率及潜伏期变化较大。人们对小鼠的遗传背景了解得比较清楚,因此小鼠更适用于有关基因、细胞间作用等领域的研究。然而不同品系小鼠对EAE的敏感性也不同,有人将其分为EAE—易感(EAE—susceptible)和EAE—抵抗(EAE?resistant)两种类型。基因型分析结果表明,单倍型为H?2s的小鼠(如SJL/J)及H?2q的小鼠(如DBA1/J)属于EAE—易感型。C57BL/10J及P/J小鼠可发生轻微的脱髓鞘病变。BABL/C和AKR/J小鼠基本不发生EAE,被认为是EAE—抵抗小鼠。小鼠eae模型