给药间隔,对于shou次在人体中开展临床试验(firstinhuman,FIH)的免疫细胞zhiliao产品,采用受试者间隔给药的方式,可以避免多个受试者同时暴露而出现预期外的安全性风险。在FIH试验中,对首例患者应加强不良事件监测,还要考虑迟发性不良事件。向同一剂量组内下一例受试者或下一个剂量组受试者给药前,应规定一定的随访间隔,以观察急性和亚急性不良事件。间隔期的选择一般基于非临床研究中急性或亚急性毒性的发生情况,细胞在体内的活性持续时间和/或既往类似产品在人体中的应用经验。在靶向CD19的CAR-T临床试验中,慢病毒传染的CAR-T整合位点显示出更的抗效力。南京CAR-T整合位点实验室
基因zhiliao产品特有的可能会引起迟发性不良反应的风险因素包括:基因组整合活性。基因zhiliao产品可能会采用修饰宿主基因组的技术,并有可能在宿主细胞或组织中持续存在。很多基因zhiliao载体的基因整合不会指向基因组的特定位点,可能在整合位点处产生插入突变、或jihuo整合位点附近的原基因等,进而破坏重要基因功能或增加恶性liu的风险,例如,国外已有多项研究报告在接受了使用γ-逆转录病毒载体转导的基因修饰细胞zhiliao的受试者中发生白血病。因此,对于存在此类风险的产品,有必要进行长期随访临床研究以评估出现迟发不良反应的风险。温州AAV整合位点方法整合位点政策,推荐唯可生物,实验实力强,专业性高,检测效率高,结果准确率高。
生殖毒性基因zhiliao产品应根据受试物的产品类型、作用机制、一般毒理发现、生物分布特征以及患者人群来评估潜在的生殖/发育毒性风险。生殖毒性试验的研究策略和风险评估可参考ICHS5(R3)的建议和ICHM3(R2)、S6及S9中的相关内容。通常需要开展胚胎-胎仔发育毒性和围产期毒性研究,除非有基于具体产品类型的特殊考虑并具有科学合理性。如果基因zhiliao产品拟用于有生育可能或妊娠人群,应研究产品对胎儿的影响(例如细胞因子局部生成后通过胎盘转运),开展胚胎-胎仔发育和围产期毒性试验。如果在一般毒理学试验中发现有潜在的生殖qiguan毒性反应,应开展生育力和早期胚胎发育毒性试验。
CAR-T,全称是ChimericAntigenReceptorT-CellImmunotherapy,指的是嵌合抗原受体T细胞免疫疗法。通过基因转导方法转染T淋巴细胞,赋予T细胞liu靶向性、更强的杀伤活性和持久的杀伤力。从而使其能特异性地识别和高效杀伤肿瘤细胞。目前全球共有5款CAR-T疗法获批上市,4款靶向CD19,1款靶向BCMA,分别是Kymriah,Yescarta和Tecartus(2017年10月、2020年7月获批),Breyanzi和Abecma(2021年2月、2021年3月获批)。CAR-T疗法的未来市场前景乐观。CAR-T慢病毒整合位点检测浅析。
2018年CTL019的一项临床试验中,一名B-ALL病人在接受CAR-CD19zhiliao28天后即达到CR,却在6个月后复发,PCR检测没有发现任何的RCL,结合持续性慢病毒插入位点的克隆丰度分析,研究者较终发现一个携带CAR插入位点的CAR-B细胞克隆。进而发现这个B细胞是CAR-T生产过程中的一个CAR-B副产物,而CAR在该B细胞上的顺式插入表达导致CAR靶标表位屏蔽,导致该B细胞克隆的耐药。这个案例也提示除去CAR-Tzhiliao方法本身的潜在风险外,CAR-T在生产工艺也会产生二次成瘤的风险。含有完整的外源DNA全部整合结构、插入位点旁侧序列和受体基因组在整合位点附近重排结构的CCS reads。武汉病毒载体整合位点方法
慢病毒载体在人角质形成细胞基因组中的整合位点分析。南京CAR-T整合位点实验室
长期随访的观察时间长期随访的持续时间应确保足以观察到受试者因产品特性、暴露情况(生物分布和给药途径)等导致的风险,应不短于迟发性不良反应的预期发生时间。一般而言,针对不同类型的基因zhiliao产品建议如下:具有基因组整合活性的载体(例如γ-逆转录病毒和慢病毒载体)和转座子元件建议观察不短于15年。可以产生持续ganran、或有潜伏再jihuo风险的细菌或病毒载体(如单纯疱疹病毒)建议观察15年或至数据表明不再存在任何风险(ganran或再jihuo)。南京CAR-T整合位点实验室