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原代肝细胞基本参数
  • 品牌
  • LV BioTech,立沃生物
  • 型号
  • 人,猴,大鼠,小鼠,犬,猪,牛,羊
原代肝细胞企业商机

原代肝细胞的分类是非常多样化的,每种类型的细胞都具有不同的形态和功能,它们共同构成了肝脏。接下来我们就来看看肝脏的构成。首先是肝细胞,也称为肝细胞主细胞,它们占据了肝脏细胞总数的80%以上。肝细胞是肝脏重要的细胞类型,它们具有多种重要的生理功能,如合成和分泌胆汁、代谢和储存营养物质等。 其次是肝星状细胞,也称为伊氏细胞。肝星状细胞是肝脏中的一种非常重要的细胞类型,它们具有多种功能,如调节肝脏免疫反应、维持肝脏微环境稳定等。 还有肝内胆管上皮细胞,它们是肝内胆管的主要细胞类型,具有分泌和排泄胆汁的功能。此外,还有肝内血管内皮细胞、肝内间质细胞等。 总之,原代肝细胞的分类是非常多样化的,每种类型的细胞都具有不同的形态和功能,它们共同构成了肝脏。对于研究肝脏疾病和开发新的therapeutic method来说,了解原代肝细胞的分类和功能是非常重要的。立沃生物原代肝细胞可以用于肝脏疾病研究、药物代谢和药物毒性、筛选药物和测试药物的毒性等方面的研究。湛江人体原代肝细胞图片

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原代肝细胞体外培养一般培养在瓶皿等容器中,根据它们是否能贴附在支持物上生长的特性,可分为悬浮型和贴壁型两大类。 原代肝细胞悬浮生长时可以呈单个细胞或细小的细胞团,胞体为圆形。其优点是在培养液中生长,生存空间大,允许长时间生长,便于大量繁殖。正常贴壁原代肝细胞具有接触抑制和密度抑制的双重特性,细胞相互接触后可抑制细胞的运动,因此细胞不会相互重叠于其上面生长。细胞生长、汇合成片后,虽发生接触抑制,但只要营养充分,仍可增殖分裂,但当细胞数量达到一定密度后,由于营养的枯竭和代谢物的影响,细胞分裂停止,称为密度抑制。 当肝细胞被分离后,可以进行悬浮培养或贴壁培养。悬浮培养的原代肝细胞在开始的4~6h内细胞色素P450酶的活性和体内一致,随时间的延长而迅速下降,故悬浮肝细胞一般用于代谢稳定性研究或代谢物谱研究。贴壁培养的原代肝细胞有足够的时间从损伤中恢复过来,保持了正常肝细胞的生物学特征及代谢活性,一般用于酶诱导研究、药物细胞毒性研究、慢代谢药物的代谢稳定性或产物推断研究。江苏草鱼原代肝细胞购买人原代肝细胞的获取和保存非常困难,且存在批次差异和有限的增殖能力,因此在实际应用中受到了一定的限制。

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原代肝细胞培养中去除endotoxin是十分重要的。原代肝细胞培养是一种常用的实验方法,但在培养过程中,细胞可能会受到endotoxin的污染,这会影响实验结果的准确性。 endotoxin是一种由细菌产生的有毒物质,可以引起炎症反应和细胞损伤。在原代肝细胞培养中,endotoxin可能来自于培养基、细胞培养器具或细胞本身。因此,需要采取一些措施来去除endotoxin。 一种常用的方法是使用endotoxin去除剂,例如聚阳离子树脂(Polyclonal Cationic Resin,PCR)或聚乙烯醇(Polyvinyl Alcohol,PVA)。这些去除剂可以吸附endotoxin,从而减少其对细胞的影响。使用endotoxin去除剂的方法比较简单,只需要将其加入培养基中,然后将细胞培养在其中即可。 可以使用endotoxin检测试剂盒来检测培养基中的endotoxin含量。如果检测结果显示endotoxin含量较高,可以考虑更换培养基或使用endotoxin去除剂。 除了使用去除剂和检测试剂盒外,还可以采取一些预防措施来减少endotoxin的污染。例如,使用无菌技术操作、定期更换培养器具和培养基、避免过度搅拌和振荡等。 去除endotoxin是原代肝细胞培养中必须注意的问题。采取适当的措施可以减少endotoxin的污染,保证实验结果的准确性。

贴壁原代肝细胞是一种非常重要的实验材料,常用于酶诱导实验。在进行实验前,需要对细胞进行复苏处理,使其恢复到正常状态。复苏后,需要使用铺板培养基进行悬浮,调整细胞浓度,然后使用胶原包被板进行培养。一般情况下,细胞可以在4~6小时内贴壁。在原代肝细胞细胞贴壁后,需要更换维持培养基,继续维持18小时,以保证细胞状态能够尽可能地恢复。一旦原代肝细胞细胞状态恢复良好,就可以开始进行酶诱导实验了。通过检测代谢活性和mRNA诱导水平,可以了解原代肝细胞细胞的生理状态和功能。整个周期来看,原代肝细胞细胞贴壁后可以维持6~7天的状态。但是随着时间的延长,细胞贴壁状态会变差,细胞会出现脱落悬浮现象。因此,在进行实验时,需要注意原代肝细胞细胞的状态和质量,及时更换培养基,保持细胞的正常生长和功能。同时,也需要注意实验条件的控制,避免对原代肝细胞细胞造成不良影响。通过科学合理的实验设计和操作,可以获得准确可靠的实验结果,为研究原代肝细胞细胞生理和病理提供重要的实验依据。人原代肝细胞保留了细胞在体内环境里的功能与特性,是较为接近临床的一种标准体外短期实验培养模型。

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原代肝细胞可以用于乙肝病毒的对照试验。为探究不同类型肝细胞对乙型肝炎病毒(HBV)的影响,以及不同药物和生物学处理对HBV的影响,可以选择了人原代肝细胞(PHH)树鼩原代肝细胞(PTH)、hNTCP稳定表达猪肝细胞(PPH-hNTCP)和hNTCP稳定表达liver cancer细胞系(Huh7D-hNTCP)作为研究对象。 采用HBV模型,将不同类型肝细胞融合HBV,并进行药物处理和生物学处理。药物处理包括小分子化合物和中药提取物等,生物学处理包括过表达、敲除siRNA和shRNA等。通过对处理后的细胞进行评价,可以了解不同药物和生物学处理对HBV的影响。 这种研究方法的意义在于探究不同类型肝细胞对HBV的影响,为研究HBV的机制提供重要的实验数据。同时,本研究还可以为开发新型抗HBV药物提供参考,为临床克服乙型肝炎提供新的思路和方法。原代肝细胞可以用于药物代谢和毒性测试、肝细胞疾病研究、肝细胞移植等,为人类健康做出了重要的贡献。广州原代肝细胞培养步骤

立沃生物同一批次的原代肝细胞具有高度的稳定性和可重复性,可以为客户提供稳定的实验结果。湛江人体原代肝细胞图片

原代肝细胞由于其敏感性和易受外界环境影响,细胞活率较低,成为制约其应用的瓶颈之一。 适当的方法可以提高原代肝细胞培养活率。首先,选择合适的动物或人体来源是提高原代肝细胞细胞活率的关键。一般来说,年龄较小、健康状态良好的动物或人体组织中的原代肝细胞活性较高,因此应尽可能选择这些来源。 其次,分离和培养过程中的细胞处理方法也会影响原代肝细胞的细胞活率。在分离过程中,应尽可能减少机械或化学损伤,避免对细胞造成不可逆的伤害。在培养过程中,应注意细胞的营养和生长环境,包括培养基的配方、温度、湿度、氧气浓度等因素,以保证细胞的正常生长和代谢。 此外,添加适当的生长因子和细胞因子也可以提高原代肝细胞的细胞活率。例如,添加肝细胞生长因子、肝细胞生长抑制因子等可以促进细胞的增殖和生长,提高细胞的存活率。 综上所述,提高原代肝细胞的细胞活率需要从多个方面入手,包括选择合适的动物或人体来源、优化细胞处理方法、调节培养环境和添加适当的生长因子等。这些措施可以有效提高原代肝细胞的细胞活率,为其在肝脏生理和病理研究中的应用提供了更好的条件。湛江人体原代肝细胞图片

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原代肝细胞比较常用的模型是二维模型。在胶原包被的培养板上,原代肝细胞可贴壁培养,同样高密度培养有助于肝细胞分化状态的维持。但原代肝细胞在体外的培养时间较短,人原代肝细胞在体外培养3天内可保持乙肝病毒易感性,培养两周发生明显的去分化以及细胞凋亡情况。北京大学邓宏魁教授发表在《科学》上的数据显示,通过添加5种小分子化合物抑制原代肝细胞去分化进程,可在体外长期维持肝细胞的分化状态,维持时间长达八周。那为什么原代肝细胞在体外容易去分化呢?肝细胞在体外缺乏了肝细胞与肝非实质细胞的交流,又或者缺乏了肝脏的三维结构。基于以上问题与分析,我在硕士期间开展了肝细胞与肝非实质细胞的共培养工作。结果显示...

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