超滤离心管,备有四种材质的超滤膜:聚醚砜、三醋酸纤维素、再生纤维素和Hydrosart,可根据不同要求灵活选用;两种回收浓缩液的方法:既可用吸管直接吸取并回收,又可将离心管放入离心机反甩,将浓缩液甩入回收帽中,加盖保存。这两种方法都可使浓缩液达到近乎完全回收;截留分子量普遍,配有3K、5K、10k、30K、50K、100K、300K、1000K、0.2μl的聚醚砜膜;新推出产品膜2K型,具有极低的蛋白吸附特性,高流速、高通量,是免疫球蛋白浓缩和脱盐的理想用膜。用以浓缩蛋白,如果要换Buffer,在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候,轻轻加入新的Buffer(经0.22um超滤膜超滤),再 浓缩至1ml左右,连续三次,之后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定,一般不多于500ul,也有浓缩至200ul以内的情况。按照每次至少10倍左右的体积浓缩算,三次达到1000倍以上,基本上可以达到换buffer的目的。超滤离心管在基础科学研究中也具有重要意义,如蛋白质结构解析、酵母遗传学等领域。台州30K超滤离心管定制
超滤离心管的分子量选择:按照样品量和目标分子量选择适当的超滤离心管,为了得到较高的收率,所选滤膜的截留分子量MWCO建议选择所需截留分子大小的1/3左右,不超过目标分子量的一半。因为超滤膜上孔径是平均孔径,膜上的孔并非均匀,离心高压下也可能渗漏,因此截留孔径越小,流速越慢但截留比例更大。如果样本浓度低体积大,可选择较小容积的超滤管多次重复加样离心。如果同时需要脱盐和去除可溶小分子杂质,可将待浓缩样品稀释到超滤管较大容积再离心,重复2次可除去99%盐。避免过长时间或者过速离心,虽然优良品质的产品都有防死端设计,可避免过度离心造成膜表面干而造成不可逆吸附。台州30K超滤离心管定制超滤离心管可以用于分离各种生物样品,如血浆、细胞培养液、酶溶液等。
脱盐、更换缓冲液或渗滤是从含有生物分子的溶液中去除盐分或溶剂的重要方法。盐分去除或缓冲液更换可通过超滤管来完成,具体过程是浓缩样本,弃去滤出液,然后向浓缩液中加入任何所需的溶剂,恢复到样本原先的体积。"洗出"的过程可反复进行,直到杂质的浓度被充分降低。关于超滤管的常见问题与解答:Q:超滤管的膜材质是什么?A:超滤管的膜材质为默克密理博特有的Ultracel再生纤维素膜,生产工艺严格,截留分子量明确而准, 蛋白吸附损失小。Q:如果要用超滤的方法分离两种蛋白,那么这两个蛋白的大小需要相差多少?A:按照经验,建议两个蛋白的分子量要相差 一个数量级(10倍)。
超滤离心管应用:1、组成部分:该装置包括一个盖子、一个过滤器和一个50ML的离心管。2、带有摆桶式或定角式转子的离心器以及可以容纳50mL试管的样本腔/试管座。①注意:为了避免在离心过程中损坏装置,在旋转前请检查间隙。 3、带有200微升(μL)的移液管,用于浓缩液回收适用性。①注意:该产品未经消毒,只供一次使用,保质期3年。为确保对预定用途的适用性,建议进行初步的回收和截留试验。4、浓缩含有抗原、抗体、酶、核酸(单株或双株DNA/RNA样本)、微生物、洗出液和净化样本的生物样本。5、净化组织培养基提取液和细胞溶解液中的大分子成分,从反应混合液中去除引物、连接或分子标记,在HPLC之前去除蛋白质。超滤离心管通常由聚碳酸酯等材料制成,可承受高速旋转和高温高压。
超滤离心管采用再生纤维素膜,具有较高的回收率(>90%)和 高浓缩倍数(80–100 倍),100%完整性检测确保性能可靠,主要应用与生物样品与蛋白浓缩、大分子组分的纯化、脱盐和缓冲液更换。再生纤维素膜具有一系列截留分子量,用户可根据目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积,选用不同体积大小和MWCO的超滤管。超滤离心管备有四种材质的超滤膜:聚醚砜、三醋酸纤维素、再生纤维素和Hydrosart,可根据不同要求灵活选用。超滤离心管应用范围:*生物样品浓缩:包括抗原、抗体、酶、核酸或微生物。*对组织培养提取物或细胞裂解液中大分子组分的纯化。*对稀释或从柱洗脱液预先纯化的蛋白质进行浓缩。*脱盐和缓冲液更换。超滤离心管也可用于水处理过程中去除污染物和杂质。台州30K超滤离心管定制
超滤离心管的优点包括速度快、效率高、易于操作和清洗等。台州30K超滤离心管定制
选择合适的超滤管,主要考虑MWCO和浓缩体积,较常见的是10kD。到底选择多大截留分子量比较合适呢?10kDa、 5kDa、还是30kDa?通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤 管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同,表格中有。新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。台州30K超滤离心管定制