塑料离心管的优点是透明或者是半透明的,它的硬度小,可用穿刺法取出梯度。缺点是易变形,抗有机溶剂腐蚀性差,使用寿命短。塑料离心管都有管盖,它的作用是防止样品外泄,尤其是用于有放射性或强腐蚀性的样品时防止样品外泄是很重要的一点;管盖还有一个作用是防止样品挥发以及支持离心管,防止离心管变形。在挑选这一点的时候还要注意检查管盖是否严密,在试验时能否盖严,以到达倒置不漏液;我们都知道在塑料离心管中,常用材料有聚乙烯PE),聚碳酸酯(PC),聚丙烯(PP)等,其中聚丙烯PP管性能会相对较好,所以,我们在挑选塑料离心管时尽可能的考虑聚丙烯的塑料离心管。超滤离心管可以用于提取动植物组织中的酶、元素等生物活性分子,以进行进一步的生化学和医学研究。绍兴100K超滤离心管规格
玻璃离心管,大家都知道,玻璃是很容易碎的,所以如果我们选择玻璃离心管时,离心机的离心力一定不能调得很高,还需要将玻璃离心管垫上橡胶垫,避免破碎,玻璃离心管的优点是管体透明,利于观察分离情况。钢制离心管,钢制离心管硬度大、抗热、抗冻、不变形等优点被普遍应用,一般钢制离心管都会循环使用。离心管尽量选择pp材质的塑料离心管,也可以选钢制的,玻璃材质因为其容易破碎,分离转速要求高,需将转速控制在2000rpm/min内,所以通常情况下不做选择。离心管的选择还可以根据自己所分离样品的大小来决定是选择微量离心管、普通离心管、大容量离心管还是离心瓶。绍兴再生纤维素离心管厂家在使用超滤离心管时,需要注意保持管子清洁、干燥和无污染。
超滤离心管的分子量选择:按照样品量和目标分子量选择适当的超滤离心管,为了得到较高的收率,所选滤膜的截留分子量MWCO建议选择所需截留分子大小的1/3左右,不超过目标分子量的一半。因为超滤膜上孔径是平均孔径,膜上的孔并非均匀,离心高压下也可能渗漏,因此截留孔径越小,流速越慢但截留比例更大。如果样本浓度低体积大,可选择较小容积的超滤管多次重复加样离心。如果同时需要脱盐和去除可溶小分子杂质,可将待浓缩样品稀释到超滤管较大容积再离心,重复2次可除去99%盐。避免过长时间或者过速离心,虽然优良品质的产品都有防死端设计,可避免过度离心造成膜表面干而造成不可逆吸附。避免过度浓缩,体积越小,越容易因表面吸附而损失得率。离心后用Tips轻轻吹吸几次滤膜截留的溶液,必要时补加一定体积的缓冲液冲洗膜表面,有助于减少膜表面吸附,能提高回收率。尽量避免Tips接触膜表面。
超滤离心管使用的是再生纤维素膜,这种材质是蛋白吸附较低的超滤膜。但是对于一些疏水性蛋白或非极性蛋白,它们和膜的非特异吸附可能会增强,对于这种情况,可以尝试在实验前对超滤管进行封闭处理,也可以尝试换成Amicon Ultra0.5或2来进行实验,通过减小膜面积来降低非特异性吸附。超滤膜含有微量甘油。如果此成分干扰分析,可用缓冲液或Milli-Q水预清洗。如果干扰仍存在,用0.1N NaOH清洗,然后用缓冲液或Milli-Q水再次清洗后甩干。超滤离心管也可用于从血浆或尿液中提取蛋白质和核酸等大分子化合物。
使用后用0.1M NaOH泡24h,然后20%乙醇浸泡保存。这个我是听老板们说的,的确乙醇泡完后孔径会增大,基本就是5-10KD较大,也就是说如果你的蛋白在21KD以上,应该没问题。或者可以不用乙醇泡,用NaOH洗之后直接用无菌水保存,每周换一下液体,应该没有问题。看看说明书不就结了!我原来在CRO的时候一直是重复用的,也没见什么不好啊!短期会用的话,用20%的乙醇泡着,回头拼命用millipore的水充干净,然后在用样品缓冲液平衡一下就好,至于有些人说的改变孔径,也没那么大影响的,你至少跟目的蛋白分子量差别3倍的截留分子量才安全的不是吗?1个月以内不用的话,建议用100mM的NaOH保存!更长时间的话加0.02%的叠氮钠,但那个东西强致疾病物,不建议使用。理论上截留目标物,孔径应选1/3~1/5的膜;透过目标物,孔径应选5-10倍的膜。使用超滤离心管时,应注意保持样品干燥、无污染和清洁。绍兴再生纤维素离心管厂家
使用超滤离心管时应注意避免过度压力造成膜堵塞或损坏,并影响实验结果。绍兴100K超滤离心管规格
我用的是3500g,4度离心,时间可以自己控制,取决于你之后的浓缩体积,我一般是200ul左右。千万别一下离心时间太长,不同的蛋白浓缩的速度不同,有的需要长时间离心,有的则一下子就好。当然也和你的蛋白是否比较纯,所用的是什么buffer,还有蛋白的浓度有关系。所以离心时要先短些时间观察一下你的浓缩速度,不要一下子浓缩过了,甚至形成沉淀就得不偿失了。另外其实他们的管子都设计的是一次性使用,所以如果想重复使用,不要离得速度太高,4000-4500RPM就差不多了,另外重复使用时要看看管壁上有没有裂纹,现在的管子好像不如从前的结实了。绍兴100K超滤离心管规格