超滤管产品系列包括5种不同的截留分子量(即标称分子量限值, NMWL)。这些超滤管只供研究使用,不适用于诊断程序。1).浓缩含有抗原、抗体、酶、核酸(DNA/RNA样本,单链或双链)、噬菌体等微生物样本。2).纯化组织培养提取液或细胞裂解液中的大分子成分,去除反应液中的引物、接头或分子标记,在HPLC前去除蛋白质。3).除盐,缓冲液更换,或渗滤。超滤管提供了两个微量离心管。在操作过程中,一个用于收集滤出液,而另一个用于回收浓缩后的样本。超滤管的超滤膜含有微量甘油。如果担心干扰后续分析,可用缓冲液或Milli-Q水进行预清洗。如果干扰仍然存在,可用0.1M NaOH清洗,再用缓冲液或Milli-Q8水清洗并甩干。超滤离心管在医学诊断和缓解中也具有重要作用,如血液透析、肝功能检测等领域。舟山蛋白分离离心管生产公司
选择合适的超滤管。通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。新买来的超滤是干燥的,使用前加入超纯水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。不同离心机的转速rpm换算成g之后,有所不同。河北高离心力离心管选择超滤离心管还可以用于提取DNA、RNA等核酸分子,并在基因工程和生物技术中发挥重要作用。
超滤离心管关于回收率的疑问?一般对浓度大于0.1mg/ml的溶质进行回收,回收率在90%以上。通常,样品损失是由于滤膜表面和料管表面的非特异性吸附造成的。为了获得较高的回收率,所选滤膜的截留率约为目标蛋白的1/3。超滤膜是一种非对称膜,其孔径呈正态分布。在高压离心下也可能发生泄漏,在这种情况下蛋白质可能会发生变形。因此,截留孔径越小,流速越慢,但回收率会更高。浓缩过程中有蛋白质沉淀,如何处理?如果蛋白质浓缩过快或过多,都可能造成蛋白质沉淀,浓缩后的蛋白质之后浓度不宜过高;对于对浓缩速度敏感、易沉淀的蛋白质,建议改进方法如下:1)降低离心速度,2)使用截留分子量较大的超滤膜3) 吹吸浓缩管,然后离心。
超滤离心管应用:除盐、渗滤或更换缓冲液;浓缩含有抗原、抗体、酶、核酸(单株或双株 DNA/RNA 样本)、微生物、洗出液和净化样本的生物样本;净化组织培养基提取液和细胞溶解液中的大分子成分,从反应混合液中去除引物、连接或分子标记,在 HPLC 之前去除蛋白质。产品组成:超滤离心管包括一个盖子、一个过滤器和一个离心管。产品特点:较高的样品回收率 (> 90% 的样品回收率 );垂直膜的设计减少浓缩所用时间(10-15分钟);经过严格的泄漏测试;无 DNase、RNase,无热原、无内元素。使用这个超滤管,厂家强调一定是一次性的,这个超滤管必须只能使用一次,不能重复使用!超滤离心管可以用于分离各种生物样品,如血浆、细胞培养液、酶溶液等。
当浓缩到剩下1ml时,取50ul缓冲溶液,加入10ul流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了,将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管,用5mgml的BSA离心10min,再取流穿,跑蛋白胶或Bradford粗测,继续加入剩下的蛋白液浓缩(在冰上操作,防止蛋白受热),直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀,导致堵管。若发生沉淀,要确定沉淀的具体原因,是蛋白浓度过高还是Buffer不合适;前者可用多根超滤管同时超滤,降低浓度的办法解决,后者的方法是换不同的缓冲溶液,直到蛋白不发生沉淀为止。超滤离心管可以有效地去除溶液中的杂质,使样品更纯净。四川外泌体超滤离心管生产公司
超滤离心管可用于分离和纯化各种大分子化合物,如蛋白质、核酸、多糖等。舟山蛋白分离离心管生产公司
塑料离心管的优点是透明或者是半透明的,它的硬度小,可用穿刺法取出梯度。缺点是易变形,抗有机溶剂腐蚀性差,使用寿命短。塑料离心管都有管盖,它的作用是防止样品外泄,尤其是用于有放射性或强腐蚀性的样品时防止样品外泄是很重要的一点;管盖还有一个作用是防止样品挥发以及支持离心管,防止离心管变形。在挑选这一点的时候还要注意检查管盖是否严密,在试验时能否盖严,以到达倒置不漏液;我们都知道在塑料离心管中,常用材料有聚乙烯PE),聚碳酸酯(PC),聚丙烯(PP)等,其中聚丙烯PP管性能会相对较好,所以,我们在挑选塑料离心管时尽可能的考虑聚丙烯的塑料离心管。舟山蛋白分离离心管生产公司