病理医师日常工作中经常说的一句话应该就是“做个免疫组化吧”;不管是临床医师,还是患者,他们问的多的问题则是“为什么要做免疫组化?”病理医师通过“特殊染色”来进行细胞的识别。这一做法的依据是特定细胞和组织中的成分不同、则化学性质不同,通过染色的方法则可以呈现不同颜色。不过,由于组织固定或储存等,会造成相应物质的活性降低甚至消失,因而限制了特殊染色方法的应用。随着免疫学研究的进展,根据抗原与相应抗体间特异性结合的性质,则有了现在免疫组化的方法:不同细胞、不同组织中抗原有一定差异,抗体与被测组织中的特定抗原结合,进而通过一定显色方法将结合的抗体显示出来。如有相应显色,则证实可能有被测抗原;无显色则可能无被测抗原。当然,这一方法中需注意相应的“例外”,如抗体的非特异性结合、非特异性显色,则容易造成“假阳性”;或者虽有相关抗原、但所用抗体与该抗原并未结合等,则容易造成“假阴性”。随着免疫组化的应用经验的增加,这些问题在常规应用中尽量得以避免,前者如各种显色方法的优化;后者如抗原修复方法的优化、新型抗体开发及选择。有没有做免疫组化比较好的公司?内蒙古什么是免疫组化要多少钱
免疫组化分类中免疫酶标方法,英瀚斯生物为您介绍。免疫酶标方法是继免疫荧光后,于60年代发展起来的技术。基本原理是先以酶标记的抗体与组织或细胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,通过光镜或电镜,对细胞表面和细胞内的各种抗原成分进行定位研究。免疫酶标技术是目前定位准确、对比度好、染色标本可长期保存,适合于光、电镜研究等。免疫酶标方法的发展非常迅速,已经衍生出了多种标记方法,目前在病理诊断中广为使用的当属***法(过氧化物酶-抗过氧化物酶)、ABC法(卵白素-生物素-过氧化物酶复合物)、SP法(链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶)、即用型二步法(聚合物链接)等。山东病理免疫组化多少钱英瀚斯生物免疫组化,高效高质量出结果。
细胞属性的判定,免疫组化也可以进行这方面的临床应用。通过特定抗体标记出细胞内相应的抗原成分,来判定细胞的属性,确定cancer的来源。如细胞角蛋白(CK)是上皮性标记,CK阳性提示cancer为上皮源性cancer;降钙素抗体是甲状腺髓样cancer特有的标记;甲状腺球蛋白(Tg)阳性提示是甲状腺滤泡性cancer;前列腺特异性抗原(PSA)只见于前列腺上皮;胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性则提示胶质cancer;CD20和CD79a阳性则提示B细胞淋巴瘤;平滑肌肌动蛋白(Actin)阳性提示cancer为平滑肌源性;胃肠道间质瘤中原cancer基因蛋白产物CD117阳性;血管源性cancer中内皮细胞标记物CD34阳性等等。如果您需要做实验外包,可以与我们英瀚斯生物进行联系。
免疫组化的结果分析:
免疫组化实验通常需要设置阳性对照、阴性对照(或替代对照)(阳性对照是排除方法和实验系统有无问题;阴性对照与替代对照是排除有无非特异性染色)。一般情况下,阳性对照颜色的特点为:Ag定位,包浆、胞核、胞膜、间质具有结构性。且染色的强度不同(颜色深浅不一);阴性对照的特点为:染色细胞与组织无区别,颜色具有弥散性,分布均匀。
英瀚斯生物可承接各类病理染色,包括免疫组化。
说明:免疫组化实验可以对结果进行定量分析,但要实验得到的必须是高质量的染色切片,要求背景染色浅且特异性染色较深,这样分析的结果才会比较准确。 有没有推荐的免疫组化外包公司?
实验失败常见问题分析有哪些:
为什么在显微镜下观察发现所有的切片都成阴性?
答:这种现象主要是由操作不当导致,可能的原因有:1.染色操作不当,致使染色失败;2.漏加一种抗体或者制备出的抗体没有活性;3.缓冲液中有叠氮化钠,抑制了酶的活性;4.复染或脱水剂使用不当等。建议逐一排查,找到原因后重新进行实验。
在显微镜下观察发现所有的切片都成阳性,这是为什么?答:与上一个问题类似,出现的原因也是试验操作存在问题,可能的原因有:1.切片在染色过程中抗体过浓,或者干片了;使用的呈色底物溶液已变色或呈色反应时间过长;3.抗体温育的时间过长等。
在显微镜下观察发现切片的背景很深,这是为什么?答:以下几方面会导致切片的背景过深:1.蛋白质封闭不够或所用血清溶血,造成抗体的非特异性反应;2.内源性过氧化酶没有完全阻断,显色过程中过氧化酶与酶底物反应,造成背景;3.底物呈色反应时间过长或呈色反应后漂洗不彻底。 做免疫组化需要多少钱?宁夏病理免疫组化外包
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免疫组化实验所用的组织和细胞标本是什么样的?
实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类,前者包括石蜡切片(病理大片和组织芯片)和冰冻切片,后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。其中石蜡切片是制作组织标本**常用、**基本的方法,对于组织形态保存好,且能作连续切片,有利于各种染色对照观察;还能长期存档,供回顾性研究;石蜡切片制作过程对组织内抗原暴露有一定的影响,但可进行抗原修复,是免疫组化中优先的组织标本制作方法。
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