超滤离心管从细胞培养上清液中浓缩蛋白,在园子里找到一些关于浓缩蛋白的一些帖子,但还有些问题还是向园子里的大虾请教一下。我们定的是 15ml规格的管子,不知道有没有谁以前做过的,有关于转速,时间给一些建议,另外细胞上清液离心前是否需要什么预处理?离心之后回收蛋白时怎么尽量减少损失?如果要把管子重复利用,NaoH清洗后,如何在20%的乙醇中保存?是将其浸到乙醇中防于4度,还是在管子中灌入乙醇?我用过5ml的管子,当时使用的转速是4000rpm 8min,可以把5ml的样品液浓缩到约200ul,这只供参考,具体情况还要由您的样品决定。我保存5ml管子的方法是把内管取出,浸泡于装有20%乙醇的烧杯中。四度保存。超滤离心管是现代实验室必不可少的设备之一,为科研工作者提供了便利和支持。100K超滤离心管价钱多少
离心过程中注意是否发生蛋白沉淀,导致堵管。若发生沉淀,要确定沉淀的具体原因,是蛋白浓度过高还是Buffer不合适;前者可用多根超滤管同时超滤,降低浓度的办法解决,后者的方法是换不同的缓冲溶液,直到蛋白不发生沉淀为止。用以浓缩蛋白,如果要换Buffer,在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候,轻轻加入新的Buffer(经0.22um超滤膜超滤),再浓缩至1ml左右,连续三次,之后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定,一般不多于500ul,也有浓缩至200ul以内的情况。按照每次至少10倍左右的体积浓缩算,三次达到1000倍以上,基本上可以达到换buffer的目的。离心管供应商离心机转速会影响到超滤效果,因此需要根据实验要求调整相应的转速。
超滤离心管是内部装有超滤膜的用于浓缩和净化生物样本的一次性耗材。15ML的超滤离心管可处理样品量达20ML,具有快速超过滤功能,能够达到较高的浓缩系数,易于从稀释液和复杂的样本组合进行浓缩液回收。竖式设计以及其双面的超大过滤面积能提供快速的样本处理和较高的样本回收率(通常大于90%稀薄的初始溶液),并能进行80倍浓缩。典型的处理时间为15至40分钟。竖式设计将溶质极化和之后造成的滤膜结垢降至低,过滤装置中的物理止滤点防止过滤器旋转过度使样本干燥和造成样本损失。浓缩液用移液管从过滤器的样本槽中收集,而超过滤滤出液则收集到所提供的离心管中。该装置可在摆桶或定角转子中旋转。的离心管有超过7种不同的截留分子量(截留分子量,MWCO)3Kda,5Kda,10Kda,30Kda,50Kda,100Kda,500Kda等。
我们面对上面客户反映的问题使用2次以上出现问题是很正常的,但是我们也不能保证客户使用5次,8次,还是更多次就一定会出现穿孔不能用,我们必须再一次强调提醒做实验的各位老师,这个超滤管必须严格按照说明书规定,一次性使用,不要重复使用,重复使用虽然有的人可以用几次,但是过滤效果已经严重影响了,效果肯定一次次的下降!你说这样过滤的样品做后续实验,那你的后续实验还可信吗?所以厂家也一再强调较好不要重复使用!另外,有的客户说自己的超滤管使用一次就碎了,这是什么原因呢?超滤管的质量问题还是离心机转速的问题呢?说到这里,我们也再一次提醒大家超滤管使用如果转速太高,离心力肯定会更大!这样不断用力磨损,很容易一次就碎了,也可能使用几次碎了!超滤离心管通常具有不同材质的选择,以适应不同化学环境下的使用需求。
超滤管产品系列包括5种不同的截留分子量(即标称分子量限值, NMWL)。这些超滤管只供研究使用,不适用于诊断程序。1).浓缩含有抗原、抗体、酶、核酸(DNA/RNA样本,单链或双链)、噬菌体等微生物样本。2).纯化组织培养提取液或细胞裂解液中的大分子成分,去除反应液中的引物、接头或分子标记,在HPLC前去除蛋白质。3).除盐,缓冲液更换,或渗滤。超滤管提供了两个微量离心管。在操作过程中,一个用于收集滤出液,而另一个用于回收浓缩后的样本。超滤管的超滤膜含有微量甘油。如果担心干扰后续分析,可用缓冲液或Milli-Q水进行预清洗。如果干扰仍然存在,可用0.1M NaOH清洗,再用缓冲液或Milli-Q8水清洗并甩干。使用超滤离心管时应注意避免过度旋转造成机械损伤或故障,并及时维护保养设备。北京外泌体超滤离心管生产商
超滤离心管也可用于水处理过程中去除污染物和杂质。100K超滤离心管价钱多少
超滤离心管使用的是再生纤维素膜,这种材质是蛋白吸附较低的超滤膜。但是对于一些疏水性蛋白或非极性蛋白,它们和膜的非特异吸附可能会增强,对于这种情况,可以尝试在实验前对超滤管进行封闭处理,也可以尝试换成Amicon Ultra0.5或2来进行实验,通过减小膜面积来降低非特异性吸附。超滤膜含有微量甘油。如果此成分干扰分析,可用缓冲液或Milli-Q水预清洗。如果干扰仍存在,用0.1N NaOH清洗,然后用缓冲液或Milli-Q水再次清洗后甩干。100K超滤离心管价钱多少