HE染色反蓝的原理：苏木素染液，细胞核内的染色质主要是去氧核糖核酸（DNA）,DNA的双螺旋结构中，两条链上的磷酸基向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木素精碱性染料以离子或氢键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。 分化：苏木素染色之后，用水洗去未结合在细胞上的染液，但是在细胞核中结合过多的染料和细胞浆中吸附的染料必须用分化液1%盐酸酒精脱去，才能保证细胞核和细胞浆染色的分明，把这个过程称为染色的分化作用。因酸能破坏苏木素的醌型结构，使色素与组织解离，分化不可过度。蓝化：分化之后苏木素在酸性条件下处于红色离子状态，在碱性条件下处于蓝色离子状态，而呈蓝色，所以分化之后用水洗去酸而中止分化，再用弱碱性水使苏木精染上的细胞核变呈蓝色，称蓝化作用，一般多用自来水浸洗即可变蓝，也可用温水（50度温水比较好）变蓝。HE染色是病理实验中比较用的一种基础染色方法。辽宁推荐的HE染色
HE染色常见问题：切片染色不均匀，有片状的弱着**存在答：（1）取材时组织太厚，固定过久，导致深部组织固定不佳，而表浅组织过度固定，而透明、脱水、浸蜡均是如此，这样在后期染色时就会出现染色不均匀。应该将厚的组织剖开固定。（2）制片过程有问题，切片厚薄不一，或者有刀痕，或组织与玻片间存在气泡。同一张切片厚薄不一，一般都是在制片时，刀片固定不佳或刀片钝或刀片与组织角度不佳（一般比较好角度为5°）（3）脱蜡前未烘烤，脱蜡时间过短或脱蜡液使用过久，导致脱蜡不彻底。（4）染色液过少，着色不均匀；或染色时部分组织干涸而另一部分湿润，这样会导致组织吸附染料的能力不一。（5）分化不当。南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。辽宁性价比高的HE染色报告HE染色需要哪些材料及实验步骤。
HE染色：在组织病理学中，苏木素-伊红染色是一种日常使用比较普遍的常规染色方法。常规苏木素染色的对比染色是用伊红，也有采用焰红，因为焰红比伊红色泽更鲜明，还有采用橘黄G，比布里希猩红，波尔多红等作为对比染色。伊红是比较常用的胞质染料，本身溶于醇而不溶于水，为砖红色粉末状或酱红色结晶。配方：伊红Y（水溶）0.5-1g，蒸馏水99ml。如果取用伊红Y（醇溶性）应当溶于99ml 75%或95%的乙醇中。如果在伊红液中加入0.5ml冰醋酸，可以加速其染色过程，使得胞质的色泽更加艳丽。结果是细胞核呈蓝色，胞质、肌肉、结缔组织、红细胞和嗜伊红颗粒呈不同程度的红色。钙盐和各种微生物也可染成蓝色或紫蓝色。
HE染色观察肝脏HE染色切片，首先要在显微镜下找到肝脏的标志性结构——肝小叶。显微镜首先调4倍物镜，调准焦螺旋至视野清晰，可以看到肝小叶结构。人的肝小叶之间结缔组织少，小叶分隔不明显，但动物如猪或小鼠，其肝小叶分界非常明显。肝小叶**有**静脉，在横切片上显示为空洞。肝小叶之间为将物镜调制10倍或20倍，就可以清楚地看到肝小叶结构。肝细胞以**静脉为中心向周围放射状排列，称为肝板。一般在20倍物镜下可以清晰看到肝细胞。20倍物镜下，肝细胞内染色为蓝色的是细胞核，细胞核大而圆，居中，异染色质少而着色浅，能清晰看到核仁。肝细胞胞质丰富，多成嗜酸性，当蛋白质合成旺盛时，胞质内出现散在的嗜碱性物质。肝细胞内有丰富的细胞器比如溶酶体、高尔基体、内质网，等等，但是在光镜下是无法看到的，需要在电镜下才能观察到。当然，肝小叶内除了肝细胞，还有胆小管、肝血窦、肝巨噬细胞等组织形态，但是在HE染色时并不容易观察到。做肝脏HE染色切片主要目的一般都是为了观察肝细胞形态是否完整、胞核有无增大、肝小叶形态是否完整，以检测药物等刺激因素对肝脏的损伤作用。脾脏组织HE染色如何观察。
HE染色脱蜡不净的原因及验证方法：1)二甲苯使用过久，含蜡成分太高或脱蜡效果差：可更换二甲苯验证。2)切片经烤片，冷却后放入二甲苯脱蜡或室温太低；延长拖拉时间或用热的切片脱蜡验证。3)脱蜡时间太短或振荡太少，幅度太小；可延长脱蜡时间或以多振荡来验证。4)洗涤二甲苯用的乙醇使用时间过久，导致乙醇中二甲苯含量过高，二甲苯残留在切片上（由于二甲苯与水不相溶，切片上有二甲苯的地方，苏木精就没有办法渗透进去，在切片染色完成后留下了点状的不着**域）：更换各道乙醇验证。5)二甲苯、乙醇质量不佳（偶有试剂瓶内装的试剂与试剂名不相符）：换批号验证。6)更换脱蜡液体时试剂拿错：需重新配置验证。7)更换脱蜡液体时试剂次序放错：需重新配置验证。8)烤片时间短，切片上水分没有烤干，也会导致着色不匀，出现点状发白区域。关于HE染色，你不知道的实验技巧。甘肃质量好的HE染色价格
骨组织HE染色的操作流程。辽宁推荐的HE染色
HE染色伊红溶液中加入少量的冰醋酸(一般小于10%就行)，可改变组织等电点，促进伊红与胞浆蛋白质结合，其本身不参与染色的反应。当苏木素染色效能极高，很短时间就导致核浆共染时，可适当地添加冰醋酸(一般不超过2%)，抑制苏木素染色效能，方便控制染色时间，同时也能提高苏木素染色的清晰度。现在有商用的HE染色液卖，但是质量参差不齐。如果课题组较大，完全可以自己配制，效果也挺好。配制为乙酸浓度5%-7.5%和盐酸浓度为0.5%-1%的苏木素溶液放置一周，即可完全成熟，染色效果好，氧化膜和结晶都很少(一般苏木素中酸度越低越容易产生氧化膜和结晶，这也是提示更换苏木素的标志之一)。辽宁推荐的HE染色
